藥物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊消退的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的： 本研究擬通過(guò)建立兔動(dòng)脈粥樣硬化模型以探討動(dòng)脈粥樣硬化消退過(guò)程中血脂、粥樣斑塊的內(nèi)膜與中膜比值（IT/MT）及斑塊內(nèi)血管細(xì)胞間粘附分子-1（VCAM-1）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）及Bcl-2表達(dá)的變化，并分別給予辛伐他汀、氨氯地平、氨氯地平+辛伐他汀、厄貝沙坦和普羅布考進(jìn)行藥物干預(yù)治療，觀察實(shí)驗(yàn)前后上述指標(biāo)及血管壁超微結(jié)構(gòu)的變化，為藥物消退動(dòng)脈粥樣硬化斑塊提供理論依據(jù)。 材料與方法： 1．模型的

2、建立：70只實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分為正常對(duì)照組10只和實(shí)驗(yàn)組60只，正常對(duì)照組飼以120～140g/d普通飼料，實(shí)驗(yàn)組喂120～140g/d高脂飼料（含1％膽固醇）12周后改喂普通飼料，并隨機(jī)分為自然消退組、辛伐他汀組、氨氯地平組、氨氯地平+辛伐他汀組、厄貝沙坦組和普羅布考組，各10只，分別給予辛伐他汀2mg/（kg·d）、氨氯地平2mg/（kg·d）、氨氯地平2mg/（kg·d）+辛伐他汀2mg/（kg·d）、厄貝沙坦75 mg/（kg·d）和

3、普羅布考50 mg/（kg·d）藥物治療12周。 2．血液生化指標(biāo)檢測(cè)：各組實(shí)驗(yàn)兔分別于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始、12周末、24周末，于清晨空腹經(jīng)耳緣靜脈采血，測(cè)定血清TC、TG、LDL-C及HDL-C水平。 3．組織病理學(xué)檢測(cè)：采用HE染色，觀察斑塊的形態(tài)學(xué)特征，鏡下測(cè)量主動(dòng)脈平均內(nèi)膜和中膜的厚度；應(yīng)用VCAM-1、bFGF及Bcl-2的多克隆抗體對(duì)主動(dòng)脈粥樣斑塊進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，已明確斑塊內(nèi)上述三個(gè)因子的表達(dá)。透射電鏡觀察血管壁

4、超微結(jié)構(gòu)。 4．所有數(shù)據(jù)均采用x±s表示，應(yīng)用Excel和SPSS16．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理：藥物療效用配對(duì)t檢驗(yàn)，用藥前后各組血脂的變化用配伍方差分析，以P<0．05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1．血脂水平：自然消退組較正常對(duì)照組TC、TG、LDL-C水平明顯升高（P<0．01），HDL-C變化無(wú)顯著差異。而與自然消退組相比，氨氯地平+辛伐他汀組及辛伐他汀組可明顯降低血清TC、TG、LDL-C（P<0．01），HD

5、L-C變化無(wú)顯著差異，普羅布考組TC、HDL-C、LDL-C下降明顯，TG變化不明顯，而厄貝沙坦和氨氯地平組血脂改變無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0．05）。 2．病理學(xué)結(jié)果：自然消退組內(nèi)膜/中膜比值明顯增加，斑塊內(nèi)VCAM-1、bFGF顯著表達(dá)，而B(niǎo)cl-2表達(dá)減少。電鏡下，自然消退組動(dòng)脈壁上覆蓋在早期損傷部位的EC不完整，內(nèi)皮下層增厚，并可見(jiàn)巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞以及穿過(guò)內(nèi)彈力板至內(nèi)膜下的VSMC，VSMC呈收縮表型，形成AS性病變的典型

6、特征。AS血管病灶內(nèi)還可見(jiàn)部分VSMC源性泡沫細(xì)胞和大量凋亡細(xì)胞。 各藥物組與自然消退組比較，①內(nèi)膜/中膜比值明顯減小，以氨氯地平+辛伐他汀組減小更顯著（P<0．01）；②除氨氯地平組和普羅布考組Bcl-2的表達(dá)無(wú)明顯變化外，其它藥物組VCAM-1、bFGF表達(dá)顯著降低，而B(niǎo)cl-2表達(dá)明顯增強(qiáng)，其中以氨氯地平+辛伐他汀組效果最佳；③超微結(jié)構(gòu)顯示：各藥物組EC多完整，泡沫細(xì)胞減少，胞內(nèi)外脂肪空泡明顯減少或消失，內(nèi)膜下VSMC數(shù)量

7、減少，多呈收縮型，基質(zhì)中膠原增生較明顯，除氨氯地平組和普羅布考組外，均可見(jiàn)凋亡細(xì)胞減少，主要為正常的血管壁細(xì)胞。各藥物組斑塊的超微結(jié)構(gòu)有部分消退的改變，提示藥物有逆轉(zhuǎn)AS的作用，以氨氯地平+辛伐他汀組作用突出。 結(jié)論： 1．自然消退組血清血脂水平明顯升高，HDL-C無(wú)顯著變化。斑塊IT/MT明顯升高，VCAM-1和bFGF的表達(dá)顯著增加，Bcl-2的表達(dá)則明顯下降。 2．與自然消退組相比，氨氯地平+辛伐他汀組及辛

8、伐他汀組可明顯降低血清TC、TG、LDL-C，HDL-C無(wú)明顯變化，普羅布考組TC、HDL-C、LDL-C下降明顯，TG變化不顯著，而厄貝沙坦和氨氯地平組血脂變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；藥物組IT/MT明顯減小，以氨氯地平+辛伐他汀組更顯著。除氨氯地平組和普羅布考組Bcl-2的表達(dá)無(wú)明顯變化外，藥物組VCAM-1、bFGF表達(dá)顯著降低，Bcl-2表達(dá)明顯增加（P<0．05），其中以氨氯地平+辛伐他汀組尤為顯著。 3．超微結(jié)構(gòu)顯示：自然消退

9、組中，在早期損傷部位的EC有時(shí)不完整，內(nèi)皮下層增厚，可見(jiàn)巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞以及穿過(guò)內(nèi)彈力板至內(nèi)膜下的VSMC，VSMC呈收縮表型，形成AS性病變的典型特征。AS血管病灶內(nèi)還可見(jiàn)部分VSMC源性泡沫細(xì)胞和大量凋亡細(xì)胞。而各藥物組EC多完整，泡沫細(xì)胞減少，胞內(nèi)外脂肪空泡明顯減少或消失，內(nèi)膜下VSMC數(shù)量減少，多呈收縮型，基質(zhì)中膠原增生較明顯，除氨氯地平組和普羅布考組外，均可見(jiàn)凋亡細(xì)胞減少，主要為正常的血管壁細(xì)胞。各藥物組斑塊的超微結(jié)構(gòu)有部