耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌Ⅰ類整合子和ISCR1耐藥性及流行病學(xué)分析.pdf

1、目的：探討臨床分離碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia，CRKP）Ⅰ類整合子及插入序列共同區(qū)（Insertion sequence common region，ISCR）分布情況和耐藥基因盒類型，分析我院CRKP耐藥機制與分子流行病學(xué)特征。
　　方法：運用Vitek2 compact全自動微生物分析儀對臨床分離的44株CRKP進行鑒定和藥敏試驗，以改良Hod

2、ge試驗檢測碳青霉烯酶，以乙二胺四乙酸（Ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA）協(xié)同法分析金屬β-內(nèi)酰胺酶，運用聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase chain reaction，PCR）方法鑒定細菌攜帶的耐藥基因；以腸桿菌基因間重復(fù)性共有序列（Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus，ERIC） PCR和多位點序列（multilocus sequen

3、ce typing，MLST）分型技術(shù)分析耐藥菌株同源性。以PCR技術(shù)檢測CRKP中整合酶基因IntⅠ/Ⅱ/Ⅲ、Ⅰ類整合子可變區(qū)、ISCR1、ISCR1可變區(qū)及Ⅰ類整合子與ISCR1關(guān)系，并對可變區(qū)進行測序分析。
　　結(jié)果：臨床44位CRKP感染者的平均年齡(65.3±25.6歲)，且伴有基礎(chǔ)疾病如糖尿病、高血壓和顱腦外傷。44株CRKP中痰液標(biāo)本的占70.4％，分離自ICU和神經(jīng)外科的CRKP居多，其構(gòu)成比分別為22.7%（10

4、/44）、29.5%（13/44）。分別有88.6%（39/44）和47.7%（21/44）的患者使用過β-內(nèi)酰胺酶類和碳青霉烯類藥物。體外藥敏實驗顯示所有菌株對培南類藥物耐藥，95.0%以上菌株對頭孢類藥物耐藥。所有菌株均檢出KPC-2基因，未檢出NDM-1、SME、IMP、OXA-48、VIM和GES基因；40株攜帶CTX-M-9基因，36株攜帶TEM基因，10株攜帶 SHV基因。通過ERIC-PCR將菌株分為13型，Ⅰ型為主要流行

5、型（38.6%，17/44）；MLST分型結(jié)果，CRKP被分為10個ST型，其中以ST11型為主（59.1%，26/44）。44株CRKP中Ⅰ類整合酶基因陽性32株，陽性率為72.7%，其中29株檢出可變區(qū)結(jié)構(gòu)，陽性率65.9%，序列分析為耐藥基因盒aadA，未檢出Ⅱ/Ⅲ類整合酶基因。ISCR1陽性6株，1株檢出ISCR1可變區(qū)，序列分析為耐藥基因盒sul1。1株CRKP中的ISCR1直接與Ⅰ類整合子3'保守區(qū)下游串聯(lián)。
　　結(jié)論