高中生物選修三提綱(浙教版)_第1頁
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文檔簡介

1、基因工程基因工程(生物技術(shù))是狹義的遺傳工程。核心是構(gòu)建重組DNA分子,故也稱重組DNA技術(shù)。工具工具酶的發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)和基因工程的和基因工程的誕生理論基礎(chǔ):1.DNA是生物遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)。2.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的確立。3.遺傳信息傳遞方式的認定。限制性核酸內(nèi)切酶:能夠識別和切割DNA分子內(nèi)一小段特殊核苷酸序列的酶。DNA連接酶質(zhì)粒(載體):具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子,在細菌之中獨立于擬核之外。常用大腸桿菌質(zhì)粒,這種質(zhì)粒常含有抗生素抗

2、性基因(作為標記基因)。除質(zhì)粒外載體還有噬菌體、植物病毒和動物病毒(均為DNA病毒)基因工程的原理和技基因工程的原理和技術(shù)基本原理:讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細胞在穩(wěn)定和高效地表達。基本操作步驟:1.獲取目的基因。目的基因的序列已知:1.化學(xué)方法合成。2.逆轉(zhuǎn)錄法(以mRNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成)。3.用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)擴增目的基因。目的基因的序列未知:從基因文庫(包括DNA分子的所有基因)中獲取2.形成

3、重組DNA分子用相同的限制酶切割目的基因和載體DNA3.將重組DNA分子導(dǎo)入受體細胞常用的轉(zhuǎn)化方法:導(dǎo)入植物細胞:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(農(nóng)桿菌特點:易感染雙子葉植物和裸子植物,對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力。原理:Ti質(zhì)粒上的tDNA可以轉(zhuǎn)移到受體細胞,并整合到受體細胞染色體的DNA上),其次還有基因槍法和花粉管通道法等。導(dǎo)入動物細胞:顯微注射技術(shù)。此方法的受體細胞多是受精卵。導(dǎo)入微生物細胞:原核生物作為受體細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳

4、物質(zhì)相對較少,最常用的原核細胞是大腸桿菌,其轉(zhuǎn)化方法是:先用氯化鈣處理細胞,使其成為感受態(tài)細胞,再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。4.篩選含有目的基因的受體細胞依據(jù):標記基因(或目的基因)是否表達后,會喪失細胞全能性的表達能力)全能性表達的難易程度:受精卵>生殖細胞>干細胞>體細胞;植物細胞>動物細胞植物組織培養(yǎng)程序條件:離體(基因的選擇性表達)、營養(yǎng)劑、生

5、長調(diào)節(jié)劑、無菌、半固體培養(yǎng)基(含0.71%瓊脂)愈傷組織:一種相對沒有分化的活的薄壁細胞團組成的新生組織,在創(chuàng)傷的刺激下脫分化在創(chuàng)傷表面形成的。通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑的適當配比,可誘導(dǎo)出芽和根的頂端分生組織,再得植株。胚性細胞:將含愈傷組織培養(yǎng)物的試管放在搖床上,通過液體懸浮培養(yǎng)分散成的單細胞。細胞質(zhì)豐富、液泡小、細胞核大。可發(fā)育成胚狀體,再得植株。用原生質(zhì)體培養(yǎng)也可得新植株植物細胞全能性的體現(xiàn)在長期培養(yǎng)中,培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官

6、形成能力下降的可能原因:1.染色體畸變、細胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等,且結(jié)果不可逆。2.細胞或組織中激素平衡被打破或細胞對外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變3.產(chǎn)生了缺乏成胚性的細胞系細胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)細胞培養(yǎng):單細胞—細胞團—球形胚—心形胚—胚狀體—完整植株器官培養(yǎng):有的植物可以在愈傷組織的基礎(chǔ)上直接發(fā)育出花器官(調(diào)節(jié)激素比)可在試管中進行植物受精過程和自受精卵進行的植物胚胎發(fā)育過程原生質(zhì)體培養(yǎng)和植物細胞工程由于植物細胞壁的存在,植物的組織培

7、養(yǎng)和克隆有一定難度。原生質(zhì)體:獲得:在0.50.6molL的甘露醇溶液環(huán)境下用纖維素酶和果膠酶的混合液處理細胞,獲得球形的原生質(zhì)體。原生質(zhì)體融合(植物體細胞雜交)意義:克服了遠緣雜交不親和的障礙。打破物種之間的生殖隔離,擴大遺傳重組范圍。植物細胞工程:培養(yǎng)植物細胞(原生質(zhì)體),借助基因工程方法,將外源遺傳物質(zhì)導(dǎo)入受體細胞,或通過細胞融合、顯微注射等(原生質(zhì)體)將不同來源的遺傳物質(zhì)重新組合(再誘導(dǎo)出細胞壁),培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因細胞或重組細胞,得新

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