2012最新國(guó)際宮頸癌篩查指南

1、page 0 © 2010 Roche,,HPV -DNA檢測(cè)現(xiàn)狀及2012最新國(guó)際宮頸癌篩查指南,內(nèi)容：1. HPV介紹2. HPV-DNA檢測(cè)產(chǎn)品及各自特點(diǎn)3. 2012最新國(guó)際宮頸癌篩查指南,HPV介紹,根據(jù)感染組織類型分為：皮膚組織

2、粘膜組織,HPV介紹,E：早期基因區(qū)編碼早期6個(gè)蛋白L：晚期基因區(qū)編碼晚期2個(gè)蛋白,感染后的存在狀態(tài)：狀態(tài)一：非整合狀態(tài)狀態(tài)二：整合到宿主細(xì)胞,http://www.nature.com/nrc/journal/v2/n1/slideshow/nrc700_F1.html,HPV介紹,,,,HPV-DNA檢測(cè)（進(jìn)口并取得FDA注冊(cè)證）,,,,HPVDNA檢測(cè)（國(guó)產(chǎn)）,,,,HPV-DNA檢測(cè)（按不同原理分類）,HPVDNA檢測(cè),Q

3、IAGEN HC2,原理：基于信號(hào)放大的酶標(biāo)板技術(shù)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)的核酸雜交檢測(cè)方法（雜交捕獲）流程：裂解－雜交－捕獲－反應(yīng)－沖洗－信號(hào)收集－判讀時(shí)間：手工操作3.5小時(shí)，儀器操作4.5小時(shí)結(jié)果：檢測(cè)13種HPV高危型，不分型主要問(wèn)題：與個(gè)別HPV亞型會(huì)發(fā)生交叉反應(yīng)，無(wú)內(nèi)對(duì)照，約5%假陽(yáng)性率,DML2000,HPVDNA檢測(cè),Hologic Cervista HRHPV,原理：基于專利Invader® 酶切信號(hào)放大技術(shù)

4、流程：磁珠分離核酸提?。盖行盘?hào)放大－熒光檢測(cè)時(shí)間：4小時(shí)自動(dòng)化孵育 + 2小時(shí)人工操作（半自動(dòng)）結(jié)果：14種高危型16、31、33、52、58、18、39、45、66、68、51、56、66，不分型主要問(wèn)題：可能與其它HPV如HPV67和70發(fā)生交叉反應(yīng)，從而產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果,HPVDNA檢測(cè),Hologic Cervista(r)HPV 16/18,原理：基于專利Invader® 酶切信號(hào)放大技術(shù)流程：磁珠分離核酸提

5、?。盖行盘?hào)放大－熒光檢測(cè)時(shí)間：4小時(shí)自動(dòng)化孵育 + 2小時(shí)人工操作（半自動(dòng)）結(jié)果：僅對(duì)16、18分型主要問(wèn)題：可與高水平的高危型HPV31發(fā)生交叉反應(yīng)。非常低的HPV感染或樣本可能導(dǎo)致假陰性,HPVDNA檢測(cè),ROCHE PCR－多色熒光探針?lè)?原理：基于PCR反應(yīng)結(jié)合不同熒光染料的探針檢測(cè)高危型HPV并對(duì)16、18分型流程：核酸提?。璓CR擴(kuò)增檢測(cè)時(shí)間：5小時(shí)（手工操作時(shí)間15分鐘）結(jié)果：Cutoff值，14種高危型，并

6、對(duì)16、18分型最新產(chǎn)品，文獻(xiàn)見美國(guó)ATHENA實(shí)驗(yàn)（Lancet Oncol）,cobas 4800 HPV檢測(cè)系統(tǒng),GT 16,高危型混合 (12 GT),GT 18,,,,,31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68,HPVDNA檢測(cè),凱普21種人乳頭狀瘤病毒（HPV）分型檢測(cè)試劑盒,原理：PCR+基因芯片導(dǎo)流雜交技術(shù)流程：核酸提取—PCR擴(kuò)增—導(dǎo)流雜交－顯色時(shí)間： 3.5

7、-4個(gè)小時(shí)（手動(dòng)）結(jié)果：21格某格顯色即為某HPV亞型陽(yáng)性（13+5+3），對(duì)21種HPV分型（含其它HPV亞型）主要問(wèn)題：手工操作，易交叉污染，沒有經(jīng)過(guò)臨床實(shí)驗(yàn),HPVDNA檢測(cè)方法,亞能人乳頭瘤病毒基因分型(23型)檢測(cè)試劑盒,原理：使用自行設(shè)計(jì)的HPV基因組中的特異性引物，對(duì)待測(cè)樣品中可能存在的HPV 基因型進(jìn)行PCR擴(kuò)增并進(jìn)行生物素標(biāo)記，再將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與固定在芯片上的23個(gè)特異性探針進(jìn)行特異性的分子雜交，并通過(guò)化學(xué)顯色方

8、式判讀結(jié)果( PCR-反向點(diǎn)雜交法)流程：核酸提取—PCR擴(kuò)增—導(dǎo)流雜交－顯色結(jié)果：膜條顯色直接提示感染的HPV亞型，23種亞型（18+5）（含其它HPV亞型）主要問(wèn)題：手工操作，易交叉污染，沒有經(jīng)過(guò)臨床實(shí)驗(yàn),HPVDNA檢測(cè),透景l(fā)uminex,原理：流式熒光技術(shù)，PCR產(chǎn)物和微球上交聯(lián)的探針根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)的原理雜交，加入熒光標(biāo)記反應(yīng)，最后在流式熒光檢測(cè)儀上檢測(cè)熒光信號(hào)。流程：核酸提?。璓CR擴(kuò)增－微球雜交－熒光標(biāo)記反應(yīng)－熒

9、光分析結(jié)果：26種亞型（19+7），含其它HPV亞型主要問(wèn)題：沒有經(jīng)過(guò)臨床實(shí)驗(yàn),HPV-DNA檢測(cè)主要產(chǎn)品對(duì)比表,2012最新國(guó)際宮頸癌篩查指南,2012年刊登在美國(guó)癌癥學(xué)會(huì)雜志(ACS)和美國(guó)陰道鏡及宮頸病理學(xué)會(huì)雜志（ ASCCP）---宮頸癌預(yù)防及早期診斷指南,2012年，ACS/ASCCP/ASCP 最新指南HPV聯(lián)合細(xì)胞學(xué)篩查：30-65歲的婦女,Pap & HPV,ASC-US & HPV+ or ≥L

10、SIL,NILM & HPV+,Repeat co-test,HPV16 or HPV16/18 genotyping,Colposcopy,1 year,1 year,NILM & HPV-ASC-US & HPV-,Colposcopy,5 years,,+,,-,,+,5 years,,-,Saslow D, et al. Am J Clin Pathol 2012; 137:516-42,Cytolog

11、y alone is noted as an acceptable (but not preferred) option for women 30-65 yrs old every 3 years,immediately,舊指南與新指南的區(qū)別,19,1. ASC-US triage (≥21 years),2. Adjunct screening (≥30 years),ASC-US,,HPVDNA,Colposcopy,Re-scr

12、een (LBC; 1 year),Negative Cytology(NILM),,,,,,–,+,HPVDNA,,+,,+,HPV16/18,Colposcopy,Re-screen (LBC & HPV; 1 year),,,,–,+,Screen (≥3 year),,,–,Re-screen (LBC & HPV; 1 year),Re-screen (LBC; 3 years *acceptab

13、le OR LBC and HPV; 5 years *preferred),,Re-screen (5 years),,co-testing (30-65 years),,For women (30 – 65 yrs), cytology alone every 3 years is noted as an acceptable (but not preferred) option only,聯(lián)合檢測(cè)將是未來(lái)的篩查方向！,21,,