脂類代謝小鼠胚胎成纖維細(xì)胞重編程調(diào)控的初步研究.pdf

1、糖類，蛋白質(zhì)和脂類是生物體物質(zhì)能量代謝的三大主要分子。其中糖類和蛋白質(zhì)在誘導(dǎo)多能干細(xì)胞中的代謝及其代謝對細(xì)胞命運(yùn)的影響都有了長足的進(jìn)展，而脂類在誘導(dǎo)多能干細(xì)胞中的表現(xiàn)則很少有人涉及。我們的實驗就集中研究脂類在體細(xì)胞重編程中的變化及其對這個過程的影響，并探索其分子機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn)小鼠胚胎干細(xì)胞中以及誘導(dǎo)多能干細(xì)胞中普遍存在著脂滴。脂滴隨胚胎干細(xì)胞的分化而消失，隨胚胎成纖維細(xì)胞的重編程而出現(xiàn)。隨著重編程的進(jìn)行，脂滴相關(guān)基因的表達(dá)升高，中性脂的

2、分解代謝與合成代謝在重編程中發(fā)生動態(tài)變化，合成代謝占優(yōu)勢。脂滴相關(guān)基因以及脂類代謝的底物等都會影響體細(xì)胞的重編程。我們進(jìn)一步研究脂類代謝調(diào)控的主要信號通路對重編程的影響。我們發(fā)現(xiàn)固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1(Srebpl)能夠提高四因子SKOM誘導(dǎo)的重編程效率，過氧化物酶體增殖物激活受體γ(Pparγ)顯著降低三因子SKO的重編程的效率。Srebp1能夠提高上皮細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)，降低間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)，并能促進(jìn)內(nèi)源性多能基因的表達(dá)。Sre

3、bp1能夠在重編程的早期第2天到第8天發(fā)揮作用，Srebp1的入核部分(nSrebp1)對重編程起作用主要是在第2天到第11天，與Srebp1相類似。Srebpl以及nSrebp1對重編程發(fā)揮作用具有劑量效應(yīng)，Srebp1與四因子SKOM同等劑量發(fā)揮作用時，能夠促進(jìn)重編程的效率而nSrebpl則需要1/8劑量或更少。在ES細(xì)胞中knockdownSrebpl對ES細(xì)胞的增殖與細(xì)胞周期并沒有影響。我們對于所獲得iPSC克隆SkomSreb