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文檔簡介
1、目的:分析HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者血清中miR-122表達(dá)水平與各臨床指標(biāo)的相關(guān)性,進(jìn)一步探討血清中miR-122在HBV-ACLF疾病評估方面的潛在價值。
方法:⑴收集山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院感染病科就診的HBV-ACLF患者血清樣本49例及同期慢性乙型肝炎(CHB)患者血清樣本30例,并通過體檢中心收集同期健康體檢者(HC)的血清樣本30例,分別設(shè)為HBV-ACLF組、CHB組、HC組(正常對照組),并
2、根據(jù)臨床表現(xiàn)的嚴(yán)重程度將HBV-ACLF患者分為早期、中期、晚期3組。⑵使用RNAiso PLUS Total RNA提取試劑提取各血清標(biāo)本中總RNA。通過miRNA RT-PCR試劑盒對所提取的總RNA進(jìn)行目的基因及內(nèi)參基因的反轉(zhuǎn)錄,并進(jìn)一步行實(shí)時熒光定量PCR檢測血清樣本miR-122的相對表達(dá)水平。本實(shí)驗(yàn)以snRNAu6為內(nèi)參,miR-122相對表達(dá)量用2-ΔCT表示。結(jié)果采用SPSS22.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。⑶比較不同組間 miR-
3、122表達(dá)水平的差異并分析HBV-ACLF患者血清中miR-122的表達(dá)與各生化指標(biāo)的相關(guān)性。進(jìn)一步通過非條件Logistic回歸分析miR-122在HBV-ACLF病程進(jìn)展中的作用,從而間接反映miR-122水平與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系。采用受試者工作特征曲線(ROC曲線)分析血清中miR-122在HBV-ACLF診斷評估方面的潛在價值。
結(jié)果:①HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭患者、慢性乙型肝炎患者、健康體檢者患者3組研究對象樣本血清
4、中miR-122的相對表達(dá)量分別為:HBV-ACLF組51.27(29.35-82.73)、CHB組15.35(11.49-22.43)、HC組8.03(5.87-8.88)。與健康體檢者及CHB患者血清中miR-122的表達(dá)水平相比,HBV-ACLF患者血清中miR-122的表達(dá)水平上調(diào)(P<0.001)。HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭患者不同臨床分期樣本血清中miR-122的相對表達(dá)量分別為:早期32.45(17.54-45.73)、中期
5、66.17(47.24-99.46)、晚期85.63(81.01-146.02),在晚期HBV-ACLF患者血清中miR-122的表達(dá)水平較早期及中期上調(diào)明顯(P<0.001、P=0.048)。②HBV-ACLF患者血清miR-122表達(dá)水平的升高,與血清中總膽紅素(TBIL)的表達(dá)水平呈正相關(guān),r=0.508,P<0.001;與PTA呈負(fù)相關(guān),r=-0.797,P<0.001。非條件Logistic回歸分析結(jié)果顯示,對于早期而言,血清
6、中miR-122相對表達(dá)值2-ΔCT每增加一個單位,引起HBV-ACLF進(jìn)展為中期的風(fēng)險增加5.8%(OR95%CI:1.013~1.104),進(jìn)展為晚期的風(fēng)險增加13.0%(OR95%CI:1.034~1.235)。ROC分析顯示,miR-122評價疾病診斷的曲線下面積(AUC)為0.942(95%CI,0.903-0.982),靈敏度:83.7%,特異度:86.7%。
結(jié)論:血清中miR-122的表達(dá)水平可作為評價HBV-
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