溫度對刺參補體C3 mRNA和miR-137不同組織表達影響.pdf

1、作為補體系統(tǒng)的中心成分，補體C3在整個補體系統(tǒng)的激活中起著重要作用。補體C3蛋白在無脊椎動物對病原微生物的免疫防御中扮演著重要的角色。本文研究了溫度對刺參AjC3 mRNA和MicroR-137在體腔液、腸和呼吸樹中表達的影響。實驗將飼養(yǎng)在8℃、16℃、23℃的海水中的刺參用2μg/μl的脂多糖100μl注射刺激，分別在3h、6h、9h、12h、24h在低溫滅菌條件下提取體腔液、腸和呼吸樹的總RNA，質(zhì)量合格后將總RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA

2、；設(shè)計細(xì)胞色素b及AjC3 mRNA和MicroR-137的引物，分別以體腔液、腸和呼吸樹的cDNA為模板，檢測體腔液中AjC3 mRNA和MicroR-137的含量。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴經(jīng)脂多糖刺激之后AjC3mRNA在仿刺參體腔液、呼吸樹、腸3個組織中均有表達，其中體腔液中含量最多，腸次之,呼吸樹中最少；LPS刺激實驗結(jié)果顯示 AjC3 mRNA在體腔液、呼吸樹和腸中各時間段表達量變化均呈現(xiàn)先升高再降低的趨勢。且體腔液

3、、呼吸樹和腸中AjC3 mRNA表達量在9h達到峰值。LPS刺激8℃組刺參、16℃組和23℃組刺參24h過程中，體腔液、呼吸樹和腸中MicroR-137均有表達，且表達量變化趨勢總體相似，為先降低后升高，但具體的變化幅度差別較大。8℃組刺參在刺激6h時表達量極顯著下降（p<0.01），在9h達到最低值。16℃組刺參在9h前后階段表達量變化不顯著（p>0.05）。23℃組中各組織也是在9h前后階段表達差異顯著（p>0.05），先上升后下降

4、。但是各個組織進行比較，體腔液中16℃ MicroR-137含量呈現(xiàn)先下降后增高的趨勢比較明顯，23℃與8℃ MicroR-137會在9h下降但是在9h后MicroR-137含量還會發(fā)生輕微浮動；在腸和呼吸樹中，23℃組、16℃組和8℃組中MicroR-137含量會在9h下降，在下降之后的時間段內(nèi)，MicroR-137的含量還會發(fā)生上升和下降的變化。⑵不同溫度下，AjC3 mRNA和MicroR-137的表達量不同；低溫和高溫對刺參的免

5、疫反應(yīng)有抑制作用， AjC3 mRNA被脂多糖刺激后表現(xiàn)出上升時，MicroR-137都會表現(xiàn)出下降：在體腔液中AjC3 mRNA呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢，而MicroR-137則呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，且在體腔液內(nèi)AjC3 mRNA含量變化明顯，在腸和呼吸樹中MicroR-137含量變化規(guī)律不明顯，體腔液、腸和呼吸樹的變化明顯程度依次降低；AjC3 mRNA與MicroR-137的相關(guān)性（AjC3 mRNA上升時MicroR-137下降

6、）上，體腔液中二者相關(guān)性最高，其次是腸，最后是呼吸樹。說明溫度影響AjC3 mRNA的表達，高溫或低溫都會抑制AjC3 mRNA的表達，但溫度對MicroR-137的表達影響不明顯；MicroR-137和AjC3 mRNA之間存在負(fù)相關(guān)性，可能調(diào)控AjC3 mRNA的表達，參與免疫反應(yīng)；不同組織中MicroR-137和AjC3 mRNA相關(guān)性不同，體腔液中MicroR-137和AjC3 mRNA相關(guān)性最高，腸次之，呼吸樹MicroR-1