德州驢H-FABP基因克隆及其mRNA在不同組織部位的表達(dá)差異.pdf

1、在驢的育種中肉質(zhì)性狀是一個(gè)重要的標(biāo)志性指標(biāo)，其中的一個(gè)重要的因素就是驢肉肌內(nèi)脂肪的含量。脂肪是影響肉質(zhì)性狀的一個(gè)比較重要的因素，尤其是肌內(nèi)脂肪被認(rèn)為與肉質(zhì)及口感呈正相關(guān)，會(huì)影響肉的嫩度、剪切力、風(fēng)味和多汁性等。心臟脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)是脂肪酸結(jié)合蛋白家族中最普遍的一種類(lèi)型，主要存在于心肌、骨骼肌和乳腺等對(duì)脂肪酸高度需求的組織中，其主要作用是防止細(xì)胞內(nèi)堆積游離脂肪酸。目前，對(duì)多種畜禽的研究表明，H-FABP基因可作為影響畜禽肌內(nèi)

2、脂肪含量和肉質(zhì)性狀的侯選基因。盡管近十年來(lái)人們通過(guò)不斷的選育來(lái)選擇產(chǎn)肉率高，生長(zhǎng)發(fā)育速度快的新品種，卻忽視了肌內(nèi)脂肪含量的選育。有研究表明驢肉肌內(nèi)脂肪的含量應(yīng)該在2％-3％較為合適，而德州驢和華北驢的肌肉含脂率分別為5.05％和5.31％，均超過(guò)此指標(biāo)。本試驗(yàn)對(duì)德州驢H-FABP基因進(jìn)行克隆測(cè)序，獲得該基因的全序列;并分析該基因mRNA在不同組織部位的表達(dá)差異。以期為進(jìn)一步開(kāi)展德州驢H-FABP基因與其肉質(zhì)性狀的相關(guān)分析，進(jìn)行分子標(biāo)記輔

3、助選擇、基因定位、表達(dá)以及德州驢與其它物種間系統(tǒng)進(jìn)化研究提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　 本研究對(duì)德州驢心臟脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)基因進(jìn)行了克隆測(cè)序，并與GenBank中11個(gè)物種相應(yīng)基因編碼區(qū)核苷酸序列、氨基酸序列進(jìn)行了比對(duì)分析。結(jié)果表明，德州驢H-FABP基因由4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子組成，外顯子1、外顯子2、外顯子3和外顯子4大小分別為73、173、102和57bp，內(nèi)含子1、內(nèi)含子2和內(nèi)含子3大小分別為3500、1981

4、和1499bp。CDS序列全長(zhǎng)為405bp，前體氨基酸數(shù)為134個(gè)。物種間在該基因核苷酸序列上有較高的保守性。通過(guò)最小進(jìn)化法(ME法)、鄰接法（NJ法）和非加權(quán)組平均法（UPGMA法）用H-FABP基因編碼區(qū)核苷酸序列構(gòu)建的物種間分子系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)，結(jié)果表明，3種方法構(gòu)建的物種間分子系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)基本一致。并且三種分子進(jìn)化樹(shù)結(jié)果與動(dòng)物學(xué)分類(lèi)一致，表明H-FABP基因適合于構(gòu)建不同物種間的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。
　　 德州驢H-FABPmRNA在心