亞麻油對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的改善作用及其機(jī)制研究.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是心血管疾病的病理基礎(chǔ)，該病已成為當(dāng)今世界死亡的主要原因。近年來(lái)，心血管疾病的發(fā)病率急速上升，據(jù)2010年世界衛(wèi)生組織報(bào)告，心血管疾病導(dǎo)致的死亡人數(shù)達(dá)1750萬(wàn)人，預(yù)計(jì)到2030年該病導(dǎo)致的死亡人數(shù)將增加至2330萬(wàn)人。在我國(guó)，據(jù)《中國(guó)心血管病報(bào)告2014》，隨著經(jīng)濟(jì)社會(huì)的發(fā)展，人口老齡化及城鎮(zhèn)化進(jìn)程加速，心血管病發(fā)病率持續(xù)增加，其所造成的死亡率約占總死亡原因的42％，目前估計(jì)全國(guó)心血

2、管病患者達(dá)2.9億。
　　ω-3脂肪酸能夠降低心血管疾病的發(fā)生危險(xiǎn)，其生物學(xué)和分子效應(yīng)能夠調(diào)節(jié)動(dòng)脈粥樣硬化的形成和發(fā)展機(jī)制，包括對(duì)炎癥反應(yīng)、血小板功能、血壓、甘油三酯水平以及動(dòng)脈粥樣斑塊的穩(wěn)定性的調(diào)節(jié)作用。亞麻油中含有豐富的多不飽和脂肪酸，是ALA最豐富的來(lái)源之一。目前已有研究表明亞麻油和ALA具有降低血脂、抑制炎癥反應(yīng)、抗AS以及預(yù)防心血管疾病等重要作用，但關(guān)于其抗AS的具體機(jī)制尚不明確。本研究以亞麻油為研究對(duì)象，通過(guò)建立并篩選

3、出最佳的AS動(dòng)物模型，進(jìn)一步研究亞麻油抗AS作用的重要機(jī)制，為以亞麻油或α亞麻酸為原料進(jìn)行高附加值的功能性食品和保健品的研發(fā)提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型篩選
　　以SD大鼠和ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠為背景建立4種動(dòng)脈粥樣硬化(AS)模型，通過(guò)血漿脂質(zhì)、炎癥水平和病理學(xué)檢測(cè)，篩選出AS研究的最佳動(dòng)物模型。方法8周齡的雄性健康SD大鼠60只，隨機(jī)分成正常組（對(duì)照組1）、高脂高膽固

4、醇組（模型組1）和高脂高膽固醇+維生素D3組（模型組2）;60只8周齡雄性C57BL/6小鼠，其中20只為野生型小鼠（對(duì)照組2）、40只為ApoE-/-小鼠，隨機(jī)分為正?；A(chǔ)飼料喂養(yǎng)組（模型組3）和高脂高膽固醇組（模型組4）;6個(gè)月后觀察體質(zhì)量變化，檢測(cè)血漿脂質(zhì)和炎癥水平，分離主動(dòng)脈進(jìn)行油紅O和蘇木精-伊紅(HE)染色。結(jié)果:與對(duì)照組1相比，模型組1和模型組2大鼠的血漿總膽固醇(TC)、白介素6（IL-6）和C反應(yīng)蛋白(CRP)水平明顯

5、升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但是甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)沒(méi)有明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而且模型組1和模型組2大鼠均未能產(chǎn)生AS斑塊和AS的前期表現(xiàn)。另外，與對(duì)照組2相比，模型組3和模型組4小鼠血漿TC、TG和LDL-C以及炎癥因子IL-6和CRP水平均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，并且其血漿TC、LDL-C、IL-6和CRP水明顯高于

6、模型組3，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。此外，模型組4小鼠血漿HDL-C水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但是模型組3僅有部分脂質(zhì)沉積和AS斑塊出現(xiàn)，而模型組4表現(xiàn)為典型的AS特點(diǎn)。結(jié)論:以模型組1和模型組2方法建立的大鼠AS模型不適合作為AS研究的對(duì)象;模型組3僅出現(xiàn)部分AS病理特點(diǎn)，而模型組4則發(fā)展為典型的AS病理特點(diǎn)，較為適合作為AS研究的對(duì)象。
　　(2)亞麻油對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的改善作用機(jī)制
　　60

7、只8周齡雄性C57 BL/6小鼠，其中20只野生型對(duì)照組小鼠(NG)、40只為ApoE-/-小鼠隨機(jī)分為高脂組(HG)和亞麻油組(FG);12周后分離主動(dòng)脈進(jìn)行油紅O、HE和masson染色檢測(cè)血漿脂質(zhì)和炎癥水平，并通過(guò)免疫組化研究亞麻油通過(guò)TLR4-NF-κB和SCAP-SREBP-2/LDLR途徑降低炎癥反應(yīng)，產(chǎn)生抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的機(jī)制。結(jié)果:油紅O、HE和masson染色結(jié)果表明NG組小鼠主動(dòng)脈沒(méi)有脂質(zhì)沉積和動(dòng)脈粥樣斑塊，而HG

8、組小鼠形成明顯的動(dòng)脈粥樣斑塊以及大量的肌原纖維和膠原纖維，與HG組相比，F(xiàn)G組小鼠動(dòng)脈粥樣斑塊面積顯著減小(P＜0.01)，且僅有少量的肌原纖維和膠原纖維形成。與NG組相比，HG組和FG油組小鼠血清TC、TG和LDL-C水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，而HDL-C的表達(dá)水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與NG組相比，HG組促炎因子IL-6表達(dá)水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與HG組相比，F(xiàn)G

9、組小鼠血清TC和LDL-C以及促炎因子IL-6水平顯著降低(P＜0.01)，而HDL-C水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。此外，與NG組相比，HG組抗炎因子IL-10的表達(dá)水平略有升高，但是沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而FG組抗炎因子IL-10表達(dá)水平顯著升高，且顯著高于高脂組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。免疫組化結(jié)果顯示與NG組相比，HG對(duì)照組和FG組小鼠肝臟TLR4、NF-κB、SCAP、SREBP-2和LD