6周跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)聯(lián)合小球藻對(duì)高脂膳食大鼠肝臟脂毒性影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究目的：采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)法，通過對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠Lee’s指數(shù)，血漿FFA、IL-6水平變化，以及肝臟FFA、IL-10含量和Chemerin/CMKLR1-mRNA表達(dá)水平及KCs浸潤(rùn)情況的比較與分析，探討高脂膳食對(duì)大鼠肝細(xì)胞的脂毒性作用以及6周跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)聯(lián)合小球藻對(duì)高脂膳食大鼠肝細(xì)胞的保護(hù)作用。
　　研究方法：健康清潔級(jí)SD大鼠46只，8周齡，體重200g±20g克，實(shí)驗(yàn)前以普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為5組：普通膳食組（N=10，C

2、組）；高脂膳食組（N=10，H組）；高脂膳食運(yùn)動(dòng)組（N=10，HE組）；高脂膳食小球藻組（N=8，HL組）和高脂膳食運(yùn)動(dòng)聯(lián)合補(bǔ)充小球藻組（N=8，HEL組）。C組普通飼料喂養(yǎng)；其余各組高脂飼料喂養(yǎng)；HE、HEL組有氧運(yùn)動(dòng)采用0坡度跑臺(tái)，第一周15m/min，第二周20m/min，以后每周增加1m/min。運(yùn)動(dòng)50min/次，1次/天，6次/周，共6周，運(yùn)動(dòng)時(shí)間：21:00-24:00。HL、HEL組按20mg/kg體重灌胃補(bǔ)充小球藻，其

3、余各組生理鹽水等體積灌胃。灌胃時(shí)間：運(yùn)動(dòng)前半小時(shí)。每周測(cè)試并記錄體重體長(zhǎng)數(shù)據(jù)。第六周末，最后一次運(yùn)動(dòng)后各組禁食12小時(shí)后大鼠尾靜脈取血測(cè)空腹血糖，麻醉下心尖采血分離血漿經(jīng)3000rpm離心30min后取上清液置于凍存管-80℃冰箱中儲(chǔ)存待測(cè)；迅速摘取肝臟，分別放入液氮和福爾馬林液保存待用。ELISA法測(cè)血漿IL-6、FINS、FFA和肝臟勻漿IL-10、FFA水平；PCR技術(shù)檢測(cè)CMKLR1-mRNA表達(dá)水平；Western blot技

4、術(shù)檢測(cè)Chemerin蛋白表達(dá)水平；大鼠肝臟組織切片HE染色觀察KCs浸潤(rùn)情況。運(yùn)用SPSS17.0軟件處理測(cè)試所獲數(shù)據(jù)。
　　研究結(jié)果：1.與C組相比，H組大鼠Lee’s指數(shù)、血漿FFA和IL-6含量、肝臟FFA、IL-10含量顯著升高（P<0.05、P<0.01）、Chemerin/CMKLR-mRNA表達(dá)明顯上調(diào)（P<0.05）。
　　2. H組大鼠肝臟組織HE染色出現(xiàn)彌漫性、小泡樣脂肪變以及庫(kù)普弗細(xì)胞浸潤(rùn)。HOMA-

5、IR有所升高，但無顯著意義（p>0.05）。
　　3. HE、HL、HEL組大鼠血漿FFA含量、HOMA-IR和HL、HEL組大鼠血漿IL-6含量明顯低于H組（p<0.01），有氧運(yùn)動(dòng)、補(bǔ)充小球藻對(duì)血漿FFA和IL-6有顯著的交互作用（p<0.05），即在相同運(yùn)動(dòng)條件下，補(bǔ)充小球藻對(duì)抑制血漿FFA和IL-6含量有顯著作用（p<0.01）；但兩者對(duì)HOMA-IR的影響無交互作用（p>0.05）。
　　4. HE、HL、HEL組

6、大鼠肝臟FFA含量和Chemerin/CMKLR-mRNA表達(dá)水平明顯低于H組（p<0.01）、IL-10含量雖有升高但無顯著性意義（p>0.05）；有氧運(yùn)動(dòng)、補(bǔ)充小球藻對(duì)肝臟FFA和IL-10含量的變化無交互作用（p>0.05）；對(duì)抑制肝臟Chemerin/ CMKLR-mRNA表達(dá)有顯著交互作用（p<0.05），即在同時(shí)補(bǔ)充小球藻情況下，有氧運(yùn)動(dòng)可有效抑制Chemerin/CMKLR-mRNA的上調(diào)表達(dá)（P<0.05）。
　　

7、5.HE、HL、HEL組肝臟組織HE染色，小泡樣脂肪變程度減輕。
　　研究結(jié)論：1.6周高脂膳食大鼠 Lee’s指數(shù)增加，血漿 FFA、IL-6水平以及HOMA-IR呈不同程度的升高，發(fā)生機(jī)體脂毒性、肥胖炎癥反應(yīng)和胰島素抵抗。
　　2.6周高脂膳食導(dǎo)致大鼠肝臟FFA、IL-10濃度升高、肝細(xì)胞脂肪變性、KCs浸潤(rùn)和Chemerin/CMKLR1-mRNA表達(dá)上調(diào)，出現(xiàn)肝臟脂毒性和炎癥反應(yīng)。
　　3.6周有氧運(yùn)動(dòng)、補(bǔ)充小