葛根芩連湯加味治療急性放射性直腸炎作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　本研究是在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，應(yīng)用葛根芩連湯加味防治急性放射性直腸炎的理論及實(shí)驗(yàn)探討。通過建立大鼠急性放射性腸炎模型，觀察各組大鼠治療前后腸炎癥狀以及治療后直腸組織中超氧化物歧化酶（SuperOxide Dismustase，SOD）、過氧化氫酶（Catalase，CAT）的活性水平及丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量等指標(biāo)的情況，評(píng)估葛根芩連湯加味的療效，并進(jìn)一步闡述葛根芩連湯加味防治急性放射性直腸炎

2、的機(jī)制。
　　方法：
　　6周齡、雄性、體質(zhì)量(250±20)g的Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為四組（15只/組），即空白組（A組）、照射組（B組）、蒙脫石散加地塞米松組（C組）、葛根芩連湯加味組（D組）。空白組不予以照射處理,其余三組麻醉后采用直線加速器單次腹盆腔局部照射，照射劑量為20Gy。照射范圍上界至恥骨聯(lián)合，下界至肛門。照射野面積約3cm×4cm,源皮距100cm,其余部位以厚鉛塊屏蔽。于照射前第7天開始至照射后

3、第21天結(jié)束，空白組、照射組兩組予以生理鹽水灌腸，蒙脫石散加地塞米松組給予蒙脫石散加地塞米松混懸液灌腸，葛根芩連湯加味組給予葛根芩連湯加味灌腸，均隔日1次，共連續(xù)28天。4組均給予正常飲食。照射后第22天將全部大鼠處死，觀察4組大鼠治療前后腸炎癥狀，治療后直腸組織形態(tài)學(xué)改變，并檢測(cè)直腸組織中SOD、CAT的活性水平及MDA的含量。本實(shí)驗(yàn)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS13.0進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA)。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)差（?x

4、±s）形式表示，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)比較采用卡方檢驗(yàn)，組間比較采用t檢驗(yàn)。設(shè)定P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。分析數(shù)據(jù)，依靠統(tǒng)計(jì)學(xué)，結(jié)合臨床，得出結(jié)論。
　　結(jié)果：
　　1.一般狀態(tài)：照射前各組大鼠反應(yīng)靈敏、活動(dòng)頻繁、進(jìn)食量及飲水正常。照射后，受照射的大鼠2天內(nèi)反應(yīng)遲鈍，攝食飲水量減少，甚至拒食水，消瘦明顯，出現(xiàn)稀便，少部分甚至黏液膿血便，照射野脫毛等表現(xiàn)，檢測(cè)大便潛血均先后呈陽(yáng)性。此后照射組大鼠反應(yīng)仍然遲鈍，活動(dòng)頻率較低、進(jìn)食量較前進(jìn)一

5、步減少，并且體重逐漸減輕；蒙脫石散加地塞米松組和葛根芩連湯加味組大鼠的上述癥狀隨著灌腸的次數(shù)而逐漸好轉(zhuǎn)。直至照射后第16天時(shí)，蒙脫石散加地塞米松組和葛根芩連湯加味組大鼠精神反應(yīng)、活動(dòng)頻率、進(jìn)食飲水量均趨于照射前水平，糞便檢測(cè)OB結(jié)果呈弱陽(yáng)性（±）或陰性（-），少數(shù)中等陽(yáng)性（++）。而照射組大鼠精神反應(yīng)、活動(dòng)頻率、進(jìn)食飲水量仍無明顯好轉(zhuǎn)。
　　2.大鼠直腸組織病理形態(tài)學(xué)特征：
　　2.1大體病理：取4組大鼠直腸組織直接進(jìn)行肉眼

6、觀察，發(fā)現(xiàn)空白組大鼠直腸組織黏膜顏色粉紅，未見明顯的充血、水腫、潰瘍點(diǎn)；照射組大鼠直腸組織黏膜顏色暗紅，充血，腫脹明顯，可見較多的大小不等的潰瘍；蒙脫石散加地塞米松組大鼠直腸組織黏膜顏色鮮紅，可見充血、水腫，可見散在的小面積潰瘍點(diǎn)；葛根芩連湯加味組大鼠直腸組織黏膜顏色鮮紅，輕度充血、水腫,血管模糊，可見少數(shù)愈合的潰瘍斑點(diǎn)。
　　2.2顯微鏡病理：在顯微鏡下觀察各組大鼠直腸黏膜組織變化情況，發(fā)現(xiàn)對(duì)照組大鼠直腸黏膜上皮未見明顯水腫及炎

7、性改變，腺體細(xì)胞未見損壞，其結(jié)構(gòu)保持完整；模型組大鼠直腸黏膜上皮仍可見明顯細(xì)胞水腫，腺體上皮細(xì)胞仍有大部分細(xì)胞處于嚴(yán)重受損狀態(tài)，壞死脫落后導(dǎo)致腺體結(jié)構(gòu)不完整，組織損傷病變特征明顯。而西藥組和中藥組鼠直腸黏膜上皮未見明顯的水腫，腺體細(xì)胞大部分修復(fù)，代謝增生活躍，結(jié)構(gòu)基本完整，僅可見黏膜下組織輕度充血和少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象。
　　3.大鼠直腸組織中SOD活性水平：空白組、照射組、蒙脫石散加地塞米松組、葛根芩連湯加味組大鼠直腸組織中的SO

8、D活性水平分別為（3.36±0.72）、（2.62±0.74）、（3.01±0.48）、（3.14±0.61）U/mg。與照射組（僅放射造模）相比，葛根芩連湯加味組、蒙脫石散加地塞米松組SOD活性水平均有明顯升高（t=6.322，4.315；P=0.011，0.023），說明蒙脫石散加地塞米松和葛根芩連湯加味均能有效的抑制放射性腸損傷時(shí)SOD活性的下降，而與空白組相比，葛根芩連湯加味組SOD活性水平無明顯變化（t=24.315；P=0.

9、85），說明經(jīng)過了葛根芩連湯加味的治療，對(duì)腸道組織有保護(hù)作用的SOD在局部腸道粘膜組織中有了較為顯著的改善；
　　4.大鼠直腸組織中CAT活性水平：空白組、照射組、蒙脫石散加地塞米松組、葛根芩連湯加味組大鼠直腸組織中的CAT活性水平分別為（0.28±0.14）、（0.22±0.11）、（0.25±0.13）、（0.27±0.12）U/mg。與照射組（僅放射造模）相比，葛根芩連湯加味組、蒙脫石散加地塞米松組CAT活性水平均有明顯升高

10、（t=4.315，8.271；P=0.012，0.046），說明蒙脫石散加地塞米松和葛根芩連湯加味均能有效的抑制放射性腸損傷時(shí)CAT活性的下降，而與空白組相比，葛根芩連湯加味組CAT活性水平無明顯變化（t=13.774；P=0.73），說明經(jīng)過了葛根芩連湯加味的治療，對(duì)腸道組織有保護(hù)作用的CAT在局部腸道粘膜組織中有了較為顯著的改善；
　　5.大鼠直腸組織中MDA含量：空白組、照射組、蒙脫石散加地塞米松組、葛根芩連湯加味組大鼠直腸

11、組織中的MDA含量分別為（0.21±0.12）、（0.41±0.18）、（0.25±0.14）、（0.22±0.09）nmol/mg。與照射組（僅放射造模）相比，葛根芩連湯加味組、蒙脫石散加地塞米松組MDA含量均有明顯降低（t=3.548，9.591；P=0.000，0.013），說明蒙脫石散加地塞米松和葛根芩連湯加味均能有效的抑制放射性腸損傷時(shí)MDA的產(chǎn)生，而與空白組相比，葛根芩連湯加味組MDA活性水平無明顯變化（t=13.774；P

12、=0.73），說明經(jīng)過了葛根芩連湯加味的治療，腸道組織損傷代表產(chǎn)物MDA在局部腸道粘膜組織中的產(chǎn)生有了較為顯著的改善。
　　結(jié)論：
　　1.葛根芩連湯加味及蒙脫石散加地塞米松治療急性放射性直腸炎模型大鼠均能起到了緩解癥狀，促進(jìn)康復(fù)的作用；
　　2.葛根芩連湯加味及蒙脫石散加地塞米松均能通過提高直腸組織中超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）的活性水平及降低直腸組織中丙二醛（MDA）的含量發(fā)揮防治急性放射性直腸炎