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
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1、生物選修3教材答案第1頁共27頁高中生物選修高中生物選修3教材答案教材答案?1.11.1DNADNA重組技術(shù)的基本工具重組技術(shù)的基本工具(一)思考與探究1.限制酶在DNA的任何部位都能將DNA切開嗎?以下是四種不同限制酶切割形成的DNA片段:(1)…CTGCA(2)…AC(3)GC…(4)…G…G…TGCG……CTTAA(5)G…(6)…GC(7)GT…(8)AATTC…ACGTC……CGCA…G…你是否能用DNA連接酶將它們連接起來?
2、答:2和7能連接形成…ACGT……TGCA…;4和8能連接形成…GAATTC……CTTAAG…;3和6能連接形成…GCGC……CGCG…;1和5能連接形成…CTGCAG……GACGTC…。2.聯(lián)系你已有的知識,想一想,為什么細(xì)菌中限制酶不剪切細(xì)菌本身的DNA?提示:迄今為止,基因工程中使用的限制酶絕大部分都是從細(xì)菌或霉菌中提取出來的,它們各自可以識別和切斷DNA上特定的堿基序列。細(xì)菌中限制酶之所以不切斷自身DNA,是因?yàn)槲⑸镌陂L期的進(jìn)
3、化過程中形成了一套完善的防御機(jī)制,對于外源入侵的DNA可以降解掉。生物在長期演化過程中,含有某種限制酶的細(xì)胞,其DNA分子中或者不具備這種限制酶的識別切割序列,或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識別序列的堿基上,使限制酶不能將其切開。這樣,盡管細(xì)菌中含有某種限制酶也不會使自身的DNA被切斷,并且可以防止外源DNA的入侵(本題不要求學(xué)生回答的完全,教師可參考教師用書中的提示,根據(jù)學(xué)生的具體情況,給予指導(dǎo)。上述原則也應(yīng)適用于其他章節(jié)中有關(guān)問題的
4、回答)。3.天然的DNA分子可以直接用做基因工程載體嗎?為什么?提示:基因工程中作為載體使用的DNA分子很多都是質(zhì)粒(plas),即獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外的一種可以自我復(fù)制、雙鏈閉環(huán)的裸露的DNA分子。是否任何質(zhì)粒都可以作為基因工程載體使用呢?其實(shí)不然,作為基因工程使用的載體必需滿足以下條件。(1)載體DNA必需有一個或多個限制酶的切割位點(diǎn),以便目的基因可以插入到載體上去。這些供目的基因插入的限制酶的切點(diǎn)所處的位置,還必須是在質(zhì)粒本身
5、需要的基因片段之外,這樣才不至于因目的基因的插入而失活。(2)載體DNA必需具備自我復(fù)制的能力,或整合到受體染色體DNA上隨染色體DNA的復(fù)制而同步復(fù)制。(3)載體DNA必需帶有標(biāo)記基因,以便重組后進(jìn)行重組子的篩選。生物選修3教材答案第3頁共27頁1.作為基因工程表達(dá)載體,只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎?為什么?答:不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用,還需要有其他控制元件,如啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建上述元件
6、的主要理由是:(1)生物之間進(jìn)行基因交流,只有使用受體生物自身基因的啟動子才能比較有利于基因的表達(dá);(2)通過cDNA文庫獲得的目的基因沒有啟動子,只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無法轉(zhuǎn)錄;(3)目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記;(4)為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平,往往還要增加一些其他調(diào)控元件,如增強(qiáng)子等;(5)有時需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位,往往要加上可以標(biāo)識存在部位的基因(或做成目的基因與標(biāo)識基因的融合基因),如
7、綠色熒光蛋白基因等。2.根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理,你能分析出農(nóng)桿菌不能將目的基因?qū)雴巫尤~植物的原因嗎?若想將一個抗病基因?qū)雴巫尤~植物,如小麥,從理論上說,你應(yīng)該如何做?提示:農(nóng)桿菌可分為根瘤農(nóng)桿菌和發(fā)根農(nóng)桿菌,在植物基因工程中以根瘤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化最多。根瘤農(nóng)桿菌廣泛存在于雙子葉植物中。據(jù)不完全統(tǒng)計,約有93屬643種雙子葉植物對根瘤農(nóng)桿菌敏感。裸子植物對該菌也敏感。當(dāng)這些植物被該菌侵染后會誘發(fā)腫瘤。
8、近年來,也有報道該菌對單子葉植物也有侵染能力。根瘤農(nóng)桿菌侵染植物是一個非常復(fù)雜的過程。根瘤農(nóng)桿菌具有趨化性,即植物的受傷組織會產(chǎn)生一些糖類和酚類物質(zhì)吸引根瘤農(nóng)桿菌向受傷組織集中。研究證明,主要酚類誘導(dǎo)物為乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮,這些物質(zhì)主要在雙子葉植物細(xì)胞壁中合成,通常不存在于單子葉植物中,這也是單子葉植物不易被根瘤農(nóng)桿菌侵染的原因。近年來還發(fā)現(xiàn)一些中性糖,如L阿拉伯糖、D木糖等也有誘導(dǎo)作用。酚類物質(zhì)和糖類物質(zhì)既可以作為根瘤農(nóng)桿菌的
9、趨化物,又可以作為農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上Vir區(qū)(毒性區(qū))基因的誘導(dǎo)物,使Vir區(qū)基因活化,導(dǎo)致TDNA的加工和轉(zhuǎn)移,從而侵染植物細(xì)胞。需要注意的是農(nóng)桿菌中不同的菌株,侵染能力有差別,在基因工程中需要加以選擇使用。利用農(nóng)桿菌侵染單子葉植物進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化時,是需要加上述酚類物質(zhì)的,同時單子葉植物種類不同,農(nóng)桿菌侵染進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化的效果也有很大差異。如果想將一個抗病毒基因轉(zhuǎn)入小麥,也可以用農(nóng)桿菌,但要注意兩點(diǎn):①要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株,因?yàn)椴皇撬?/p>
10、的農(nóng)桿菌菌株都可以侵染單子葉植物;②要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì),一般為乙酰丁香酮等,目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏(趨化性)和激活農(nóng)桿菌的Vir區(qū)(誘導(dǎo))的基因,使TDNA轉(zhuǎn)移并插入到染色體DNA上。3.利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素,聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功能的知識,結(jié)合基因工程操作程序的基本思路,思考一下,若要生產(chǎn)人的糖蛋白,可以用大腸桿菌嗎?提示:有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價結(jié)合的糖鏈,這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體上加工完成的,內(nèi)質(zhì)
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