0緒論動(dòng)物胚胎工程精簡(jiǎn)后

1、,動(dòng) 物 胚 胎 工 程,,王 鋒 王子玉 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物胚胎工程技術(shù)中心,緒 論,一 動(dòng)物胚胎工程的研究概況二 動(dòng)物胚胎工程的研究?jī)?nèi)容三 動(dòng)物胚胎工程的研究意義四 中國(guó)胚胎工程研究備忘錄,一、動(dòng)物胚胎工程的研究概況,,動(dòng)物繁殖學(xué) 生物工程 繁殖技術(shù) 細(xì)胞工程

2、 動(dòng)物胚胎工程,,,1. 動(dòng)物胚胎工程概念,現(xiàn)代生物工程技術(shù)對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的持續(xù)發(fā)展具有舉足輕重的影響，因此，它越來(lái)越成為各國(guó)研究開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)和科技競(jìng)爭(zhēng)的熱點(diǎn)。我國(guó)政府也把生物工程技術(shù)作為優(yōu)先研究和發(fā)展的領(lǐng)域，并取得了令人矚目的成就。,,生物工程包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程。胚胎工程是細(xì)胞工程中的分支。動(dòng)物胚胎工程就是以胚胎為研究對(duì)象，為了加速繁育經(jīng)濟(jì)動(dòng)物，培育動(dòng)物的優(yōu)良品種，或挽救

3、瀕危動(dòng)物使用的一系列工程技術(shù)方法，一般來(lái)說(shuō)包括胚胎移植、試管動(dòng)物（體外受精）、胚胎冷凍、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞、核移植（克隆）技術(shù)等。,,胚胎工程是生物技術(shù)的重要組成部分，它的研究和應(yīng)用不僅推動(dòng)了制藥、器官移植醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的變革，而且還加速了畜牧業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。以牛為例，20世紀(jì)80年代中期，主要發(fā)達(dá)國(guó)家（美國(guó)、加拿大、日本等）在不斷開(kāi)展胚胎工程深入研究的同時(shí)，已開(kāi)始產(chǎn)業(yè)化，加速了良種牛的繁育速度，優(yōu)化了牛群結(jié)構(gòu)，使牛群生產(chǎn)水平大幅度提高，

4、推動(dòng)了畜牧業(yè)及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展。,,我國(guó)近十幾年來(lái)對(duì)胚胎工程的研究投入了較大的人力和物力，單項(xiàng)技術(shù)取得了長(zhǎng)足發(fā)展，但產(chǎn)業(yè)化程度與發(fā)達(dá)國(guó)家相差甚遠(yuǎn)。主要表現(xiàn)在我國(guó)奶類(lèi)總產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的1％多一點(diǎn)，人均占有奶量為世界平均水平的1/15，不到發(fā)展中國(guó)家的1/5，僅為發(fā)達(dá)國(guó)家的1/25；中國(guó)成年母牛的年均產(chǎn)奶量只有1700kg，遠(yuǎn)低于世界平均5000-6000kg的水平（2002年數(shù)據(jù)）。,,造成這么大的差距，除了奶牛數(shù)目不足外，最根本的原

5、因就是中國(guó)奶牛的品質(zhì)不佳，產(chǎn)奶量低。長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)只采用冷凍精液人工授精技術(shù)進(jìn)行牛群品質(zhì)改良，由于世代間隔長(zhǎng)，改良速度慢，制約了牛群生產(chǎn)水平的提高速度。,,為了加速我國(guó)奶牛品質(zhì)的提高，促進(jìn)我國(guó)奶牛業(yè)向著優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、高效方向發(fā)展，只有通過(guò)牛胚胎工程產(chǎn)業(yè)化。目前我國(guó)在胚胎移植改良牛、羊品種，體細(xì)胞克隆牛、羊等家畜的技術(shù)方面已經(jīng)進(jìn)入國(guó)際先進(jìn)行列。,2. 胚胎工程各項(xiàng)技術(shù)之間的關(guān)系,胚胎工程是在研究胚胎移植的理論和技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的，在此

6、基礎(chǔ)上又解決了哺乳動(dòng)物體外受精的技術(shù)，繼而推動(dòng)了胚胎分割、性別鑒定、體細(xì)胞克隆、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等現(xiàn)代胚胎工程技術(shù)的建立和發(fā)展。,,體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育是學(xué)習(xí)本課的基礎(chǔ)。胚胎工程的許多技術(shù)，實(shí)際是在體外條件下，對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作。因此，必須先了解哺乳動(dòng)物受精和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律。,,本門(mén)課在總體內(nèi)容安排上也體現(xiàn)了胚胎工程的發(fā)展脈絡(luò)。首先對(duì)胚胎工程的理論基礎(chǔ)──哺乳動(dòng)物的受精和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律，進(jìn)行了較深入

7、地講述，在此基礎(chǔ)上介紹了各項(xiàng)胚胎工程技術(shù)。,,目前，胚胎工程技術(shù)中應(yīng)用最多的是胚胎移植技術(shù)，無(wú)論是轉(zhuǎn)基因胚胎還是克隆等獲得的胚胎，最后都必須經(jīng)胚胎移植才能獲得后代，胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序”。因此，可以說(shuō)它是胚胎工程技術(shù)的基礎(chǔ)；,,體外受精解決了體內(nèi)胚來(lái)源不足的問(wèn)題；胚胎冷凍技術(shù)使胚胎移植的推廣不再受時(shí)間和空間的限制；胚胎分割技術(shù)方法簡(jiǎn)單，效率更高；胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)不僅是胚胎工程的重要成就之一，在基礎(chǔ)生物學(xué)、畜牧學(xué)、醫(yī)學(xué)

8、上都有重要的應(yīng)用價(jià)值，是當(dāng)前研究的熱門(mén)課題之一。,3. 胚胎工程在繁殖學(xué)中的地位,（1）繁殖 雄性 精子 受精卵（胚胎） 胎兒 雌性 卵子 仔畜,,,,,,（2）繁殖的重要性,種族延續(xù)動(dòng)物生產(chǎn)中的關(guān)鍵性環(huán)節(jié)：肉、奶、蛋等

9、畜產(chǎn)品的獲得均需要經(jīng)過(guò)繁殖環(huán)節(jié)來(lái)實(shí)現(xiàn)。,（3）動(dòng)物繁殖學(xué)的定義及研究?jī)?nèi)容,是研究動(dòng)物生殖活動(dòng)及其調(diào)控規(guī)律和調(diào)控技術(shù)的科學(xué)，是加強(qiáng)畜禽品種改良，保證畜牧業(yè)快速發(fā)展的重要手段，是現(xiàn)代動(dòng)物科學(xué)或畜牧科學(xué)中研究最活躍的學(xué)科之一。是動(dòng)物生產(chǎn)中的一門(mén)基礎(chǔ)學(xué)科，是畜牧專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課，主要包括四大內(nèi)容。,繁殖理論,包括性別分化、性發(fā)育、性行為、配子（精子、卵子）發(fā)生、受精、胚胎發(fā)育、妊娠、分娩等整個(gè)繁殖過(guò)程中的各種生殖現(xiàn)象及機(jī)理。,繁殖技術(shù),同期

10、發(fā)情、超數(shù)排卵、人工授精胚胎移植、體外受精、胚胎冷凍胚胎分割、性別控制、動(dòng)物克隆發(fā)情鑒定、妊娠診斷、生殖免疫助產(chǎn)技術(shù)、生殖疾病控制技術(shù),母,公,排卵,精子,自然交配,人工授精,體外授精,發(fā)情鑒定,精液保存,精子獲能,IVM,顯微授精,精卵結(jié)合,胚胎,胚胎干細(xì)胞,胚胎分割,胚胎移植,胚胎克隆,嵌合體,轉(zhuǎn)基因,誘導(dǎo)發(fā)情,超數(shù)排卵,同期發(fā)情,妊娠,妊娠診斷,分娩,分娩控制,助產(chǎn),難產(chǎn),生殖免疫,免疫去勢(shì),類(lèi)固醇免疫,蛋白質(zhì)免疫,基因免

11、疫,性別控制,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,分子技術(shù),,繁殖管理 繁殖障礙及其防治,,二、動(dòng)物胚胎工程的研究?jī)?nèi)容,胚胎移植胚胎分割胚胎冷凍體外受精胚胎干細(xì)胞技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)動(dòng)物克隆（核移植）性別控制嵌合體技術(shù),1.授精與早期胚胎發(fā)育,受精與早期胚胎發(fā)育,,,,,,,,,胚胎移植,胚胎移植是指將一頭良種母畜配種后的早期胚胎取出，移植到另外一頭或數(shù)頭同種的、生理狀況相同

12、或相似的母畜生殖道的適當(dāng)部位，使之繼續(xù)發(fā)育成新個(gè)體的過(guò)程。實(shí)際上是由產(chǎn)生良種胚胎的供體和養(yǎng)育胚胎的受體分工合作共同繁殖后代的技術(shù)。,胚胎移植技術(shù),牛胚胎移植技術(shù)路線(xiàn)示意圖,,1890年，英國(guó)Walter Heape首次獲得兔受精卵移植成功。20世紀(jì)70年代中期，胚胎移植技術(shù)經(jīng)不斷改進(jìn)，才發(fā)展到實(shí)際應(yīng)用階段。近30年來(lái)，許多國(guó)家都建立了牛胚胎移植專(zhuān)業(yè)性公司，每年移植幾十萬(wàn)頭，平均每次由一頭供體采集得胚胎，可獲得2-9頭犢牛，繁殖效率

13、增加了幾十倍。,意義：　提高良種母畜的繁殖利用率，加快純繁速度；　加快品種的選育進(jìn)程；　代替種畜直接進(jìn)口；　拯救瀕危動(dòng)物；　研究手段。,,胚胎移植產(chǎn)的后代,,體外受精技術(shù),,哺乳動(dòng)物的體外受精已有120多年的歷史，早在1878年，德國(guó)科學(xué)家Schenk就開(kāi)始進(jìn)行體外受精的嘗試。1959年，張明覺(jué) 世界第一批試管兔。1970年，Mukherjee和Cohen， 小鼠。1978年，Steptoe和Edwards，試管嬰兒。

14、1980年，英國(guó) 波爾格，試管牛犢。,顯微受精技術(shù),,胚胎冷凍,胚胎的冷凍保存，是將胚胎貯存在－196℃超低溫下長(zhǎng)期保存的方法。這是20世記70年代試驗(yàn)成功的一項(xiàng)新技術(shù)，是胚胎移植技術(shù)的重大突破，使胚胎移植不受時(shí)間和地點(diǎn)的限制，從而擴(kuò)大了胚胎移植技術(shù)的效率。胚胎冷凍保存技術(shù)也是長(zhǎng)期保存優(yōu)良母?；蜃羁煽康募夹g(shù)措施。胚胎的冷凍方法大體分為常規(guī)冷凍方法（慢速冷凍法）和玻璃化冷凍法兩種。1972年Whittingham等人首先對(duì)小鼠的胚

15、胎冷凍保存取得成功。,胚胎冷凍技術(shù),通過(guò)對(duì)胚胎進(jìn)行顯微操作，將一枚胚胎用顯微手術(shù)等方法分割成二分、四分甚至八分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng),然后移植入受體中,以得到同卵雙生或同卵多生后代的技術(shù)。胚胎分割是擴(kuò)大胚胎來(lái)源的一條有效途徑，其理論依據(jù)是早期胚胎的每一個(gè)卵裂球都具有獨(dú)立發(fā)育成個(gè)體的全能性。,胚胎分割技術(shù),在應(yīng)用胚胎移植術(shù)擴(kuò)大良種畜群時(shí)，結(jié)合采用卵分割法，就可以更充分地利用胚胎。1個(gè)胚胎可當(dāng)2個(gè)或4個(gè)胚胎用，不僅可降低胚胎成本，還可加快家

16、畜的繁育速度。最早的胚胎分割是在家兔進(jìn)行的。1968年，Mullar等將家兔的8細(xì)胞胚胎一分為二，移植給受體母兔后，出生了仔兔。Trounson和Moore（1974）分割綿羊胚胎，繁殖出同卵雙羔。,,,,,,性別控制指通過(guò)人為干預(yù)并按人們的愿望使雌性動(dòng)物繁殖出所需性別后代的一種繁殖新技術(shù)。兩條途徑：精子分離和早期胚胎的性別鑒定。1989年Johnson利用流式細(xì)胞儀成功的分離了兔子的活的X和Y精子，用分離的精子授精并產(chǎn)下了后

17、代。,性別控制技術(shù),早期性別鑒定技術(shù)路線(xiàn),取樣,PCR 性別鑒定,,,,,,雄性,雌性,,奶牛胚胎,,肉牛胚胎,移植,,,移植,胚胎克隆是在胚胎分割基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)，能大量生產(chǎn)基本同質(zhì)的后代。該項(xiàng)技術(shù)在美國(guó)已經(jīng)進(jìn)入商業(yè)化服務(wù)，克隆胚胎可以冷凍保存，凍胚解凍后可再克隆產(chǎn)出同質(zhì)后代。我國(guó)在山羊（1991）、兔（1990、1991）、牛（1995、1996）均有研究報(bào)道，并獲得胚胎克隆或再可隆后代。 胚胎克隆技術(shù)不僅可以生

18、產(chǎn)大量?jī)?yōu)質(zhì)母畜的后代，而且可以與其它生物技術(shù)結(jié)合起來(lái)應(yīng)用。如進(jìn)行性別鑒別后胚胎的克隆、生產(chǎn)高表達(dá)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和用于保護(hù)稀有、瀕危動(dòng)物資源。,克隆技術(shù),哺乳動(dòng)物胚細(xì)胞核移植,哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植,綿羊Dolly，乳腺上皮細(xì)胞，Wilmut et al. (1997)； 世界上第一頭體細(xì)胞克隆動(dòng)物。小鼠30余只，卵丘細(xì)胞，Wakayama et al.(1998)；采用直接注射法將卵丘細(xì)胞注射到去核卵母細(xì)胞質(zhì)中，得到克隆和再克隆小鼠。,,,

19、克隆技術(shù),去核,移核,,克隆技術(shù),電融合,培養(yǎng),,多莉,克隆小鼠,貓,克隆狗與其”父母”,狗,豬,馬,騾子,轉(zhuǎn)基因動(dòng)物就是用實(shí)驗(yàn)室方法將人們需要的目的基因?qū)雱?dòng)物的受精卵，使外源基因與動(dòng)物本身的基因整合在一起，并隨細(xì)胞的分裂而增殖，在動(dòng)物體內(nèi)得到表達(dá)，并能穩(wěn)定地遺傳給后代。,,轉(zhuǎn)基因技術(shù),國(guó)外轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究首創(chuàng)記錄,轉(zhuǎn)基因技術(shù),轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展前景非常廣闊： 1. 通過(guò)基因的定位整合技術(shù)，來(lái)發(fā)現(xiàn)許多未知基因的功能和已知基因的新功能

20、； 2. 在動(dòng)物的遺傳資源保存，動(dòng)物的基因改良及發(fā)揮特別優(yōu)秀個(gè)體的生產(chǎn)性能等方面，都將起到重要作用； 3.動(dòng)物乳腺生產(chǎn)藥用蛋白質(zhì)，是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究另一個(gè)特別重要的目的之一。目前約有20余種基因已在家畜的乳腺中獲得高效表達(dá)，有的已開(kāi)始臨床試驗(yàn)，不久由動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)的蛋白質(zhì)藥物即將面世； 4.通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以生產(chǎn)提供人類(lèi)器官移植所需的轉(zhuǎn)基因豬。,(引自上海轉(zhuǎn)基因研究中心),1994年德國(guó)成功培育出轉(zhuǎn)入生長(zhǎng)素的轉(zhuǎn)基因豬

21、，出現(xiàn)了壯如小牛的“超級(jí)豬”。,(引自上海轉(zhuǎn)基因研究中心),(引自上海轉(zhuǎn)基因研究中心),(引自上海轉(zhuǎn)基因研究中心),胚胎干細(xì)胞,胚胎干細(xì)胞（embryonic stem cells，ES細(xì)胞）主要來(lái)自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、早期胚胎的種細(xì)胞或胎兒的原始生殖細(xì)胞。哺乳動(dòng)物胚胎在囊胚期之前，其每一個(gè)卵裂球都具有多能性，在一定的條件下均可發(fā)育成一個(gè)完整的個(gè)體。 1981年，英國(guó)劍橋大學(xué)的Evans和Kaufman用囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(ICM)建立小

22、鼠ES細(xì)胞系。 1991年Matsui利用小鼠PGCs獲得了ES細(xì)胞系。 1998年美國(guó)Thomson從人的體外受精囊胚中分離得到了ES細(xì)胞。同年約翰霍普金斯大學(xué)的Shamblott等從人的PGC細(xì)胞中分離得到人的全能性干細(xì)胞。,,,,干細(xì)胞研究大事件（黃禹錫事件）,,把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中形成重組胚，把重組胚體外培養(yǎng)到囊胚，然后從囊胚內(nèi)分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞使之定向分化為所需的特定細(xì)胞類(lèi)型 (如神經(jīng)細(xì)

23、胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞)，用于替代療法。這種核移植法的最終目的是用于干細(xì)胞治療，而非得到克隆個(gè)體，稱(chēng)之為“治療型克隆”。,三、動(dòng)物胚胎工程的研究意義,動(dòng)物胚胎工程技術(shù)是動(dòng)物生物技術(shù)的重要組成部分之一，動(dòng)物胚胎工程技術(shù)在二十世紀(jì)后期發(fā)展極為迅速，近年來(lái)胚胎工程技術(shù)的應(yīng)用效益最為顯著，也是21世紀(jì)世界經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)的重要支撐技術(shù)之一。,,現(xiàn)代動(dòng)物胚胎工程的概念涵蓋所有對(duì)動(dòng)物配子和胚胎進(jìn)行工程化操作的技術(shù)方法，主要分為四大類(lèi)技術(shù)體系：第一類(lèi)是胚胎

24、移植相關(guān)技術(shù)，包括超數(shù)排卵與胚胎移植(multiple ovulation and embyo transfer，MOET)技術(shù)、胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)（試管動(dòng)物）、胚胎移植前性別鑒定技術(shù)與動(dòng)物性別控制技術(shù)、卵母細(xì)胞與胚胎的冷凍保存技術(shù)；,,第二類(lèi)為動(dòng)物克隆技術(shù)，包括胚胎分割技術(shù)、細(xì)胞核移植技術(shù)和胚胎嵌合技術(shù)體系；體細(xì)胞克隆技術(shù)還不十分完善，應(yīng)用也剛剛開(kāi)始，由于克隆胚基因再程序化的不完全這一技術(shù)瓶頸的存在，單純的體細(xì)胞克隆產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用尚無(wú)從談

25、起，但細(xì)胞核移植克隆動(dòng)物生產(chǎn)技術(shù)與其他胚胎工程技術(shù)的組裝配套仍顯示出了廣闊的前景和商業(yè)潛力。,,第三為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)；第四類(lèi)為胚胎干細(xì)胞技術(shù)。其中胚胎干細(xì)胞技術(shù)的主要研究意義在于發(fā)育生物學(xué)基礎(chǔ)理論和人類(lèi)醫(yī)學(xué)組織工程。前三類(lèi)胚胎工程技術(shù)在動(dòng)物生產(chǎn)領(lǐng)域有重要的實(shí)踐意義。,,人工授精、試管牛犢、冷凍胚胎、卵分割法等胚胎工程技術(shù)大大加快了畜牧業(yè)的發(fā)展速度，使得家畜優(yōu)良品種的生產(chǎn)商品化了。據(jù)報(bào)道，1987年世界上已經(jīng)有家畜胚胎移植公司20

26、0多個(gè)，如美國(guó)已建立了從事牛胚胎移植、精子冷凍、受精卵分割等技術(shù)研究的格拉納達(dá)公司。這家公司已向澳大利亞、新西蘭、巴基斯坦、巴拉圭和中國(guó)等國(guó)出口胚胎移植術(shù)。該公司已發(fā)展成資產(chǎn)10億美元的企業(yè)。,,胚胎工程不僅蘊(yùn)藏著巨大的經(jīng)濟(jì)效益，同時(shí)對(duì)保護(hù)珍稀動(dòng)物和挽救瀕臨滅絕的野生動(dòng)物也發(fā)揮著重大作用。例如，英國(guó)倫敦動(dòng)物學(xué)院和劍橋動(dòng)物良種繁殖動(dòng)物學(xué)會(huì)合作，把斑馬的胚胎移植到普通馬的子宮里，這匹普通馬生出了一批小斑馬。又如，中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所的科研

27、人員研究大熊貓的體外受精取得了很大進(jìn)展，這將給人工繁殖大熊貓帶來(lái)希望。,,總之，體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)等胚胎工程技術(shù)，不僅廣泛應(yīng)用在畜牧業(yè)生產(chǎn)中，而且與醫(yī)學(xué)、制藥業(yè)等的發(fā)展，以及人們的生活有著越來(lái)越密切的關(guān)系。,四、中國(guó)胚胎工程研究備忘錄,60年代：魚(yú)類(lèi)、兩棲類(lèi)的細(xì)胞核移植 我國(guó)著名科學(xué)家童第周教授，于1960年開(kāi)展魚(yú)類(lèi)及兩棲類(lèi)細(xì)胞核移植研究。鯉鯽核移植魚(yú)已大面積繁殖推廣。,70-80年代：胚胎移植

28、 1973年中科院遺傳所率先開(kāi)展哺乳動(dòng)物胚胎移植，兔胚胎移植成功。 胚胎移植成功動(dòng)物：綿羊（1974年，中科院遺傳所、內(nèi)蒙古三北種羊場(chǎng)），奶牛（1978年，中科院遺傳所、上海牛奶公司第七牧場(chǎng)），山羊（1980年，西北農(nóng)大），小鼠（1980年，中科院遺傳所），馬（1982年，西北大學(xué)），豬（陜西）。,70年代末-80年代初：胚胎冷凍 在含有冷凍保護(hù)劑的溶液里，將胚胎保存于-196℃的液氮中。

29、需要時(shí)，解凍胚胎并移植獲得后代。這項(xiàng)技術(shù)廣泛用于牛的繁殖。 胚胎冷凍移植成功動(dòng)物：兔（1979年，中科院遺傳所），奶牛（1981年，中科院遺傳所、上海奶研所），綿羊（1982年，中農(nóng)院畜牧所），山羊（1982年，西北農(nóng)大）。,,80年代：嵌合動(dòng)物 胚胎細(xì)胞嵌合：將兩個(gè)胚胎聚集在一起，形成一個(gè)具有兩品種胚胎的新胚胎，由此發(fā)育所得的動(dòng)物，叫嵌合動(dòng)物，其各種器官都可以由兩品種細(xì)胞組成。成功的動(dòng)物包括：小鼠（1

30、982年，發(fā)育所），兔（1988年，發(fā)育所），山羊（1993年，西北農(nóng)大）。 胚胎干細(xì)胞嵌合：胚胎干細(xì)胞是由胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)在體外培養(yǎng)下建立的細(xì)胞系。把胚胎干細(xì)胞注射到囊胚內(nèi)，經(jīng)移植獲得嵌合動(dòng)物。1992年，北京大學(xué)培養(yǎng)成功小鼠。,,80年代：胚胎分割 胚胎分割移植成功的有：小鼠（1986年，西北農(nóng)大），奶牛（1987年，中科院遺傳所、四川鳳凰山乳牛場(chǎng)），山羊（1987年，西北農(nóng)大），綿羊（1987年，中農(nóng)

31、院畜牧所），兔（1990年，西北大學(xué)、中科院發(fā)育所）。,,80年代末：體外受精 卵子和精子在體外完成受精過(guò)程后移植獲得的個(gè)體，叫"試管嬰兒"或"試管動(dòng)物"。1986年，北京醫(yī)大獲得自體胚胎移植的試管嬰兒。1988年，湖南醫(yī)大獲得異體胚胎移植的嬰兒。 成功的動(dòng)物有：小鼠（1987年，遺傳所），兔（1990年，西北農(nóng)大），牛（1989年，內(nèi)蒙古大學(xué)），綿羊（1989年，

32、內(nèi)蒙古大學(xué)），山羊（1991年，西北農(nóng)大）。,,90年代：細(xì)胞核移植 細(xì)胞核移植成功的動(dòng)物包括：山羊（1990年，西北農(nóng)大），兔（1991年，中科院發(fā)育所），牛（1995年，華南師大，廣西農(nóng)大），豬（1995年，西北農(nóng)大），小鼠（1996年，湖南醫(yī)大）。,,90年代：連續(xù)細(xì)胞核移植 1993年，中科院發(fā)育所獲得第二代核移植山羊。1992-1996年，西北農(nóng)大得到第一代至第五代核移植山羊。1995年，西北農(nóng)

33、大將滋養(yǎng)層細(xì)胞作為供體細(xì)胞，獲得山羊。,,專(zhuān)業(yè)選修課，2個(gè)學(xué)分，共36個(gè)學(xué)時(shí)，其中理論學(xué)習(xí)30個(gè)學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)2個(gè)共6個(gè)學(xué)時(shí)。 時(shí)間從1-12周，每周連續(xù)上3學(xué)時(shí)（其中2次為實(shí)驗(yàn)課）。 成績(jī)?cè)u(píng)定：期終考試70%+實(shí)驗(yàn)20%+平時(shí)10% 。,本門(mén)課程安排,1.動(dòng)物繁殖學(xué) 2.動(dòng)物繁殖生物技術(shù)（桑潤(rùn)滋） 3.動(dòng)物胚胎工程（郭志勤） 4.動(dòng)物細(xì)胞工程與實(shí)踐（李青旺）,參考資料,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物胚胎工

34、程中心簡(jiǎn)介,動(dòng)物胚胎工程技術(shù)中心成立于2001年，掛靠在動(dòng)物科技學(xué)院及動(dòng)物遺傳育種與繁殖學(xué)科點(diǎn)（博士點(diǎn)），經(jīng)過(guò)五年的發(fā)展，目前本中心已成為江蘇省重要的動(dòng)物胚胎工程研發(fā)機(jī)構(gòu)之一，先后承擔(dān)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整重大技術(shù)研究專(zhuān)項(xiàng) 、江蘇省農(nóng)業(yè)三項(xiàng)工程等各級(jí)科研項(xiàng)目20余項(xiàng)以及10多項(xiàng)橫向委托項(xiàng)目。,,人員組成：中心現(xiàn)有研究人員5名，外聘教授2名，各類(lèi)研究生20余名。聘任日本山口大學(xué)鈴木達(dá)行教授為本中心名譽(yù)教授，新疆畜牧科學(xué)院原院長(zhǎng)、全國(guó)動(dòng)物胚胎生

35、物技術(shù)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)主任郭志勤研究員擔(dān)任本中心兼職博導(dǎo)。,,實(shí)驗(yàn)室建設(shè)：建有動(dòng)物克隆、基因工程與胚胎移植（江浦）3個(gè)實(shí)驗(yàn)室，總面積約200m2。擁有NIKON顯微操作系統(tǒng)、CO2培養(yǎng)箱、胚胎冷凍儀、生物顯微鏡、細(xì)胞融合儀、低溫高速離心機(jī)、PCR儀、凝膠成像系統(tǒng)以及電泳儀等設(shè)備，固定資產(chǎn)近200萬(wàn)元。研究方向：動(dòng)物克隆、轉(zhuǎn)基因、胚胎干細(xì)胞、生物技術(shù)保種、肉羊新品種選育以及胚胎移植技術(shù)推廣等。,發(fā)展中的南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物胚胎工程技術(shù)中心,,,發(fā)