脂聯(lián)素對APN---小鼠體內(nèi)巨噬細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目的：
　　研究脂聯(lián)素對脂聯(lián)素基因敲除小鼠（APN-/-小鼠）的體內(nèi)巨噬細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的影響和抗動脈粥樣硬化中可能的作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.模型建立
　　選擇4周齡脂聯(lián)素基因敲除小鼠（Adiponectin-/-gene knock out mice）30只，高脂喂養(yǎng)8個月，建立動脈粥樣硬化模型。
　　2.分組
　　隨機(jī)分為五組：空白對照組，50μg/（kg· d）干預(yù)組，150μg/（kg

2、· d）干預(yù)組，200μg/（kg· d）干預(yù)組，250μg/（kg· d）干預(yù)組。
　　3.方法
　　脂聯(lián)素干預(yù)4周后，向APN-/-小鼠腹腔內(nèi)注射乙?；疞DL與3H‐TC標(biāo)記的RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞懸液,使用酶法測定小鼠血清血脂水平,液閃計數(shù)儀測定小鼠肝臟、血清及糞便中3H‐TC占經(jīng)腹腔注射3H‐TC總量的百分比，使用RT-PCR及Western-blot檢測ABCA1的mRNA及蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：<

3、br>　　1.與對照組相比，脂聯(lián)素干預(yù)組血清TG、TC、LDL水平明顯降低，HDL升高；且隨脂聯(lián)素呈劑量依賴性改變。
　　2.對照組主動脈粥樣硬化病變明顯，光鏡下可見血管壁有大量脂質(zhì)沉積，有粥樣斑塊形成，有散在泡沫細(xì)胞；使用脂聯(lián)素干預(yù)組APN-/-小鼠的主動脈粥樣硬化病變程較輕，隨脂聯(lián)素呈劑量依賴性改變。
　　3.脂聯(lián)素干預(yù)組血清3H‐TC含量明顯降低(P<0.05)，肝臟及糞便中3H‐TC含量明顯升高(P<0.05)。

4、r>　　4.RT-PCR檢測結(jié)果示：與對照組相比，脂聯(lián)素干預(yù)組肝臟組織ABCA1的mRNA轉(zhuǎn)錄水平明顯提高，且隨脂聯(lián)素劑量的增加而增加(P<0.05)，呈劑量依賴性。
　　5.Western-blot結(jié)果示：與對照組相比，使用脂聯(lián)素干預(yù)的實驗組肝臟組織ABCA1的蛋白表達(dá)水平明顯提高，且隨脂聯(lián)素劑量的增加而增加(P<0.05)，呈劑量依賴性。
　　結(jié)論:
　　1.脂聯(lián)素能夠降低血清TC、TG及LDL水平，提高HDL；<