獸醫(yī)免疫學(xué)

1、獸醫(yī)免疫學(xué),獸醫(yī)免 疫 學(xué),緒論第一篇 免疫學(xué)基礎(chǔ)理論,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述第五章 凝聚性反應(yīng)第六章 標(biāo)記技術(shù)第七章 單克隆抗體技術(shù),,第三篇 臨床免疫,第一章 免疫系統(tǒng) 第二章 抗原和抗體 第三章 免疫應(yīng)答,第二篇 免疫學(xué)技術(shù)及其應(yīng)用,第八章 變態(tài)反應(yīng) 第九章 抗感染免疫 第十章 免疫性疾病,緒論主要內(nèi)容：基本概念，簡史和進展,,重點：了解免疫學(xué)的歷史、現(xiàn)狀和研究及應(yīng)用新動態(tài)，免疫的新概念，在生命科學(xué)中的地位作

2、用。,一、免疫的概念 什么是免疫，免疫學(xué)研究解決什么問題。,免疫的傳統(tǒng)概念：防御疫?。▊魅静。?免疫的現(xiàn)代概念：,免疫:是機體識別和清除非自身的大分子物質(zhì),從而保持機體內(nèi)外環(huán)境平衡的生理反應(yīng)。,免疫學(xué):是一門新興的學(xué)科，它是研究機體免疫系統(tǒng)的組織結(jié)構(gòu)和生理功能的科學(xué)。,緒論一、免疫的概念,二、免疫的基本特點,,2 特異性和多樣性：氨基酸、核酸序列,3 記憶：免疫接種的理論基礎(chǔ),4 自我調(diào)控：基本生理特點,1.識別自身和非自身

3、: 抵御.監(jiān)視：腫瘤（自身變化）、病原（外源）,三、免疫的基本功能,,緒論一、免疫的概念二、免疫的基本特點,2.免疫耐受: 自身穩(wěn)定,3.免疫監(jiān)視: 抗腫瘤,1.免疫防御: 抗感染,三、免疫的基本功能,,四、免疫學(xué)的發(fā)展簡史 1. 免疫學(xué)經(jīng)驗時期(17世紀(jì)前),緒論一、免疫的概念二、免疫的基本特點,2. 經(jīng)典免疫學(xué)時期(18-20世紀(jì)),3.近代免疫學(xué)時期(至上世紀(jì)50年代),4.現(xiàn)代免疫學(xué)時期(上世紀(jì)60年代以來),超敏

4、反應(yīng)，免疫耐受，抗體生成克隆學(xué)說，免疫學(xué)技術(shù)( 血凝等）,免疫應(yīng)答細胞分類，免疫調(diào)控，分子水平， 免疫學(xué)技術(shù),三、免疫的基本功能,四、免疫學(xué)的發(fā)展簡史,緒論一、免疫的概念二、免疫的基本特點,五、現(xiàn)代免疫學(xué)的進展和熱點 1. 理論: 分子和細胞,2. 應(yīng)用: 免疫學(xué)方法,免疫遺傳學(xué)和免疫調(diào)控機理(MHC) ， 腫瘤免疫學(xué)(腫瘤發(fā)生、發(fā)展)，免疫病理學(xué)(自身免疫?。鹤儜B(tài)反應(yīng)(過敏反應(yīng))，免疫缺陷),實驗免疫學(xué)(單克隆抗體，基因疫苗

5、，標(biāo)記技術(shù)，腫瘤治療),三、免疫的基本功能,,四、免疫學(xué)的發(fā)展簡史,緒論一、免疫的概念二、免疫的基本特點,五、現(xiàn)代免疫學(xué)的進展和熱點,六、免疫學(xué)的應(yīng)用,診斷：血清學(xué),預(yù)防：疫苗,治療：抗血清,超微量測量,第一章   免疫系統(tǒng),第一節(jié)   免疫器官 中樞免疫器官：骨髓、胸腺、法氏囊 外周免疫器官：脾臟、淋巴結(jié) 要點：來源、結(jié)構(gòu)和功能,第二節(jié) 

6、    免疫細胞 淋巴細胞：B細胞、T細胞 其他細胞：單核吞噬細胞、粒細胞 要點：種類、形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能,第三節(jié)     免疫因子 抗體、補體、細胞因子 要點：組成、結(jié)構(gòu)和功能,第一章   免疫系統(tǒng),第一節(jié)   免疫器官 中樞免疫器官：

7、 骨髓 胸腺 法氏囊,外周免疫器官： 脾臟 淋巴結(jié) 其他,第一章   免疫系統(tǒng),第二節(jié)     免疫細胞 淋巴細胞：B細胞、T細胞、NK細胞 其他細胞：單核吞噬細胞、粒細胞 要點：種類、發(fā)

8、生發(fā)育、形態(tài)和功能,第一節(jié)   免疫器官,B細胞在免疫應(yīng)答中活化增殖和分化,第一章   免疫系統(tǒng),第二節(jié)     免疫細胞 一、淋巴細胞：B細胞、T細胞、NK細胞,第一節(jié)   免疫器官,1.種類與形態(tài): 小淋巴細胞(T.B細胞 5 -7，NK細胞，亞群) 免疫母細胞 （2 -20 – 30）

9、 漿母細胞 (7 - 15)━━漿細胞 (8 -20)2.發(fā)生和分布: 骨髓多能干細胞--胸腺(成熟)--胸腺依賴區(qū)(淋巴結(jié)等)--活化(抗原) 骨髓多能干細胞--法氏囊(淋巴干細胞-前B細胞-B細胞)-淋巴結(jié)等,第一章   免疫系統(tǒng),第二節(jié)     免疫細胞 一、淋巴細胞：B細胞、T細胞、NK細胞,第一節(jié)   免疫器官,淋巴細胞的主要特

10、性 特性 T B NK 主要功能 Ab識別、 Ab識別細胞毒 細胞免疫 體液免疫 免疫調(diào)節(jié) 免疫調(diào)節(jié)免疫受體 TCR 表面Ig CD16其他表面標(biāo)

11、志 CD3，4，8 CD19-21 CD56分布%： 血液 70-75 10-15≤10 淋巴節(jié) 70-75 20-25 少 脾 40-50 40-50≤10,第一章   免疫系統(tǒng),第二節(jié) 

12、;    免疫細胞 一、淋巴細胞：B細胞、T細胞、NK細胞 二、單核吞噬細胞,第一節(jié)   免疫器官,1.形態(tài)與種類 單核細胞(血液. 15-25) 巨噬細胞(組織.80) 其他: 枯否氏(肝),小神經(jīng)膠質(zhì)細胞(腦),星形膠質(zhì)細胞(腦) 濾泡細胞(甲狀腺),內(nèi)皮細胞(血.淋巴組織), 成纖維細胞(結(jié)締組織)2.功

13、能 ①吞噬.②細胞毒(Fc).③調(diào)節(jié)(抗原處理濃縮等,APC,antigen presenting cell).④白細胞介素,第一章   免疫系統(tǒng),第二節(jié)     免疫細胞 一、淋巴細胞：B細胞、T細胞、NK細胞 二、單核吞噬細胞,第一節(jié)   免疫器官,嗜中性，嗜酸性，嗜堿性，肥大細胞等,三、粒細胞其他細胞,免疫細胞的發(fā)生發(fā)

14、育示意圖,第一章   免疫系統(tǒng),第二節(jié)     免疫細胞 一、淋巴細胞：B細胞、T細胞、NK細胞 二、單核吞噬細胞 三、粒細胞其他細胞,第一節(jié)   免疫器官,四、細胞表面標(biāo)志：CD分子,第三節(jié)     免疫因子 一、補體,2. 生物學(xué)活性2.1 含量相對穩(wěn)定:10-15%，動

15、物種間有差異2.2 不穩(wěn)定:不耐熱,對各種理化因素敏感2.3 能被抗原抗體復(fù)合物激活（IgM、IgG和部分物質(zhì)）2.4 代謝率高,半衰期短（58H）2.5 組成：comlement：C1-C9(共11種成分),1.概念 存在于人和動物正常新鮮血液中具有酶樣活性的一組不耐熱的球蛋白。,第三節(jié)     免疫因子 一、補體1. 概念,2. 生物學(xué)活性,3. 激活途徑：

16、經(jīng)典途徑: C1q,C1r,C1s(識別單位),C4,C2,C3(激活單位),(攻膜單位) 旁路途徑(替代途徑):C3,(攻膜單位)C6,C7,C8,C9,,補體激活途經(jīng)示意圖,經(jīng)典途經(jīng)示意圖,旁路途經(jīng)示意圖,,,第三節(jié)     免疫因子 一、補體,1.概念 機體的免疫細胞和非免疫細胞能合成和分泌小分子的多肽類因子, 它們具有調(diào)節(jié)多種細胞生理功能, 這些因子統(tǒng)稱

17、為細胞因子(cytokines)。,二、細胞因子,第三節(jié)     免疫因子 一、補體,1.概念,二、細胞因子,2.種類 淋巴因子(淋巴細胞), 單核因子(單核細胞)等,白細胞介素(interleukin,IL)干擾素(interforen,IFN)集落刺激因子(colony stimulating factor,CSF)腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor

18、,TNF)轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth facteor,TGF-β),第三節(jié)     免疫因子 一、補體,1.概念,二、細胞因子,2.種類,3.功能 調(diào)節(jié)免疫細胞（白細胞介素、干擾素）,免疫效應(yīng)分子（腫瘤壞死因子、干擾素）,刺激造血細胞（集落刺激因子）,促進炎癥反應(yīng)（白細胞介素）,細胞因子種類及其對T、B細胞的作用,第一章  

19、; 免疫系統(tǒng),思考題與作業(yè):1.免疫系統(tǒng)分哪幾個層次，各有哪些組分？2.免疫系統(tǒng)的不同層次和各個組分之間有何區(qū)別與聯(lián)系？3.參與特異性免疫與非特異性免疫的不同組分有何特點？ 舉例說明。4.設(shè)計一個圖或表，把所有參與免疫反應(yīng)的組分都歸納進去。 要求：既要把所有組分均表現(xiàn)在圖或表內(nèi)，又要能表現(xiàn)出 它們之間的內(nèi)在關(guān)系。,第二章  抗原和抗體,第一節(jié)  

20、0; 抗原 抗原的概念、性質(zhì)和分類來源,第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白 抗體與免疫球蛋白的概念及其區(qū)別 免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)、分類及作用 抗體的功能及應(yīng)用,第三節(jié) 抗原與抗體的關(guān)系 抗原誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體 抗原抗體特異性結(jié)合,第二章  抗原和抗體,第一節(jié)    抗原 一、概念 凡是能刺激機體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細胞并能與之結(jié)

21、合引起特異性免疫的物質(zhì),,抗原的屬性：免疫原性和反應(yīng)原性,抗原和半抗原,變應(yīng)原性和耐受原性,第二章  抗原和抗體,第一節(jié)    抗原 一、概念,,二、抗原的性質(zhì),1.異源性,2.分子量(>10,000.<5,000較弱,<1,000為半抗原),3.化學(xué)性質(zhì): 組成.蛋白質(zhì) 多糖; 分子結(jié)構(gòu). 環(huán)狀 立體( 三級) 結(jié)構(gòu),4.物理狀態(tài): 吸附于

22、顆粒物質(zhì)( 多糖類或氫氧化鋁),第二章  抗原和抗體,第一節(jié)    抗原 一、概念,,二、抗原的性質(zhì),三、抗原決定簇 （抗原表位）,抗原決定簇： 與抗體結(jié)合的部位（基團）,抗原價：單、多價及功能價,性質(zhì): 化學(xué)基團. 旋光性. 構(gòu)象. 順序,數(shù)量: 多價. 單價; 功能價. 非功能價,大小: 5-7個氨基酸，5-6個糖基，5-8個核苷酸,抗原與抗原決定簇,● 一個抗原分子含有數(shù)個抗原

23、決定簇,● 每個 抗原決定簇 至少誘導(dǎo)一種特異性抗體,● 蛋白質(zhì)抗原決定簇 由5-7個氨基酸組成,,,,,抗原,抗原決定簇,,,,,氨基酸殘基序列,,,,,第二章  抗原和抗體,第一節(jié)    抗原 一、概念,,二、抗原的性質(zhì),四、抗原的種類,三、抗原決定簇,天然抗原人工抗原半抗原,第二章  抗原和抗體,第一節(jié)    抗原,第二

24、節(jié) 抗體和免疫球蛋白,要點： 抗體與免疫球蛋白的概念及其區(qū)別。 免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)、分類、作用。,第二章  抗原和抗體,第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白 一、抗體與免疫球蛋白的概念,抗體的概念： 在抗原和免疫系統(tǒng)相互作用下由B細胞產(chǎn)生的 能與相應(yīng)抗原發(fā)生反應(yīng)的特異性Ig：,種類：異種、同種抗體；自身抗體，異嗜抗體； 完全、不完全抗體等,免疫球蛋白的概念：

25、 體液中具有免疫功能的一大類具有相似化學(xué)性質(zhì)的 球蛋白。,第二章  抗原和抗體,第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白 一、抗體與免疫球蛋白的概念,二、免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)和功能 Ig的基本結(jié)構(gòu),Ig結(jié)構(gòu)示意圖,,五種Ig結(jié)構(gòu)示意圖,第二章  抗原和抗體,第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白 一、抗體與免疫球蛋白的概念及其區(qū)別 二、

26、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)和功能,三、各類免疫球蛋白的理化特性和功能,IgG: γ 70-80%； 單體；160,000-180,000； 再次反應(yīng)IgM: μ 10-15%；五聚體；900,000； 初次反應(yīng)IgA: α 少 雙聚體；170,000-390,000； 分泌型IgE: ε 少 單體；170,000不耐熱(56C,1h); 過敏IgD

27、: δ 少 單體; 170,000 表面,第二章  抗原和抗體,第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白 一、抗體與免疫球蛋白的概念及其區(qū)別 二、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)和功能,三、各類免疫球蛋白的理化特性和功能,四、抗原抗體的結(jié)合：親和力與親合力,,抗原抗體結(jié)合力的組成,氫鍵,離子鍵,范德華力,疏水力,抗原分子,抗體分子,第二章 &#

28、160;抗原和抗體,第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白 一、抗體與免疫球蛋白的概念及其區(qū)別 二、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)和功能,三、各類免疫球蛋白的理化特性和功能,四、抗原抗體的結(jié)合：親和力與親合力,五、抗體的功能及應(yīng)用,1.醫(yī)學(xué)與獸醫(yī)學(xué)：免疫治療（被動免疫）； 病原診斷（鑒定微生物和抗原分型）； 血型鑒定2.生物學(xué)其他領(lǐng)域：生物活性物質(zhì)檢測； 抗原抗體在細胞和亞細胞的定位。,第二章&#

29、160; 抗原和抗體,第一節(jié)    抗原,第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白,第三節(jié) 抗原與抗體的關(guān)系 抗原誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體,傳統(tǒng)抗體(多克隆抗體),抗 原,免疫（刺激機體）,,,1,2,3,4,,,,脾 臟,淋巴結(jié),B 細胞,第二章  抗原和抗體,第一節(jié)    抗原,第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白,第三節(jié) 抗原與抗體的關(guān)系 一、抗原誘導(dǎo)機

30、體產(chǎn)生抗體,二、抗原抗體特異性結(jié)合,抗體由抗原誘導(dǎo)免疫細胞所產(chǎn)生，并與之結(jié)合,1,1,1,1,,,,,,抗體結(jié)合抗原,B細胞,漿細胞,抗體,抗原,第二章  抗原和抗體,第一節(jié)    抗原第二節(jié) 抗體和免疫球蛋白第三節(jié) 抗原與抗體的關(guān)系,思考題與作業(yè):1.什么是抗體？什么是免疫球蛋白？兩者的同異是什么？2.免疫球蛋白的分類與它們的免疫功能有何關(guān)系？3.免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)與它

31、們功能有何關(guān)系？舉例說明。4.作出圖或表概括免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)與理化特性。,第三章 免疫應(yīng)答,第二節(jié) 特異性免疫與非特異性免疫應(yīng)答,第三節(jié) 免疫調(diào)節(jié),第一節(jié) 免疫應(yīng)答的基本特點,要點：特異性免疫與非特異性免疫的 相互作用、調(diào)節(jié)等關(guān)系。,第三章 免疫應(yīng)答,第一節(jié) 免疫應(yīng)答的基本特點,二、組成,三、特點,組織器官: 皮膚粘膜；血腦屏障、血胎屏障等。 脾臟、淋巴結(jié)等。 細胞：吞噬

32、細胞、粒細胞；淋巴細胞 分子：補體、細胞因子；抗體。,非特異性免疫：先天(不感染）性； 識別自身和非自身；無再次反應(yīng)； 作用快范圍廣。 特異性免疫：獲得性；特異性；記憶性。,一、種類,非特異性免疫；特異性免疫,第三章 免疫應(yīng)答,第二節(jié) 特異性免疫與非特異性免疫,一、非特異性免疫應(yīng)答過程,第一節(jié) 免疫應(yīng)答的基本特點,1．炎癥反應(yīng),2. 吞噬：清除異物,3．補體激活,4．干擾素等

33、,非特異免疫應(yīng)答（一）： 巨噬細胞對抗原的吞飲、消化,非特異性免疫應(yīng)答(二) APC對兩類抗原的吞飲、消化、處理和呈遞,第三章 免疫應(yīng)答,第二節(jié) 特異性免疫與非特異性免疫,一、非特異性免疫應(yīng)答過程,第一節(jié) 免疫應(yīng)答的基本特點,二、特異性免疫應(yīng)答過程,1.一般過程：激活、反應(yīng)、效應(yīng),2. 反應(yīng)類型： 細胞免疫應(yīng)答； 抗體免疫應(yīng)答,特異性免疫應(yīng)答示意圖,,,激活,反應(yīng),效應(yīng),,第三

34、章 免疫應(yīng)答,第二節(jié) 特異性免疫與非特異性免疫,一、非特異性免疫應(yīng)答過程,第一節(jié) 免疫應(yīng)答的基本特點,二、特異性免疫應(yīng)答過程,1.一般過程：激活、反應(yīng)、效應(yīng),2.反應(yīng)類型：細胞免疫應(yīng)答；抗體免疫應(yīng)答,3.特異性免疫應(yīng)答的初次反應(yīng)和再次反應(yīng)及其特點,體液免疫應(yīng)答的特點：初次和再次反應(yīng),第三章 免疫應(yīng)答,第二節(jié) 特異性免疫與非特異性免疫,一、非特異性免疫應(yīng)答過程,第一節(jié) 免疫應(yīng)答的基本特點,二、非特異性免疫應(yīng)答過程,三、影響免疫應(yīng)答

35、的因素,1. 抗原,2. 機體,3. 免疫方法,第三章 免疫應(yīng)答,第三節(jié) 免疫調(diào)節(jié),一、 特異性與非特異性免疫應(yīng)答的關(guān)系,非特異免疫應(yīng)答： 幾種免疫反應(yīng)途經(jīng)示意圖,第三章 免疫應(yīng)答,第三節(jié) 免疫調(diào)節(jié),一、 特異性與非特異性免疫應(yīng)答的關(guān)系,非特異性免疫是特異性免疫的基礎(chǔ),非特異性免疫與特異性免疫互相作用,特異性免疫是非特異性免疫的補充,第三章 免疫應(yīng)答,第三節(jié) 免疫調(diào)節(jié),二、 免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)機制,一、 特異性

36、與非特異性免疫應(yīng)答的關(guān)系,1. 神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié),中樞神經(jīng)系統(tǒng),內(nèi)分泌系統(tǒng),免疫系統(tǒng),,,,,,,垂體激素,激素,免疫因子,激素,神經(jīng)肽,免疫因子IL-1,第三章 免疫應(yīng)答,第三節(jié) 免疫調(diào)節(jié),二、 免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)機制,一、 特異性與非特異性免疫應(yīng)答的關(guān)系,1. 神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié),5. 基因調(diào)節(jié): 對不同抗原的反應(yīng)性(MHC識別抗原)， 個體差異，品種間差異，種間差異， 免疫缺陷等,3.

37、細胞因子的調(diào)節(jié): IL，IFN，TF,MF,2. 免疫細胞之間的調(diào)節(jié): T細胞 Th Ts B，NK，CD, 紅細胞(CR1),4. 抗原抗體的調(diào)節(jié): 反饋,第三章 免疫應(yīng)答,思考題與作業(yè):1. 特異性免疫應(yīng)答與非特異性免疫應(yīng)答主要有何區(qū)別？2. 怎么理解特異性免疫應(yīng)答與非特異性免疫應(yīng)答 是相輔相成、不可分割的？舉例說明。3. 調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的主要成分是什么？主要途徑是什么？4. 設(shè)計一免疫應(yīng)答的圖解。 要求：能夠

38、顯示參與免疫應(yīng)答的所有調(diào)節(jié)因素及其 互相關(guān)系。,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述概念 免疫學(xué)技術(shù)與血清學(xué)技術(shù),免疫學(xué)技術(shù) 免疫細胞實驗技術(shù)(源于細胞免疫),抗體抗原實驗技術(shù)(源于體液免疫),第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型 1.凝聚性反應(yīng):沉淀 凝集,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型 1.凝聚性反應(yīng),沉淀: 可溶性抗原與抗體,凝集:

39、 顆粒性抗原與抗體,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型 1.凝聚性反應(yīng):沉淀 凝集,2.有補體參與的反應(yīng),補體結(jié)合試驗原理（結(jié)果陽性）,,,,,,,,待檢系統(tǒng) 抗原,指示系統(tǒng),補體,,,,消耗,+ 抗體,,不溶血,補體結(jié)合試驗原理（結(jié)果陰性）,,,,,待檢系統(tǒng),指示系統(tǒng),補體,,,,未消耗,+ 抗體,,溶血,無抗原,,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型 1.凝聚性反應(yīng):沉淀 凝集

40、 2.有補體參與的反應(yīng),3.標(biāo)記抗體技術(shù),1.種類：酶標(biāo)記，同位素標(biāo)記，熒光標(biāo)記，其他標(biāo)記,3.特點：放大作用,敏感性，微量化,2.原理：化學(xué)方法連接,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型 1.凝聚性反應(yīng):沉淀 凝集 2.有補體參與的反應(yīng) 3.標(biāo)記抗體技術(shù),4.中和反應(yīng),抗體與毒素或病原體的結(jié)合,方法：細胞、雞胚和動物實驗,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型,二、血清學(xué)反應(yīng)的一般特點

41、,1.特異性和交叉性(交叉:多價抗原抗體反應(yīng)）,2.親和力和親合力,親和力:抗體對簡單的單價半抗原或抗原決定簇的結(jié)合力、 結(jié)合簇的大小,吻合的嚴(yán)密性和分子間力的性質(zhì)和強度,結(jié)合力: 氫鍵. 靜電力.Van-der Waals-力 疏水鍵(50%),親合力:抗原抗體復(fù)合物的穩(wěn)定性 (取決于親合力和抗體抗原所飽和的價數(shù)),第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型,二、血清學(xué)反應(yīng)的一般特點,1.特異

42、性和交叉性(交叉:多價抗原抗體反應(yīng)）,2.親和力和親合力,3.抗原抗體反應(yīng)的二階段性和可逆性,結(jié)合階段:快、不可見,可見階段:凝集,沉淀等.較慢,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型,二、血清學(xué)反應(yīng)的一般特點,1.特異性和交叉性(交叉:多價抗原抗體反應(yīng)）,2.親和力和親合力,3.抗原抗體反應(yīng)的二階段性和可逆性,4.抗原抗體的結(jié)合比例: 帶現(xiàn)象,前帶: 抗體過多 在沉淀反應(yīng)中稀釋抗原；后帶: 抗原過多 在凝集反應(yīng)中稀釋抗體.

43、,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型,二、血清學(xué)反應(yīng)的一般特點,1.特異性和交叉性(交叉:多價抗原抗體反應(yīng)）,2.親和力和親合力,3.抗原抗體反應(yīng)的二階段性和可逆性,4.抗原抗體的結(jié)合比例: 帶現(xiàn)象,5.血清學(xué)反應(yīng)的影響因素,a. 電解質(zhì):,b. 溫度: 37 - 56C,c. pH: 6-8 低于3 解離,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型,二、血清學(xué)反應(yīng)的一般特點,三、應(yīng)用,1.抗原、抗體檢測2.生物活

44、性物質(zhì)檢測 3.抗原在細胞和亞細胞的定位4.微生物鑒定和分型5.血型鑒定,第四章 免疫學(xué)技術(shù)概述一、血清學(xué)反應(yīng)的類型,二、血清學(xué)反應(yīng)的一般特點,三、應(yīng)用,四、血清學(xué)試驗的發(fā)展趨勢 樣品微量化 方法標(biāo)準(zhǔn)化 試劑商品化 檢測手段自動化,思考題與作業(yè):1.常用免疫學(xué)實驗方法有哪些？如何歸類？2.血清學(xué)方法應(yīng)用于哪些方面？3.血清學(xué)方法的主要特點是什么？,第四章

45、 免疫學(xué)技術(shù)概述,第五章 凝聚性反應(yīng)第一節(jié) 沉淀反應(yīng)一、原理二、常用方法: 1.絮狀沉淀試驗和免疫濁度法（液相）,2.環(huán)狀沉淀試驗（液相）,液相沉淀反應(yīng),,,,,,絮狀沉淀反應(yīng),環(huán)狀沉淀反應(yīng),,,,,,,,,,+,+,—,—,抗血清,抗原,抗原,抗體,第五章 凝聚性反應(yīng)第一節(jié) 沉淀反應(yīng)一、原理二、常用方法: 1.環(huán)狀沉淀試驗（液相）,3.免疫擴散試驗（固相） 單向單擴散;雙向單擴散(輻射擴散

46、);雙向雙擴散,2.絮狀沉淀試驗和免疫濁度法（液相）,,,免疫擴散技術(shù),單向擴散試驗,雙向擴散試驗,固相沉淀反應(yīng),應(yīng)用（定量分析）：抗原或抗體效價測定,抗原性質(zhì)分析,應(yīng)用（定性分析）：多抗原成分分析,第五章 凝聚性反應(yīng)第一節(jié) 沉淀反應(yīng)一、原理二、常用方法: 1.絮狀沉淀試驗和免疫濁度法（液相） 2.環(huán)狀沉淀試驗（液相）,3.免疫擴散試驗（固相） 單向單擴散;雙向單擴散(輻射擴散);雙向雙擴散,4.免

47、疫電泳:,原理：,抗原的電荷;電場強度(10V/cm); 溶液的離子強度(0.02-0.2),5.對流免疫電泳,免疫電泳原理與結(jié)果,,,,,,,,,,,免疫擴散技術(shù),免疫電泳技術(shù),單向擴散試驗,雙向擴散試驗,火箭電泳,對流電泳,免疫電泳,—,—,—,+,+,+,固相沉淀反應(yīng),第五章 凝聚性反應(yīng)第一節(jié) 沉淀反應(yīng)一、原理二、常用方法: 1.絮狀沉淀試驗和免疫濁度法（液相） 2.環(huán)狀沉淀試驗（液

48、相）,3.免疫擴散試驗（固相） 單向單擴散;雙向單擴散(輻射擴散);雙向雙擴散,4.免疫電泳:,原理：,抗原的電荷;電場強度(10V/cm); 溶液的離子強度(0.02-0.2),5.對流免疫電泳,6.火箭免疫電泳,第五章 凝聚性反應(yīng)第二節(jié) 凝集反應(yīng) 一、原理 二、常用方法: 1.直接凝集試驗 (玻片法; 試管法. 細菌; 紅血球),2.間接凝集試驗,,,,,

49、,顆粒性抗原,凝集素(抗體),,直接凝集反應(yīng),正向間接凝集反應(yīng),,,,,,,,,,可溶性抗原,載體顆粒,抗體,顆粒性抗原,反向間接凝集反應(yīng),,,,,,,,,,,,,,抗體,可溶性抗原,載體顆粒,連接,抗體標(biāo)記的顆粒,間接凝集抑制反應(yīng),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,凝集,凝集抑制,待檢樣品,待檢樣品,凝集抗原,第五章 凝聚性反應(yīng)第二節(jié) 凝集反應(yīng) 一、原理 二、常用方法: 1.直接凝集試驗

50、(玻片法; 試管法. 細菌; 紅血球),2.間接凝集試驗 a.乳膠凝集試驗 (聚苯乙烯乳膠作載體,0.8微米) b.炭素凝集試驗 (抗血清致敏.豬囊蟲) c.間接血凝試驗 (血球選擇. 醛化. 致敏),3.凝集試驗的結(jié)果判斷:定性;定量,凝集反應(yīng)判斷,思考題與作業(yè): 設(shè)計一個血清學(xué)方法，用于診斷雞新城疫病毒抗原。,第六章 標(biāo)記技術(shù),標(biāo)記技術(shù)的基本特點： 間接、放大；敏感

51、，快速，微量,主要介紹酶標(biāo)技術(shù)的原理、常用的酶種類。免疫酶檢測技術(shù)所使用的常用方法和應(yīng)用范圍。重點是固相酶聯(lián)吸附法和酶標(biāo)斑點法。,,第六章 酶標(biāo)技術(shù),,一、原理,,二、常用標(biāo)記酶： 高效催化活性，穩(wěn)定，易于得到，有可見反應(yīng)HRP（辣根過氧化物酶）等,抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。,酶（生物催化劑，催化活性）,+ 抗體（免疫學(xué)活性）,一、原理

52、二、常用標(biāo)記酶,第六章 酶標(biāo)技術(shù),三、酶聯(lián)免疫吸附檢測（ELISA）實例 Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay,標(biāo)記技術(shù) 直接法,標(biāo)記技術(shù)夾心法,標(biāo)記技術(shù)競爭法,標(biāo)記技術(shù),一、原理二、常用標(biāo)記酶,第六章 酶標(biāo)技術(shù),四、免疫酶技術(shù)種類 免疫酶沉淀技術(shù)，免疫酶定位技術(shù)，免疫酶定量測定技術(shù),五、抗體酶標(biāo)記法 戊二醛法，過碘酸鈉法，SPA系統(tǒng)，親和素生物素系統(tǒng),六、

53、酶結(jié)合物的鑒定 抗體活性測定,七、酶結(jié)合物的保存,三、酶聯(lián)免疫吸附檢測（ELISA）實例,思考題與作業(yè):酶標(biāo)技術(shù)的原理和優(yōu)點是什么？,第六章 酶標(biāo)技術(shù),第七章  單克隆抗體技術(shù),一、單克隆抗體技術(shù)特點 常規(guī)抗體與單克隆抗體的比較,多克隆抗體與單克隆抗體的比較,多克隆抗體反應(yīng),單克隆抗體反應(yīng),抗原,抗原,產(chǎn)生針對多種抗原決定簇的隆抗體,產(chǎn)生針對單一抗原決定簇抗體,保存期短,永久保存,質(zhì)量難以控制,質(zhì)量穩(wěn)

54、定,第七章  單克隆抗體技術(shù),一、單克隆抗體技術(shù)特點 常規(guī)抗體與單克隆抗體的比較,常規(guī)抗體：多克?。ǘ鄾Q定簇） 保存時間短 質(zhì)量難控制,單克隆抗體：針對單一抗原決定簇 永久保存 質(zhì)量穩(wěn)定,,短命的漿細胞與骨髓瘤細胞融合,產(chǎn)生特異性抗體,,,,,脾臟,漿細胞,瘤細胞,雜交瘤細胞,免疫小鼠,第七章  單克隆

55、抗體技術(shù),一、單克隆抗體技術(shù)特點,二、單克隆抗體技術(shù)原理,,長期存活,,+,第七章  單克隆抗體技術(shù),二、單克隆抗體技術(shù)原理,一、單克隆抗體技術(shù)特點,三、制備方法,1．免疫小鼠（Balb/c，NZB品系)。高純度抗原。免疫4次后取脾臟， 分離淋巴細胞。,2．細胞融合：免疫鼠的脾細胞和鼠源B細胞株（Sp/O2），融合劑PEG,3．選擇培養(yǎng)： Sp/O2細胞株為營養(yǎng)缺陷型，便于篩選。,核苷酸合成途徑,核苷酸,次黃嘌呤（

56、H）胸腺嘧啶核苷（T）,核苷酸合成替代途徑,,氨基喋呤（A）,,葉酸,,第七章  單克隆抗體技術(shù),二、單克隆抗體技術(shù)原理,一、單克隆抗體技術(shù)特點,三、制備方法,1．免疫小鼠（Balb/c，NZB品系)。高純度抗原。免疫4次后取脾臟， 分離淋巴細胞。,2．細胞融合：免疫鼠的脾細胞和鼠源B細胞株（Sp/O2），融合劑PEG,3．選擇培養(yǎng)： Sp/O2細胞株為營養(yǎng)缺陷型，便于篩選。,4．篩選陽性細胞株：抗體檢測（酶標(biāo)，

57、同位素標(biāo)記，熒光標(biāo)記）,5．克隆和亞克隆,,2. 單克隆抗體的篩選克隆,,,,,第七章  單克隆抗體技術(shù),二、單克隆抗體技術(shù)原理,一、單克隆抗體技術(shù)特點,三、制備方法,1．免疫小鼠（Balb/c，NZB品系)。高純度抗原。免疫4次后取脾臟， 分離淋巴細胞。,2．細胞融合：免疫鼠的脾細胞和鼠源B細胞株（Sp/O2），融合劑PEG,3．選擇培養(yǎng)： Sp/O2細胞株為營養(yǎng)缺陷型，便于篩選。,4．篩選陽性細胞株：抗體檢測（

58、酶標(biāo)，同位素標(biāo)記，熒光標(biāo)記）,5．克隆和亞克隆,6．單克隆抗體生產(chǎn)：方法（體內(nèi)法，培養(yǎng)法）及其要點,7．細胞保存（超低溫冷凍）和防止變異。,第七章  單克隆抗體技術(shù),二、單克隆抗體技術(shù)原理,一、單克隆抗體技術(shù)特點,三、制備方法,五、應(yīng)用,四、單克隆抗體技術(shù)的歷史和進展,其他：抗體芯片、生物導(dǎo)彈,基于單抗的抗體工程,表位結(jié)構(gòu)分析：噬菌體展示技術(shù),特異性檢測:蛋白分子（病原抗原、其他分子）,第八章  變態(tài)反應(yīng),要點

59、 介紹參與各種變態(tài)反應(yīng)的組分（細胞、因子）、過程和機制、特點、區(qū)別和臨床實例。,概念 變態(tài)反應(yīng)（allergy）是免疫系統(tǒng)對再次進入機體的抗原作出因過于強烈或不適當(dāng)而導(dǎo)致組織器官損傷的一類免疫反應(yīng)。除伴有炎癥反應(yīng)維持機體正常功能的免疫反應(yīng)并無實質(zhì)性區(qū)別。,第八章  變態(tài)反應(yīng),第一節(jié) 過敏反應(yīng),根據(jù)變態(tài)反應(yīng)中所參與的細胞、活性物質(zhì)、損傷組織器官的機制和產(chǎn)生反應(yīng)所需時間，分為四型。,第二節(jié) 細胞毒型,

60、第三節(jié) 免疫復(fù)合物型,第四節(jié) 細胞免疫（遲發(fā)）型,概念：機體再次接觸抗原時引起的在數(shù)分鐘至數(shù)小時內(nèi)以炎癥為特點的反應(yīng),第八章  變態(tài)反應(yīng),第一節(jié) 過敏反應(yīng),抗原（過敏原）,Th--細胞,B-細胞,IL-4,,記憶細胞,,漿細胞,,抗體（IgE）,,肥大細胞,,,,,,平滑肌,毛細血管,黏液腺,血小板,末梢神經(jīng),嗜堿性粒細胞,過敏反應(yīng)示意圖,激活肥大細胞表面受體機理示意圖,第八章  變態(tài)反應(yīng),第一節(jié) 過敏反

61、應(yīng),第二節(jié) 細胞毒型,由抗體介導(dǎo)的細胞毒，即抗體與為抗原細胞發(fā)生反應(yīng)，激活補體，形成以細胞損傷為特征的一種變態(tài)反應(yīng),,細胞毒型變態(tài)反應(yīng)示意圖新生兒溶血性貧血,初次妊娠,抗原溢出,母體,,,,再次妊娠,,記憶細胞,漿細胞,,產(chǎn)生抗體,溶血,胎盤,,,第八章  變態(tài)反應(yīng),第一節(jié) 過敏反應(yīng),第二節(jié) 細胞毒型,由抗體與可溶性抗原結(jié)合形成的免疫復(fù)合物，沉積于局部血管壁，激活補體和吞噬細胞，產(chǎn)生局部組織損傷為特征的變態(tài)反應(yīng),第三節(jié)

62、 免疫復(fù)合物型,免疫復(fù)合物型變態(tài)反應(yīng)示意圖,,抗原抗體復(fù)合物,,嗜中性粒細胞,第八章  變態(tài)反應(yīng),第一節(jié) 過敏反應(yīng),第二節(jié) 細胞毒型,由細胞免疫介導(dǎo)的一種變態(tài)反應(yīng)。T細胞與相應(yīng)抗原再次反應(yīng)時，分泌細胞因子，使單核巨噬細胞遷移于局部組織，產(chǎn)生炎癥或肉芽腫。,第三節(jié) 免疫復(fù)合物型,第四節(jié) 細胞免疫（遲發(fā)）型,細胞免疫型變態(tài)反應(yīng),抗原,,致敏T細胞,釋放細胞因子,活化巨嗜細胞,,局部反應(yīng),,四種變態(tài)反應(yīng)特征,,,參與成分

63、機理致病機理 病例,IgE 補體 補體 T細胞 肥大細胞Ab+Ag(細胞) Ab+Ag(可溶) 吞噬細胞,致敏 IgE結(jié)合肥大細胞 活性介質(zhì),Ab+Ag(自身細胞),Ab+Ag沉積血管組織細胞壁,Ts機能下降 介質(zhì)機制紊亂,補體+Ab+Ag,前提：長期炎癥,巨噬細胞 +淋巴細胞局部

64、免疫加劇細胞轉(zhuǎn)移,青霉素反應(yīng)花粉,輸血反應(yīng) 新生兒溶血性貧血,血清病自身免疫復(fù)合物病,結(jié)核菌素肉芽腫,Ⅰ型 Ⅱ型Ⅲ型 Ⅳ型,慢性感染,,,,,,,,,第八章  變態(tài)反應(yīng),第一節(jié) 過敏反應(yīng),第二節(jié) 細胞毒型,思考題與作業(yè): 寫出參與各種變態(tài)反應(yīng)的組分（細胞、分子）、過程和機制、特點、區(qū)別及臨床實例。,第三節(jié) 免疫復(fù)合物型,第四節(jié) 細胞免疫（遲發(fā)）型,重點：,感染：病

65、原體侵入機體，定居生長繁殖，直接或通過產(chǎn)生的毒素引起機體組織細胞、器官或全身性病理變化。,第九章   抗感染免疫,抗感染免疫：機體在病原體感染后所產(chǎn)生的生理性和病理性反應(yīng)過程。,概念：,了解不同病原誘導(dǎo)的免疫機理特點,第一節(jié) 抗細菌感染免疫,第九章   抗感染免疫,1.細菌種類及抗原種類、性質(zhì)和特點 O、H、K等。,一、特點： 因細菌感染部位、結(jié)構(gòu)特點和抗原性質(zhì)，引起不同的免疫反應(yīng)。

66、,2.細菌感染方式：細胞內(nèi)和細胞外感染。,二、抗細菌感染免疫機制： 特異性非特異性免疫機制和調(diào)節(jié),1.溶菌酶、補體等；吞噬、消化；,2.細胞免疫；,3.體液免疫：產(chǎn)生抗體和中和作用：毒素、酶類、K抗原；,4.調(diào)理作用：抗體依賴性性細胞毒。,細菌結(jié)構(gòu)示意圖,菌毛,細胞漿,鞭毛,核糖體,DNA,細胞膜,細胞壁,莢膜,第九章   抗感染免疫,第二節(jié)  抗病毒免疫,1.病毒的結(jié)構(gòu)和抗原,一、病毒的生

67、物學(xué)性質(zhì)和感染特點,二、抗病毒感染的免疫機制,1.非特異性免疫：干擾素（種類及特點）；,2.特異性免疫：,3.病毒持續(xù)性感染的特點,細胞免疫：細胞毒：消除病毒（感染細胞，K細胞）；,抗體：中和作用，抗體依賴性細胞毒；,2.感染細胞的特點：寄生部位（胞內(nèi)外、核內(nèi)外）和吸附侵入、復(fù)制和釋放過程，以及對宿主細胞的影響。,,,,,,殼粒,纖突,囊膜,衣殼,芯髓,核衣殼,,,病毒結(jié)構(gòu)示意圖,第九章   抗感染免疫,第三節(jié) 抗寄

68、生蟲免疫,,一、畜禽寄生蟲的種類及其寄生特點,1.種類：原蟲、蠕蟲、昆蟲等（進化特點和機體生理活動）,2.寄生蟲抗原性質(zhì)：免疫原性低,3.機體抗寄生蟲免疫的基本特點（IgA,IgE,過敏反應(yīng)）,第九章   抗感染免疫,第三節(jié) 抗寄生蟲免疫,,二、抗原蟲感染免疫,1.非特異性免疫：終身不感染,一、畜禽寄生蟲的種類及其寄生特點,3.原蟲對免疫應(yīng)答的逃避：（抑制，變換、隱蔽） 吞噬不消除，抗原變換，抗原隱蔽,2.

69、特異性免疫：T細胞和抗體,原蟲感染示意圖,孢子體,裂殖子,配子體,第九章   抗感染免疫,第三節(jié) 抗寄生蟲免疫,,三、抗蠕蟲感染免疫,1.非特異性免疫：宿主與寄生蟲，寄生蟲之間的拮抗,一、畜禽寄生蟲的種類及其寄生特點,二、抗原蟲感染免疫,2.特異性免疫：體液免疫：IgE，IgA（腸道血液） 細胞免疫：遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，局部炎癥環(huán)境 細胞毒殺傷幼蟲等,3.對免疫應(yīng)答

70、的逃避：MHC，吸附宿主抗原，抗原變換， 抑制免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)耐受。,抗蠕蟲感染免疫示意圖,第四節(jié) 疫 苗,一、對疫苗的要求,二、疫苗的種類,1. 傳統(tǒng)疫苗：減毒疫苗，滅活疫苗,基因疫苗的發(fā)明與后基因組計劃,安全性，,有效性,2. 工程疫苗：多肽疫苗，重組疫苗,3. 基因疫苗（核酸疫苗）,基因疫苗的制作原理,,亞單位疫苗的基因操作示意圖,保護性抗原基因,轉(zhuǎn)入表達質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入工程菌,表達質(zhì)粒

71、,,,重組質(zhì)粒,,誘導(dǎo)表達,多肽疫苗,缺失霍亂毒素A1肽示意圖,,重組疫苗,,重組病毒疫苗示意圖,重組質(zhì)粒示意圖,第四節(jié) 疫 苗,一、對疫苗的要求,二、疫苗的種類,1. 傳統(tǒng)疫苗：減毒疫苗，滅活疫苗,基因疫苗發(fā)明與后基因組計劃,2. 工程疫苗：多肽疫苗，重組疫苗,3. 基因疫苗（核酸疫苗）,基因疫苗的制作原理,基因疫苗的作用機制,基因疫苗的評價與發(fā)展前景,安全，,作用持久，,可連接多價表位，,問題：,免疫途徑，高效表達,核酸疫

72、苗免疫反應(yīng)示意圖,,,,,,T細胞,B細胞,,組織中抗原提呈細胞,殺傷性T細胞,Th1細胞,,靶細胞,T細胞增殖分化,殺傷靶細胞,,記憶T細胞,記憶B細胞,Th2細胞分泌細胞因子,漿細胞,組織中抗原提呈細胞,Th細胞,,,抗體,第四節(jié) 疫 苗,一、對疫苗的要求,二、疫苗的種類,三、疫苗的佐劑與免疫載體,1. 佐劑的作用：增強機體免疫效果,2. 佐劑的種類：化學(xué)，生物學(xué)，物理學(xué),3. 免疫載體,第四節(jié) 疫 苗,一、對疫