螺旋體真菌章

1、第21章 螺旋體Spirochetes,中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)系,△有細胞壁 二分裂繁殖 無定性的核 對抗生素敏感 △體態(tài)柔軟 有軸絲—使其能自由活動 運動活潑 易被膽汁或膽鹽溶解△革蘭陰性，但不易著色?！髟思毎臀⑸?螺旋體特點,,似細菌之處,,似原蟲之處,名稱 螺旋數(shù) 螺旋特 舉例,,,,,致病螺旋體的螺旋特點,密螺旋體屬 8~14 規(guī)則，

2、細密； 兩端尖直,疏螺旋體屬 3~10 不規(guī)則,蒼白密螺旋體蒼白亞種,鉤端螺旋體屬 數(shù)十個 規(guī)則，更細密； 一端/兩端呈鉤狀,問號狀鉤端螺旋體,回歸熱疏螺旋體 伯氏疏螺旋體,對人體致病的螺旋體屬,鉤端螺旋體屬（Leptospira）,-問號狀鉤端螺旋體（L. interrogans）-雙曲鉤端螺旋體（L.bifl

3、exa） 分兩個種。,第一節(jié) 鉤端螺旋體,1.形態(tài)特點,0.1～0.2 ×6～20um; 螺旋細密, 一端或二端常呈鉤狀。革蘭陰性，但不易著色。Fontana鍍銀染色呈棕褐色,問號鉤端螺旋體一、生物學(xué)特性,2.培養(yǎng)特性,△ 專性需氧或微需氧△ 培養(yǎng)基：Korthof（柯索夫） 液體培養(yǎng)基△ 最適生長溫度：28~30℃△ 液體培養(yǎng)基中呈云霧狀△ 最適 pH ： 7.2~7.4△ 生長緩慢：1～2 weeks

4、,問號鉤端螺旋體,△ 屬特異性抗原：外膜蛋白、脂蛋白 △ 群特異性抗原：類脂多糖復(fù)合物(25個血清群)△ 型特異性抗原：菌體表面的多糖與蛋白復(fù)合物 （273血清型）,3.抗原結(jié)構(gòu),問號鉤端螺旋體,抵抗力不強，不耐熱、對化學(xué)消毒劑及青霉素敏感，但在中性濕土或水中可存在數(shù)月。,4.抵抗力,問號鉤端螺旋體,二、致病性1. 流行環(huán)節(jié)

5、,傳染源 ： △ 野生動物：嚙齒類特別是鼠類。 △ 家畜: 如豬，狗，牛等。傳播方式： △ 接觸傳播: △ 消化道 △ 其它: 胎盤,為自然疫源性疾病,問號鉤端螺旋體,2.致病物質(zhì) 主要為內(nèi)毒素,△ 內(nèi)毒素樣物質(zhì)△ 溶血素△ 粘附素△ 膠原酶,,問號鉤端螺旋體,3.所致疾病 鉤端螺旋體病 人畜共患傳染病，多宿主（鼠和豬為主），傳播途徑有： ?人與污染水或土壤接觸

6、 ?黏膜或皮膚侵入 ?消化道黏膜（污染食物/飲水） ?胎盤垂直傳播 ?吸血昆蟲,流行特點 季節(jié)性（夏秋）：洪水型—豬，稻田型—鼠 地區(qū)性：三多－鼠、豬、水 職業(yè)性：農(nóng)民、礦工、飼養(yǎng)員致病性 先形成鉤體血癥，損傷全身毛細血管內(nèi)皮細胞及肝、腎、肺心及中樞神經(jīng)，出現(xiàn)休克、DIC、黃疸、出血、心腎功能不全、腦膜炎等。,,,孕婦感染流產(chǎn),寒熱“三痛”爬不起，拒絕檢查腓腸肌，眼紅出血淋巴腫，流行多在夏秋季。

7、若不及時來相救, 口鼻涌血死神拿。,鉤體病臨床癥狀,寒熱:惡寒發(fā)熱三痛：頭痛、 全身痛、 腓腸肌痛,4.免疫性,體液免疫為主，對同型別有牢固的免疫力。特異性抗體明顯促進吞噬細胞的吞噬作用,問號鉤端螺旋體,三、微生物學(xué)檢查法1.標本采集 發(fā)病10天內(nèi)取血液；2周后取尿液；腦膜刺激者取腦脊液。2.直接鏡檢 暗視野鏡檢或鍍銀染色鏡檢3.分離鑒定 接種至Korthof培養(yǎng)基，置2

8、8℃孵育陽性標本在2周內(nèi)可見培養(yǎng)液呈輕度混濁；暗視野顯微鏡檢查有動力，則用已知診斷血清鑒定其血清群和血清型。,4.動物接種 敏感方法，尤適用于有雜菌污染的標本。接種于幼齡豚鼠或金地鼠腹腔，3～5天后用暗視野顯微鏡檢查腹腔液；或3～6天取心血檢查并作分離培養(yǎng)。5.血清學(xué)診斷 病初和發(fā)病后第3～4周各采血清一次。有腦膜刺激癥狀者采取腦脊液。 顯微鏡凝集試驗（microscopic agglutination te

9、st, MAT）。,四、防治原則,防： 防鼠滅鼠 家畜管理 疫苗接種治： 首選青霉素，注意防止赫氏反應(yīng),問號鉤端螺旋體,第二節(jié) 密螺旋體屬,密螺旋體分類 －蒼白密螺旋體（T. pallidum） ?蒼白亞種(subsp. pallidum)：亦稱梅 毒螺旋體，引起人類梅毒。 ?地方亞種（subsp. endemicum）：引 起

10、非性傳播梅毒（污染餐具傳播） ?極細亞種（subs. perternue）：雅司 ?。ㄆつw損傷受染） －品他密螺旋體（T. carateum） ?引起人類品他病本屬主要介紹梅毒螺旋體。,,(一)生物學(xué)性狀,小而規(guī)則的螺旋，兩端尖直,1.形態(tài),,梅毒螺旋體,2.培養(yǎng)特性 目前人工培養(yǎng)方法尚未真正成功。 接種兔睪丸或眼前房，兔睪丸活體培養(yǎng)，但生長緩慢，多用來保存菌種；家兔上皮

11、細胞中能有限生長，繁殖慢，約30 h分裂一次。3.抵抗力 抵抗力極弱，對冷、熱及干燥特別敏感；離體1-2小時死亡；血液中的螺旋體4℃放置3天后才死亡，故冷藏3天以上的血液無傳染梅毒的危險。,1. 流行病學(xué)特點,（二）致病性與免疫性,△ 人類是唯一的自然宿主△ 傳播方式： ※ 性接觸傳播 ※ 母嬰傳播 ※ 輸血傳播,梅毒螺旋體,△ 莢膜樣物質(zhì) 為酸性粘多糖，具有抗吞噬作用 △粘附因子

12、 為外膜蛋白△ 透明質(zhì)酸酶 分解透明質(zhì)酸有利于擴散并造成組織損傷。,2. 致病物質(zhì) 主要為侵襲力,梅毒螺旋體,3. 所致疾病,△ 先天梅毒△ 后天梅毒：表現(xiàn)為反復(fù)、隱伏、再發(fā)特點 ※ 性病梅毒 ※ 輸血梅毒,梅毒螺旋體,先天梅毒 亦稱胎傳梅毒，易致流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎；也可致先天畸形，出生后被稱為梅毒兒，常呈鋸齒形牙、間質(zhì)性角膜炎、神經(jīng)性耳聾等癥狀。,Periostitis,后天梅毒 分三期

13、 I期梅毒： 多見外生殖器，出現(xiàn)無痛性、直徑約1 cm的硬性下疳，含有大量梅毒螺旋體，此時傳染性極強。4～8周后，下疳自然愈合。經(jīng)2～3個月無癥狀潛伏期后進入第二期。,II期梅毒：傳染性極強，破壞性小。全身皮膚黏膜出現(xiàn)梅毒疹，周身淋巴結(jié)腫大，不經(jīng)治療一般在1～3個月后癥狀自然消退而痊愈，經(jīng)2～4年, 又可被激活進入第三期。,△ 感染2年（亦可達10～15年） △ 傳染性小，破壞性大△ 皮膚粘膜潰瘍性壞死△ 侵犯內(nèi)臟器

14、官和組織△ 侵犯神經(jīng)系統(tǒng)△ 出現(xiàn)慢性肉芽腫、梅毒瘤,III期（晚期）梅毒,4.免疫性 △ 以細胞免疫為主 △ 傳染性免疫 一般認為當(dāng)體內(nèi)持續(xù)有螺旋體存 在時，對再感染有免疫力，一旦螺旋 體被殺滅，其免疫力亦隨之消失。 △ 產(chǎn)生兩類抗體 ?特異性抗體 ? 非特異性抗體： 反應(yīng)素抗體，能與 生物組織中的類脂抗原（如牛心?。?

15、 發(fā)生非特異性結(jié)合反應(yīng)，可利用其進 行血清學(xué)診斷。,1.標本采集 Ⅰ期梅毒：硬下疳滲出液 Ⅱ期梅毒：梅毒疹滲出液或局部淋巴結(jié) 抽出液2.顯微鏡檢查 暗視野顯微鏡觀察螺旋體的動力和形態(tài) Fontana鍍銀染色法,（三）微生物學(xué)檢查法,T. pallidum in a dark-field microscopy,梅毒螺旋體,鍍銀染色,3.血清學(xué)診斷 △ 非密螺旋

16、體抗原試驗：測非特異性抗體 抗原（正常牛心脂質(zhì)）→測血清中的反應(yīng)素（抗脂質(zhì)抗體） VDRL（veneral disease research laboratory）試驗和RPR（rapid plasma reagin, 改良的VDRL）試驗：適合梅毒患者的初篩。 前者在玻片上進行，后者在專用紙卡反應(yīng)圈（內(nèi)徑18 mm）內(nèi)進行。I期梅毒陽性率約70％，II期梅毒可達100％，III期梅毒陽性率低。,△ 密螺旋體抗原試驗

17、 采用Nichols株梅毒螺旋體或重組蛋 白作為抗原，測定病人血清中特異性抗體。 熒光密螺旋體抗體吸收試驗（fluorescent treponemal antibody-absorption, FTA-ABS） 梅毒螺旋體血凝試驗（treponema pallidum hemagglutination assay, TPHA）,（四）防治原則預(yù)防1）加強宣傳教育；2）一旦患

18、病，應(yīng)去正規(guī)醫(yī)院及時就醫(yī)；3）發(fā)現(xiàn)梅毒病人必須強迫進行隔離治療；4）追蹤病人的性伴侶；5）對可疑患梅毒的孕婦，給予預(yù)防性治療；6）嚴格篩選血源。7）目前尚無疫苗可供使用。,梅毒螺旋體,治療1）診斷正確，治療及時，劑量足夠，療程正規(guī)；2）首選藥物是青霉素。,梅毒螺旋體,思考題1. 螺旋體與細菌和原蟲的相同點2.梅毒螺旋體傳播方式、致病物質(zhì)、防治原則,第35章 真菌學(xué)總論,真 菌,是一類具有細胞壁和典型細胞核，不含

19、葉綠素，無根、莖、葉分化的真核細胞型微生物。,,,組成：核膜和核仁(細胞核) 完整的細胞器(胞漿) 單細胞(少數(shù))或多細胞(多數(shù)),分布廣泛、種類繁多、數(shù)量大生存方式：腐生或寄生繁殖方式：有性或無性多數(shù)有益：如釀造業(yè)、抗生素生產(chǎn)等少數(shù)有害：人類及動、植物疾病 醫(yī)學(xué)(病原)真菌400種 常見的有50～100種,※ 有核膜和核仁、完善的細胞器的真核細胞型微 生物；※ 細胞壁不含肽聚糖，而含

20、幾丁質(zhì)； ※ 細胞膜含固醇；※ 多數(shù)對人無害，有的甚至有益，少數(shù)可引起人 和動物致?。ú≡葱哉婢弧?以孢子進行繁殖；※ 少數(shù)為單細胞真菌，大部分為多細胞真菌。,真菌的特點,,,,,真菌細胞與細菌細胞的比較,一、真菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)1. 單細胞—圓形、卵圓形2. 多細胞—孢子、菌絲(菌絲體),,形態(tài)：圓形、卵圓形菌落：● 酵母型真菌：無菌絲，由母細胞以芽生方式繁 殖，其菌落與細菌的菌落相似?！?類酵母

21、型真菌：芽生方式繁殖，其延長的芽體 可伸進培養(yǎng)基內(nèi)，稱假菌絲。,單細胞真菌,酵母型真菌,新生隱球菌(無菌絲),單細胞真菌,白假絲酵母菌（假菌絲）,類酵母型真菌,單細胞真菌,多細胞真菌,基本結(jié)構(gòu)：由菌絲和孢子組成菌絲(hypha)：孢子生出嫩芽，稱為芽管。芽管 逐漸延長呈絲狀，稱為菌絲。孢子(spore)：真菌的生殖結(jié)構(gòu)，是由生殖菌絲 產(chǎn)生的。,多細胞真菌,營養(yǎng)菌絲(vege

22、tative hypha) 按功能分 氣生菌絲(aerial hypha) 生殖菌絲(reproductive hypha) 菌絲 無隔菌絲(nonseptate hypha) 按結(jié)構(gòu)分

23、 有隔菌絲(septate hypha) 按形態(tài)分 —— 球拍狀,結(jié)節(jié)狀,梳狀,螺旋狀等,,,,菌 絲（hypha）,氣中菌絲及生殖菌絲,營養(yǎng)菌絲(vegetative hypha) 按功能分 氣生菌絲(aerial hypha) 生殖菌絲(reproductive hypha)

24、 菌絲 無隔菌絲(nonseptate hypha) 按結(jié)構(gòu)分 有隔菌絲(septate hypha) 按形態(tài)分 —— 球拍狀,結(jié)節(jié)狀,梳狀,螺旋狀等,,,,菌 絲（hypha）,有隔菌絲和無隔菌絲,營養(yǎng)菌絲(vegetative

25、 hypha) 按功能分 氣生菌絲(aerial hypha) 生殖菌絲(reproductive hypha) 菌絲 無隔菌絲(nonseptate hypha) 按結(jié)構(gòu)分

26、 有隔菌絲(septate hypha) 按形態(tài)分 —— 球拍狀,結(jié)節(jié)狀,梳狀,螺旋狀等,,,,菌 絲（hypha）,許蘭毛癬菌蒙古變種鹿角樣菌絲SEM1000,分生孢子 大、小分生孢子,,,葉狀孢子1.芽生孢子,葉狀孢子 2. 厚膜孢子,,胞漿濃縮，胞壁增厚,葉狀孢子 3.關(guān)節(jié)孢子,菌絲胞壁增厚，形成鏈狀排列的長方形節(jié)段。,孢子囊孢子,

27、菌絲末端膨大成囊狀，內(nèi)含許多孢子。,,,真菌孢子與細菌芽孢的區(qū)別,1. 繁殖方式：芽生裂殖隔殖萌管,二、繁殖與培養(yǎng),,2. 培養(yǎng)特點,嗜糖：耐酸：最適pH4～6喜低溫：最適22～28℃喜潮濕生長慢,標準培養(yǎng)基： (Sabouraud’s medium)：蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉和瓊脂。菌落類型：三種,1.酵母型菌落 ：菌落柔軟、光滑、濕潤。鏡下可見單細胞性的芽生孢子，無菌絲。如隱球菌菌落。,Yeast type

28、 colony,2.類酵母型菌落（酵母樣菌落） ：和酵母型菌落相似， 鏡下可見假菌絲。如白假絲酵母菌菌落。單細胞真菌,Yeastlike type colony,3.絲狀型菌落 ：由多細胞菌絲體組成的絮狀菌落（一部分向空中生長，并形成孢子）。絲狀真菌或霉菌菌落。 (菌落較大),Filamentous type colony,三、變異性和抵抗力,真菌易變異,多次傳代或孵育過久，容易發(fā)生形態(tài)、結(jié)構(gòu)、菌落性狀、色素及生理性狀如毒力等的變異。,

29、1.變異性,某些真菌在宿主體內(nèi)(或37℃培養(yǎng))和人工培養(yǎng)基上(25℃培養(yǎng))形成酵母型和絲狀型兩種不同類型的菌落,稱雙相型真菌,雙相型真菌（Dimorphic fungi）,●對干燥、日光、紫外線及一般消毒劑抵抗力強●對熱敏感，60℃1小時菌絲、孢子均被殺死●對2%石碳酸、0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏　感●對細菌抗生素不敏感●對二性霉素B、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟 康唑和伊曲康唑敏感,2.抵抗力,真菌病逐年

30、增多的原因1．抗生素特別是廣譜抗生素的濫用而 致菌群失調(diào).2．免疫抑制劑及抗腫瘤藥物的使用及 吸毒使機體免疫功能低下.3．HIV的流行.4．慢性消耗性疾病如糖尿病等。,第二節(jié) 真菌的致病性與免疫性,△ 直接感染致病(Infection)△ 激發(fā)機體產(chǎn)生超敏反應(yīng)致病(Hypersensitivity)△ 真菌毒素中毒癥(Mycotoxicosis),真菌的致病作用,(一).真菌性感染：△ 致病性真菌感染（淺部，深

31、部）：多為外源性,包括: 淺表—糠秕馬拉色氏霉菌 (Malassezia furfur) 皮膚—皮膚癬菌(Dermatophytes) 皮下—申克孢子絲菌 (Sporothrix schenckii) 全身 —莢膜組織胞漿菌(H. capsulatum) 厭酷球孢子菌 (C. immites),一、致病性,△ 條件致病性真菌感染：多為內(nèi)源性,the most freq

32、uent in china：▲ 白假絲酵母菌(S. albican) ▲ 新生隱球菌(C. neoformans) ▲ 卡氏肺孢菌(Pneumocystis carinii) ▲ 曲霉(Aspergillus) ▲ 毛霉(Mucor),,,※ 機體的易感性：,1.生理條件 — 年齡、組織結(jié)構(gòu)： ▲ 新生兒—鵝口瘡 ▲ 兒 童—頭癬 ▲ 成 人—腳癬、甲癬

33、,2.病理條件——免疫功能降低：▲ 先天性免疫功能低下 ▲ 慢性消耗性疾病 ▲ 手術(shù)、放療、化療 ▲ 用免疫抑制劑等,（二）真菌性超敏反應(yīng)： 按性質(zhì)分： ①接觸或吸入或食入真菌孢子或菌絲引起 可為Ⅰ-Ⅳ型超敏反應(yīng) ②感染性超敏反應(yīng)：一般為Ⅳ型超敏反應(yīng),按部位分: ①皮膚超敏反應(yīng):皮炎、濕疹、蕁麻疹、瘙 癢癥等 ②呼吸道超敏反應(yīng): 支氣管哮喘以及過敏性

34、 鼻炎 ③消化道超敏反應(yīng),（三）真菌毒素中毒：中毒特點： ① 有地區(qū)性和季節(jié)性 ② 與進食有關(guān) ③ 無傳染性及免疫性 ④ 抗生素治療無效,,,,,二、免疫性,※ 非特異性免疫※ 特異性免疫 ◆ 細胞免疫為主 ◆ 體液免疫,第三節(jié) 真菌的微生物學(xué)檢查法,1.標本采集 充足、新鮮、無菌操作2.形態(tài)學(xué)檢查：直接鏡檢及