nk1.1cd4nkg2dt細胞的免疫調(diào)節(jié)活性鑒定及其組織分布

1、分類虧U D C5 I II I I I I I I I I I I I I I I I jY 3 2 7 4 5 1 9塌叫大譬Y ：A N G Z H O U U N I V E R S I T Y學(xué) 號M 1 4 5 5 8密 級碩士學(xué)位論文( 學(xué)術(shù)型)N K 1 ．1 一C D 4 + N K G 2 D + T 細胞的免疫調(diào)節(jié)活性鑒定及其組織分布指導(dǎo)教師姓名：申請學(xué)位級別：論文提交日期：學(xué)位授予單位：胡春霞學(xué)科專業(yè)名稱： 危瘞

2、鱟論文答辯日期： 2 Q ! Z 生三月2 壘旦學(xué)位授予日期： 2 Q ! Z 生魚旦3 Q 旦2 0 1 7 年6 月胡春霞： N K l ．1 。C D 4 + N K G 2 D + T 細胞的免疫調(diào)節(jié)活性的鑒定及其組織分布N K l ．1 - C D 4 + N K G 2 D + T 細胞的免疫調(diào)節(jié)活性鑒定及其組織分布中文摘要 中又捅姜課題組前期制備p C D 8 6 ：R A E ．1 ￡轉(zhuǎn)基因鼠，發(fā)現(xiàn)該小鼠脾臟N K l

3、．1 。C D 4 + N K G 2 D + T細胞頻率顯著增多，且分泌T G F ．p 發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)活性。另外，我們初步發(fā)現(xiàn)在D S S 誘導(dǎo)腸炎小鼠模型中，脾臟中的N K l ．1 - C D 4 + N K G 2 D + T 細胞頻率明顯增加。為明確D S S 誘導(dǎo)小鼠脾臟中增多的N K l ．1 - C D 4 + N K G 2 D + T 細胞是否同p C D 8 6 ：R A E 一1 8 轉(zhuǎn)基因鼠體類似，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)

4、活性，本項目進一步分析D S S 腸炎小鼠N K l ．1 ’C D 4 + N K G 2 D + T 細胞的頻率及其表型變化，以及鑒定該細胞亞群是否在小鼠腸炎中發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)活性及其分子機制；并觀察N K l ．1 一C D 4 + N K G 2 D + T 細胞的體外增殖特性及其在p C D 8 6 ：R A E ．1 ￡轉(zhuǎn)基因鼠的組織分布。研究內(nèi)容分為兩個部分：第一部分：N K l ．1 。C D 4 + N K G 2 D +

5、 T 細胞的免疫調(diào)節(jié)活性鑒定目 的：鑒定N K l ．1 - C D 4 + N K G 2 D + T 細胞的免疫調(diào)節(jié)活性及其機制。方 法：首先利用2 ．5 ％D S S 喂養(yǎng)C 5 7 B L ／6 小鼠，誘導(dǎo)腸炎發(fā)生，利用流式細胞術(shù)分別檢測腸炎小鼠和野生型小鼠腸道和脾臟中C D 4 + N K G 2 D + T 細胞的頻率；檢測腸炎小鼠和野生型小鼠脾臟細胞中C D 4 + N K G 2 D + T 細胞中C D 3 、Y 6

6、T 以及N K l ．1 的表達情況；檢測N K l ．1 ．C D 4 + N K G 2 D + T 細胞T G F ．B 的表達情況。其次將流式細胞儀分選出的N K l ．1 ．C D 4 +N K G 2 D + T 細胞，通過尾靜脈過繼輸入至D S S 誘導(dǎo)腸炎小鼠，并且將另一組D S S 造模小鼠體內(nèi)同時輸入經(jīng)T G F ．B 抗體孵育的N K l ．1 - C D 4 + N K G 2 D + T 細胞，觀察小鼠腸炎的發(fā)

7、病及體重變化。然后取出小鼠的腸道，肉眼觀察小鼠腸道炎癥情況；并且將炎性腸道組織制作石蠟切片，利用H E 染色，顯微鏡下觀察小鼠腸道的病理改變情況。最后利用基因芯片技術(shù)比較N K l ．1 - C D 4 + N K G 2 D + T 細胞和N K l ．1 + C D 4 + N K G 2 D + T 細胞的轉(zhuǎn)錄m R N A 和長非編碼R N A ( L n e R N A ) 的差異表達。結(jié) 果：與野生型小鼠相比，D S S 一