環(huán)氧合酶-2、5-脂氧合酶與大腸腺瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　探討環(huán)氧合酶-2(COX-2)、5-脂氧合酶（5-LOX）與大腸腺瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系及兩者之間是否存在動態(tài)關(guān)系，為大腸腫瘤的靶向治療提供新的理論依據(jù)。
　　方法：
　　選用SD大鼠55只，隨機分為5組，其中干預(yù)組每組10只，分別為DMH+Celecoxib組、DMH+Zileuton組、DMH+Celecoxib+Zileuton組, DMH組15只，對照組10只。DMH+Celecoxib組每周予以二甲基

2、肼（20mg/kg）腹腔注射，同時予COX-2抑制劑（Celecoxib50mg/kg）灌胃，隔日1次；DMH+Zileuton組每周予以DMH（20mg/kg）腹腔注射，同時予5-LOX抑制劑（Zileuton50mg/kg）灌胃，隔日1次；DMH+Celecoxib+Zileuton組每周予以二甲基肼（20mg/kg）腹腔注射，同時予COX-2抑制劑（Celecoxib25mg/kg）+5-LOX抑制劑（Zileuton25mg/k

3、g）聯(lián)合灌胃，隔日1次；DMH組每周單純予以DMH（20mg/kg）腹腔，并予同等量生理鹽水灌胃；對照組每周腹腔注射等量生理鹽水，予同等量生理鹽水灌胃。分別第18周、20周、22周處死老鼠。HE染色了解模型構(gòu)建情況。酶聯(lián)免疫法檢測大腸組織中的PGE2和LTB4濃度，免疫組織化學(xué)法檢測大腸組織中的Ki-67表達(dá)，實時定量PCR檢測大腸組織中的COX-2 mRNA、5-LOX mRNA表達(dá)，并作分析。
　　結(jié)果：
　?。?）實驗

4、組及干預(yù)組大鼠大腸腫瘤成瘤率64.3％,對照組未見大腸腫瘤發(fā)生。
　?。?）RT-PCR檢測的結(jié)果顯示，COX-2/5-LOX mRNA在各組中均有表達(dá)，DMH組、DMH+Celecoxib組、DMH+Zileuton組、DMH+Celecoxib+Zileuton組COX-2/5-LOX mRNA的表達(dá)均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DMH組COX-2/5-LOX mRNA的表達(dá)高于DMH+Celecoxib組、

5、DMH+Zileuton組及DMH+Celecoxib+Zileuton組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DMH+Zileuton組COX-2 mRNA的表達(dá)高于DMH+Celecoxib組及DMH+Celecoxib+Zileuton組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DMH+Celecoxib+Zileuton組COX-2 mRNA的表達(dá)約高于DMH+Celecoxib組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）,DMH+Celeco

6、xib組5-LOX mRNA的表達(dá)高于DMH+Zileuton組及DMH+Celecoxib+Zileuton組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DMH+Zileuton組5-LOX mRNA的表達(dá)約高于DMH+Celecoxib+Zileuton組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　?。?）ELISA法檢測PGE2/LTB4，結(jié)果顯示PGE2/LTB4在各組大腸組織中均有表達(dá)，測不同組大腸組織中PGE2/LTB4的含量，且

7、對其進(jìn)行比較，結(jié)果DMH+Celecoxib組、DMH+Zileuton組、DMH+Celecoxib+Zileuton組、DMH組PGE2/LTB4的含量均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DMH組PGE2/LTB4的含量高于DMH+Celecoxib組、DMH+Zileuton組、DMH+Celecoxib+Zileuton組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DMH+Zileuton組PGE2的含量高于DMH+Cele

8、coxib組及DMH+Celecoxib+Zileuton組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DMH+Celecoxib組PGE2的含量約高于DMH+Celecoxib+Zileuton組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；DMH+Celecoxib組LTB4的含量高于DMH+Zileuton組及DMH+Celecoxib+Zileuton組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DMH+Zileuton組LTB4的含量約高于DMH+C

9、elecoxib+Zileuton組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　（4）免疫組化法檢測Ki-67不同組大腸組織中的均有表達(dá)，Ki-67在對照組、DMH+Celecoxib+Zileuton組、DMH+Celecoxib組、DMH+Zileuton組、DMH組的陽性表達(dá)率分別為16.67%（2/12）、31.3%（5/16）、40.0%（6/15）、50.0%（9/18）、77.78%（35/45），DMH組高于DMH+

10、Celecoxib+Zileuton組、DMH+Celecoxib組、DMH+Zileuton組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.COX-2、5-LOX及其PEG2、LTB4在結(jié)直腸腺瘤-腺癌發(fā)生發(fā)展過程中表達(dá)逐漸增加。
　　2.應(yīng)用COX-2/5-LOX抑制劑，可使COX-2/5-LOX mRNA及代謝產(chǎn)物PGE2/LTB4的減少，抑制結(jié)直腸細(xì)胞增殖，有抑制結(jié)直腸腺瘤-腺癌發(fā)生發(fā)展的趨勢。