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1、生物化學(xué)實驗報告生物化學(xué)實驗報告姓名:姓名:專業(yè):專業(yè):院系:院系:學(xué)號:學(xué)號:3以下進一步來說明凝膠層析的原理。將凝膠裝載柱后,柱床總體積稱為“總體積”,以Vt表示。實質(zhì)上Vt是由Vo,Vi與Vg三部分組成,即Vt=ViVgVo。Vo稱為“孔隙體積”或“外體積”又稱“外水體積”,即存在于柱床內(nèi)凝膠顆粒外面孔隙之間的水相體積,相應(yīng)于一般層析柱法中內(nèi)流動相體積;Vi為內(nèi)體積,即凝膠顆粒內(nèi)部所含水相的體積,Vg為凝膠本身的體積,因此VtVo
2、等于ViVg。洗脫體積與Vo及Vi之間的關(guān)系可用下式表示:Ve=VoKdVi式中Ve為洗脫體積,自加入樣品時算起,到組分最大濃度(峰)出現(xiàn)時所流出的體積;Kd為樣品組分在二相間的分配系數(shù),也可以說Kd是分子量不同的溶質(zhì)在凝膠內(nèi)部和外部的分配系數(shù)。它只與被分離物質(zhì)分子的大小和凝膠顆??紫兜拇笮》植加嘘P(guān),而與柱的長短粗細(xì)無光,也就是說它對每一物質(zhì)為常數(shù),與柱的物理條件無關(guān)。Kd可通過實驗求得,上式可改寫成:Kd=(VeVo)Vi上式中Ve為
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