光動力體外殺滅白念珠菌的效果評價.pdf

1、抗生素等抗菌藥物是把雙刃劍，在為人類的醫(yī)療及農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域帶來便利生活的同時，也在消耗著人類世界的生存空間及健康財富，這一切主要是由抗菌藥物的濫用引起的。在2014年，世界衛(wèi)生組織(WHO)發(fā)布的《抗菌藥物耐藥:全球監(jiān)測報告》指出抗菌藥物濫用等因素造成的耐藥形式嚴(yán)峻，嚴(yán)重地威脅著全球各地人群健康，因此急需可靠有效的治療真菌感染的方法。
　　光動力治療（Photodynamic Therapy,PDT）在抗菌治療方法中占有重要地位，研究

2、表明光動力治療安全且操作簡單，因其作用方式具有非特異性，所以不易產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象，而且已有研究表明光動力治療具有殺傷耐藥菌株的潛力。目前雖有關(guān)于光動力治療對白念珠菌殺傷效果的研究，但是采用甲苯胺藍O（TBO）介導(dǎo)的光動力治療方法殺滅白念的研究較少，特別是對白念生物膜的殺傷效果研究并未形成一定的系統(tǒng)性。因此TBO-PDT對白念的殺傷效果的研究對相關(guān)方法和菌落的處理具有一定的借鑒意義。
　　本研究擬采取光動力治療的方法對真菌中的白念珠菌進

3、行體外殺傷效果研究，即以甲苯胺藍作為光敏劑，以633 nm波長的光作為激發(fā)光源，研究白念珠菌浮游形式和生物膜在甲苯胺藍O（TBO）所介導(dǎo)的光動力治療下的體外殺傷效果，并在此基礎(chǔ)上探索抗真菌藥物伊曲康唑或生物合成的納米銀粒子對TBO介導(dǎo)的光動力治療是否具有促進作用，以期為以后的動物實驗及臨床治療真菌感染提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)和方法指導(dǎo)。
　　主要研究內(nèi)容與結(jié)論：
　?、僖园啄钪榫∮尉☉腋顟B(tài)的白念珠菌）作為研究對象，采用菌落計數(shù)法（

4、CFU/ml）研究光敏劑TBO在633 nm的紅光作用下對白念浮游菌的殺傷效果。通過對比光照前后的存活菌量發(fā)現(xiàn)，TBO-PDT能對白念浮游菌進行有效殺傷，并且能夠?qū)崿F(xiàn)完全殺傷的效果。另外，殺傷效果呈現(xiàn)光敏劑濃度依賴性。
　?、谝园啄钪榫锬ぷ鳛檠芯繉ο螅捎镁溆嫈?shù)法（CFU/ml）以及激光共聚焦顯微鏡觀察法研究光敏劑TBO在633 nm紅光作用下對白念生物膜的殺傷效果，通過對比光照前后生物膜中的存活菌量發(fā)現(xiàn)，TBO-PDT能對

5、白念生物膜進行有效殺傷，殺傷效果呈現(xiàn)光敏劑濃度依賴性。另外還發(fā)現(xiàn)過高的光敏劑濃度會降低光動力治療白念生物膜的效果。
　?、垡园啄顑煞N形式（浮游菌及生物膜）作為研究對象，采用菌落計數(shù)法（CFU/ml）研究抗真菌藥物伊曲康唑作用后的TBO-PDT對白念的殺傷效果，并與未用伊曲康唑處理的TBO-PDT方法進行對比。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，預(yù)孵育伊曲康唑能有效殺傷白念，且效果比未用伊曲康唑處理的TBO-PDT方法顯著。實驗結(jié)果說明伊曲康唑能增強TBO-

6、PDT治療白念的效果。
　　④首先通過白念生物合成納米銀粒子，然后以白念生物膜為研究對象，采用XTT降低法研究以不同方式作用于TBO-PDT的納米銀粒子的殺傷效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，先進行光動力治療，再用納米銀粒子處理能加強對白念生物膜的治療效果。實驗結(jié)果說明生物合成的納米銀粒子能以一定方式輔助加強TBO-PDT對白念生物膜的治療效果。
　　綜上所述，本研究采用的TBO-PDT對白念的浮游菌形式及生物膜形式的殺傷效果顯著。另外還發(fā)現(xiàn)