耐多藥結(jié)核分枝桿菌中耐利福平表型與基因型的研究.pdf

1、目的：了解耐多藥結(jié)核分枝桿菌中耐利福平表型與基因型的關(guān)系，以及結(jié)核分枝桿菌耐利福平機(jī)制。
　　方法：對(duì)結(jié)核病患者臨床標(biāo)本進(jìn)行抗酸染色涂片、細(xì)菌培養(yǎng)、菌型鑒定及藥敏試驗(yàn)，篩選耐多藥結(jié)核分枝桿菌并獲取其耐藥表型數(shù)據(jù)。提取菌株DNA，分別對(duì)耐利福平相關(guān)基因rpoB、rpoC、rpoA及rpoZ基因編碼區(qū)全長(zhǎng)進(jìn)行PCR擴(kuò)增和測(cè)序，獲得菌株耐藥基因型信息。測(cè)序結(jié)果在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中與結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株H37Rv序列進(jìn)行比對(duì)，并分析結(jié)果。<

2、br>　　結(jié)果：研究的71例耐多藥結(jié)核分枝桿菌菌株中，65例（91.5％）發(fā)生耐利福平相關(guān)的基因突變，包括rpoB、rpoC和rpoA多個(gè)基因的突變，無rpoZ基因突變，6例無上述4個(gè)基因突變。65例突變株均出現(xiàn)rpoB基因突變，其中63例（88.7%）發(fā)生在rpoB基因中利福平耐藥決定區(qū)（RRDR）內(nèi)，以531（54.9%)、526（14.1%）及516（9.9%)位點(diǎn)突變?yōu)橹鳎?例單獨(dú)出現(xiàn)RRDR外基因突變；63例中有7例出現(xiàn)RRD

3、R內(nèi)與RRDR外聯(lián)合突變。65例突變株中，27例（38.0%）發(fā)生rpoC基因突變，3例（4.2%）發(fā)生rpoA基因突變。rpoC及rpoA基因突變的菌株均同時(shí)在rpoB基因發(fā)生突變，即雙基因聯(lián)合突變。本研究共發(fā)現(xiàn)11種結(jié)核分枝桿菌耐利福平相關(guān)基因新型突變，包括7種 rpoB基因突變：CCG126TCG、CTG511CCC、TCG574TAC、TCG663GCG、GGC747GAC和GTG250GCG/GTC251TAC聯(lián)合突變；4種r