藥物對動脈粥樣硬化斑塊消退的作用及機制研究.pdf

1、目的： 本研究擬通過建立兔動脈粥樣硬化模型以探討動脈粥樣硬化消退過程中血脂、粥樣斑塊的內膜與中膜比值（IT/MT）及斑塊內血管細胞間粘附分子-1（VCAM-1）、堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）及Bcl-2表達的變化，并分別給予辛伐他汀、氨氯地平、氨氯地平+辛伐他汀、厄貝沙坦和普羅布考進行藥物干預治療，觀察實驗前后上述指標及血管壁超微結構的變化，為藥物消退動脈粥樣硬化斑塊提供理論依據。 材料與方法： 1．模型的

2、建立：70只實驗兔隨機分為正常對照組10只和實驗組60只，正常對照組飼以120～140g/d普通飼料，實驗組喂120～140g/d高脂飼料（含1％膽固醇）12周后改喂普通飼料，并隨機分為自然消退組、辛伐他汀組、氨氯地平組、氨氯地平+辛伐他汀組、厄貝沙坦組和普羅布考組，各10只，分別給予辛伐他汀2mg/（kg·d）、氨氯地平2mg/（kg·d）、氨氯地平2mg/（kg·d）+辛伐他汀2mg/（kg·d）、厄貝沙坦75 mg/（kg·d）和

3、普羅布考50 mg/（kg·d）藥物治療12周。 2．血液生化指標檢測：各組實驗兔分別于實驗開始、12周末、24周末，于清晨空腹經耳緣靜脈采血，測定血清TC、TG、LDL-C及HDL-C水平。 3．組織病理學檢測：采用HE染色，觀察斑塊的形態(tài)學特征，鏡下測量主動脈平均內膜和中膜的厚度；應用VCAM-1、bFGF及Bcl-2的多克隆抗體對主動脈粥樣斑塊進行免疫組織化學染色，已明確斑塊內上述三個因子的表達。透射電鏡觀察血管壁

4、超微結構。 4．所有數據均采用x±s表示，應用Excel和SPSS16．0軟件進行統計處理：藥物療效用配對t檢驗，用藥前后各組血脂的變化用配伍方差分析，以P<0．05為有統計學意義。 結果： 1．血脂水平：自然消退組較正常對照組TC、TG、LDL-C水平明顯升高（P<0．01），HDL-C變化無顯著差異。而與自然消退組相比，氨氯地平+辛伐他汀組及辛伐他汀組可明顯降低血清TC、TG、LDL-C（P<0．01），HD

5、L-C變化無顯著差異，普羅布考組TC、HDL-C、LDL-C下降明顯，TG變化不明顯，而厄貝沙坦和氨氯地平組血脂改變無統計學差異（P>0．05）。 2．病理學結果：自然消退組內膜/中膜比值明顯增加，斑塊內VCAM-1、bFGF顯著表達，而Bcl-2表達減少。電鏡下，自然消退組動脈壁上覆蓋在早期損傷部位的EC不完整，內皮下層增厚，并可見巨噬細胞源性泡沫細胞以及穿過內彈力板至內膜下的VSMC，VSMC呈收縮表型，形成AS性病變的典型

6、特征。AS血管病灶內還可見部分VSMC源性泡沫細胞和大量凋亡細胞。 各藥物組與自然消退組比較，①內膜/中膜比值明顯減小，以氨氯地平+辛伐他汀組減小更顯著（P<0．01）；②除氨氯地平組和普羅布考組Bcl-2的表達無明顯變化外，其它藥物組VCAM-1、bFGF表達顯著降低，而Bcl-2表達明顯增強，其中以氨氯地平+辛伐他汀組效果最佳；③超微結構顯示：各藥物組EC多完整，泡沫細胞減少，胞內外脂肪空泡明顯減少或消失，內膜下VSMC數量

7、減少，多呈收縮型，基質中膠原增生較明顯，除氨氯地平組和普羅布考組外，均可見凋亡細胞減少，主要為正常的血管壁細胞。各藥物組斑塊的超微結構有部分消退的改變，提示藥物有逆轉AS的作用，以氨氯地平+辛伐他汀組作用突出。 結論： 1．自然消退組血清血脂水平明顯升高，HDL-C無顯著變化。斑塊IT/MT明顯升高，VCAM-1和bFGF的表達顯著增加，Bcl-2的表達則明顯下降。 2．與自然消退組相比，氨氯地平+辛伐他汀組及辛

8、伐他汀組可明顯降低血清TC、TG、LDL-C，HDL-C無明顯變化，普羅布考組TC、HDL-C、LDL-C下降明顯，TG變化不顯著，而厄貝沙坦和氨氯地平組血脂變化無統計學差異；藥物組IT/MT明顯減小，以氨氯地平+辛伐他汀組更顯著。除氨氯地平組和普羅布考組Bcl-2的表達無明顯變化外，藥物組VCAM-1、bFGF表達顯著降低，Bcl-2表達明顯增加（P<0．05），其中以氨氯地平+辛伐他汀組尤為顯著。 3．超微結構顯示：自然消退

9、組中，在早期損傷部位的EC有時不完整，內皮下層增厚，可見巨噬細胞源性泡沫細胞以及穿過內彈力板至內膜下的VSMC，VSMC呈收縮表型，形成AS性病變的典型特征。AS血管病灶內還可見部分VSMC源性泡沫細胞和大量凋亡細胞。而各藥物組EC多完整，泡沫細胞減少，胞內外脂肪空泡明顯減少或消失，內膜下VSMC數量減少，多呈收縮型，基質中膠原增生較明顯，除氨氯地平組和普羅布考組外，均可見凋亡細胞減少，主要為正常的血管壁細胞。各藥物組斑塊的超微結構有部