如何看抗體檢測(cè)結(jié)果及檢測(cè)應(yīng)用

1、如何看抗體檢測(cè)結(jié)果及抗體檢測(cè)應(yīng)用,隋海亮2014年7月5日,文檔密級(jí)：內(nèi)部公開,一、豬瘟,ELISA原理 ——阻斷（競(jìng)爭(zhēng)）ELISA,例如：CSFV-Ab、PRV-gI、PRV-gB,豬瘟疫苗的免疫評(píng)估—關(guān)注兩點(diǎn),陽性率：豬瘟抗體（阻斷率（Blocking）≥40%，判為陽性結(jié)果；30%＜Blocking＜40%，判為可疑結(jié)果；Blocking≤30%，判為陰性結(jié)果）；免疫合格率：阻斷率（Blocking）≥50%的，即為免疫合格

2、。免疫合格的比例即為免疫合格率。,,變異系數(shù)： Coefficient of Variation (CV) 變異系數(shù)計(jì)算的是平均個(gè)體的變化，以平均滴度的背離的百分?jǐn)?shù)來表示公式如下 標(biāo)準(zhǔn)偏差（STDEV） CV= X 100% 平均阻斷率CV≤40%,顯示了群內(nèi)豬只有一個(gè)均

3、衡的、相似反應(yīng)CV≥60%,顯示了群內(nèi)豬只滴度反應(yīng)變化高于正常估計(jì)值,,豬瘟檢測(cè)的應(yīng)用,免疫評(píng)估：商品豬：豬瘟二免后4-6周 ，要求：陽性率 ≥80%,CV≤40% 種豬群（公豬和母豬）：豬瘟免疫后4-6周，要求 ：免疫合格率≥80%（嚴(yán)格一點(diǎn)，要≥90%）,CV≤40%后備豬（全群檢測(cè)）：進(jìn)入隔離舍后1-2周、進(jìn)入配種舍前1個(gè)月（6-6.5月齡），要求： Blocking ≥40%，陰性豬補(bǔ)打疫苗，3周后復(fù)檢，不合格淘汰。,豬

4、瘟檢測(cè)的應(yīng)用,仔豬首免日齡的確定：選30-60頭仔豬，日齡和體重相近，每窩1-2頭，確認(rèn)沒有野毒感染的風(fēng)險(xiǎn)，不接種豬瘟疫苗連續(xù)采血：出生后7天、14天、21天、28天、35天、42天檢測(cè)抗體水平 要求：CSFAb Block≤30%仔豬占20%-40%時(shí)為首免日齡(依據(jù)感染壓力和平均阻斷率而定)。,二、藍(lán)耳,ELISA原理 ——間接ELISA,結(jié)果判斷,結(jié)果判定：藍(lán)耳抗體（S/P≥0.4，判為陽性結(jié)果； S/P<0.4，判為

5、陰性結(jié)果）免疫豬群 0.4＜S/P≤2.5；對(duì)于過高抗體種豬，隔離飼養(yǎng)，2周后采血檢測(cè)，若抗體處于上升趨勢(shì)的種豬則淘汰非免疫豬群 S/P值≥0.4 淘汰或隔離飼養(yǎng),應(yīng)用,公豬 季度性監(jiān)測(cè)全部公豬 ，一年4次要求： S/P≥2.5公豬暫停使用(1-2個(gè)月)或PCR確認(rèn)感染狀態(tài) 母豬 季度性監(jiān)測(cè)母豬 要求：S/P應(yīng)主要在2.5 ≥ S/P ≥0.4(90%母豬抗體在免疫后轉(zhuǎn)陽) 后備母豬和后備公豬 在引進(jìn)種群前1個(gè)月，全群

6、監(jiān)測(cè) 要求：S/P≥2.5和S/P≤0.4暫停引入繁殖群,應(yīng)用,動(dòng)態(tài)檢測(cè)4周齡、10周齡豬群，每次20-30樣本 主要是：分析藍(lán)耳感染狀態(tài)，判斷豬群是否穩(wěn)定，(對(duì)于不穩(wěn)定群體,延遲轉(zhuǎn)群或免疫等)，如果S/P≥2.5的比例超過5%，則判斷該場(chǎng)藍(lán)耳不穩(wěn)定，有感染；沒有則穩(wěn)定。,三、偽狂犬,偽狂犬gE：結(jié)果成立條件：陰性對(duì)照平均值-陽性對(duì)照平均值必須大于或等于0.3；否則試驗(yàn)無效。判定結(jié)果：如果S/N值低于或等于0.60，樣品應(yīng)判

7、定為陽性；如果S/N值大于0.70，樣品應(yīng)判為陰性；處于0.6~0.7的樣品判定為可疑，間隔兩周時(shí)間可重新檢測(cè)。,,,偽狂犬病毒,,gE片段,,gB片段,,疫苗病毒片段,豬群PRV感染狀況的普查,采樣要求公豬群：全部采樣生產(chǎn)母豬群：隨機(jī)采樣30個(gè)樣本15周齡后的生長(zhǎng)豬（母源抗體消失）：隨機(jī)采樣20-30個(gè)樣本檢測(cè)方法IDEXX PRV gI ELISA S/N≤0.6 陽性，S/N＞0.7陰性0.6<S/N≤0.7 隔

8、離2周后重復(fù)檢測(cè)普查結(jié)果分析：低感染群：種豬陽性率10%以下，可做凈化 高感染群：種豬陽性率10%以上，低于30%，可做凈化；高于30%，通過疫苗控制，來穩(wěn)定豬群,偽狂犬疫苗的免疫評(píng)估—針對(duì)陰性場(chǎng),商品豬群免疫疫苗后4-6周，隨機(jī)采樣20-30份要求：gE抗體檢測(cè)全部為陰性；gB抗體檢測(cè)陽性率≥95%,,偽狂犬的評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：偽狂犬gE抗體全陰性，則為陰性場(chǎng)偽狂犬gE抗體陽性，但檢測(cè)15周齡豬，gE抗體轉(zhuǎn)陰，則為陽

9、性穩(wěn)定場(chǎng)偽狂犬gE抗體陽性，但檢測(cè)15周齡豬，gE抗體陽性率達(dá)到20%以上，則為陽性不穩(wěn)定穩(wěn)定場(chǎng),應(yīng)用—凈化,母豬群,公豬群(全部)過去6-12個(gè)月沒有使用全病毒滅活苗或非gE基因缺失弱毒疫苗　 若S/N≤0.6 則淘汰（對(duì)于懷孕母豬:可以先隔離,產(chǎn)后2周淘汰）;若0.6<S/N≤0.7 淘汰或隔離2周后重復(fù)檢測(cè),陽性者淘汰;間隔6,12個(gè)月重復(fù)檢測(cè)全群,若前后兩次檢測(cè)全部為陰性，則后續(xù)檢測(cè)不需要全群采樣,可以按季