mir-7和mir-153與靶mRNA相互作用的實(shí)驗(yàn)研究和理論分析.pdf

1、microRNA是近年來發(fā)現(xiàn)的在細(xì)胞中非常重要的一類小分子非編碼RNA，其作為一種轉(zhuǎn)錄后的調(diào)節(jié)因子在高等真核生物的基因表達(dá)中起到重要作用。microRNA在動物中廣泛存在，并具有十分重要的調(diào)節(jié)作用，因此，研究miRNA的調(diào)控作用具有非常重要的意義的。
　　 mir-7和mir-153分別在個體發(fā)育和人類一些癌癥的發(fā)生有著密切關(guān)系，如mir-7在保護(hù)動物個體在變換的環(huán)境中正常發(fā)育上面發(fā)揮著非常重要的作用，對分子網(wǎng)絡(luò)的穩(wěn)定性具有至關(guān)

2、重要的地位；而mir-153可負(fù)調(diào)控阿爾茨海默病的主要致病基因APP及APLP2的蛋白表達(dá)，降低其降解片段的生成。本論文主要研究對象就是mir-7和mir-153，以及與其靶mRNA的相互作用。
　　 在實(shí)驗(yàn)上，首先將把mir-7和mir-153的目的片段構(gòu)建到pmR-mCherry質(zhì)粒中、將mir-7和mir-153共同預(yù)測的13個靶基因的目的片段構(gòu)建到pGL3-Control質(zhì)粒中。其次，將構(gòu)建好的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞中，

3、測量目的靶基因的表達(dá)量。在轉(zhuǎn)染試驗(yàn)中，用其中一個靶基因ARID4A來做不同miRNA與mRNA的比值的實(shí)驗(yàn)。
　　 在理論上，利用數(shù)學(xué)模型來構(gòu)建mRNA和miRNA相互作用的模型研究，研究了mRNA的穩(wěn)定，本文分別計算了microRNA與mRNA轉(zhuǎn)錄率的比值α和microRNA與mRNA的結(jié)合率γ。并將我們的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與理論計算結(jié)果進(jìn)行了比較分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與理論部分結(jié)果定性吻合，這為今后描述miRNA與mRNA之間的相互作用提供了