鈣敏感受體對海馬神經(jīng)元細胞缺氧復氧損傷的作用.pdf

1、目的：探討鈣敏感受體(CaSR)在缺氧復氧條件下對海馬神經(jīng)元細胞的作用及其可能的機制。
　　方法：利用原代培養(yǎng)的新生大鼠腦內(nèi)的海馬神經(jīng)元細胞建立缺氧復氧損傷模型，采用隨機數(shù)字表法分成四組，分別為正常對照組、缺氧復氧組（H/R）、激動劑處理（GdCl3）組、拮抗劑處理（NPS-2390）組。在倒置顯微鏡下觀察海馬神經(jīng)元細胞數(shù)量和細胞形態(tài)，同時，利用MTT法檢測神經(jīng)元細胞的存活情況。應用流式細胞儀檢測四個組的神經(jīng)元細胞的凋亡率，應用W

2、estern-blot法檢測神經(jīng)元細胞中CaSR，caspase-3，Bcl-2蛋白表達和細胞色素（Cyt C）釋放，同樣應用Western-blot法檢測ERK和P38蛋白磷酸化水平。
　　結果：與對照組比較，H/R組的細胞數(shù)目顯著減少，與H/R組比較，GdCl3組細胞數(shù)量進一步減少，而鈣敏感受體拮抗劑組的細胞數(shù)目有效增加。與對照組比較，H/R組及激動劑處理（GdCl3）組中神經(jīng)元細胞凋亡率明顯升高，細胞凋亡率在拮抗劑（NPS-

3、2390）組中顯著下降(P<0.05)。與對照組比較，H/R組及激動劑處理（GdCl3）組細胞中caspase-3，BAX蛋白表達上調(diào)和細胞色素（Cyt C）釋放增多，與上兩組比較，拮抗劑（NPS-2390）組caspase-3，BAX蛋白表達減少和細胞色素（CytC）釋放減少(P<0.05)。在四組中，ERK1/2，P38和 pP38的表達沒有顯著差異，但是pERK1/2的表達在H/R組及激動劑處理（GdCl3）組顯著增加，在拮抗劑（