結(jié)核分枝桿菌耐利福平rpoB基因突變的分析與檢測.pdf

1、目的：探討結(jié)核分枝桿菌耐藥基因rpoB突變與利福平耐藥性的關(guān)系，利用核酸導流雜交技術(shù)快速檢測rpoB基因突變。方法：收集81例結(jié)核分枝桿菌臨床分離株，PCR擴增rpoB含利福平耐藥決定區(qū)域在內(nèi)的基因片段，對全部81例標本的PCR產(chǎn)物進行測序分析并與利福平藥物敏感試驗結(jié)果進行比較，選取包括20例測序存在突變的標本和11例測序為野生型的標本在內(nèi)的共31例標本進行導流雜交，結(jié)果與測序結(jié)果進行對照，用TA克隆產(chǎn)物做陽性對照。結(jié)果：81例結(jié)核分枝

2、桿菌臨床分離株中，27例耐利福平菌株中20株發(fā)生rpoB基因突變（74.1％），突變位點包括531和526在內(nèi)的7個位點10種突變類型，并發(fā)現(xiàn)新的突變位點和突變形式，目前已被美國GeneBank收錄；54株敏感株中，1株發(fā)生突變（1.9％）。31例標本的導流雜交與測序結(jié)果對比顯示，14株雜交為野生型，測序發(fā)現(xiàn)3株存在突變，17株雜交存在突變，測序結(jié)果與之吻合，敏感度為85％，特異性為100％，陽性預測值為100％，陰性預測值為78.6％