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1、目的:基于定量模式活性關(guān)系分析法快速篩選亞貢葉的抗氧化活性成分及成分群。
方法:⑴采用70%乙醇對(duì)亞貢葉進(jìn)行回流提取得粗提物,以溶液萃取法把粗提取物分離成石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水相提取物4部分。以活性較高的乙酸乙酯提取物為研究對(duì)象,采用正相硅膠色譜柱分離得17個(gè)部位,并建立HPLC-DAD方法對(duì)乙酸乙酯提取物及17個(gè)部位進(jìn)行分析得色譜圖及光譜圖,隨后以DPPH自由基清除試驗(yàn)評(píng)價(jià)各部位抗氧化活性。⑵結(jié)合乙酸
2、乙酯提取物及17個(gè)部位譜圖及抗氧化活性數(shù)據(jù),基于定量模式分析法,結(jié)合模型群體分析、優(yōu)劣比分析法和權(quán)重分析法快速篩選出乙酸乙酯提取物中高抗氧化活性成分及活性成分群,以柱色譜分離制備活性成分及成分群,最后再進(jìn)行活性試驗(yàn)以驗(yàn)證篩選模型的可靠性。
結(jié)果:①乙酸乙酯提取物及17個(gè)部位的DPPH自由基活性清除試驗(yàn)結(jié)果初步顯示5-8號(hào)樣品自由基清除活性最高,5號(hào)樣品明顯高于陽(yáng)性對(duì)照二丁基羥基甲苯(Butylated hydroxytolue
3、ne, BHT)(P<0.05)。②定量模式活性關(guān)系分析預(yù)測(cè)結(jié)果顯示保留時(shí)間為2-12 min、53-64 min部位活性成分群及保留時(shí)間為3、3.6、5.7、7.6、11.7、18.6、20.9 min等化合物為活性成分。以正、反相柱色譜技術(shù)對(duì)活性成分群及活性成分進(jìn)行制備并采用核磁共振技術(shù)分析所得單體結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明得到的化合物分別為Uvedalin、咖啡酸乙酯、咖啡酸甲酯、Enhydrin、高圣蘭酚、3,7-二甲基醚槲皮素、Uveda
4、folin和綠原酸。其中咖啡酸乙酯、咖啡酸甲酯、高圣蘭酚、3,7-二甲基醚槲皮素和綠原酸是模型預(yù)測(cè)的高活性成分,DPPH自由基清除試驗(yàn)活性驗(yàn)證結(jié)果顯示,預(yù)測(cè)的活性化合物活性高于陽(yáng)性對(duì)照BHT、陰性對(duì)照品和活性最高的5號(hào)樣品,證明篩選數(shù)據(jù)可靠?;钚猿煞秩海ūA魰r(shí)間為2-12 min)活性高于其中單體化合物活性,說明組分群中各成分存在協(xié)同作用。
結(jié)論:亞貢葉富含抗氧化活性成分,以定量模式活性關(guān)系分析法篩選所得結(jié)果可靠,該方法有望用
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