運動結(jié)合PDTC對高脂膳食誘導的肥胖大鼠肝臟氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白表達的影響.pdf

1、背景和目的：空腹血漿支鏈氨基酸含量增加是胰島素抵抗和2型糖尿病的重要生物標志，但其含量升高的原因機制目前尚不清楚。已有研究表明運動可降低肥胖胰島素抵抗大鼠血漿支鏈氨基酸濃度，而氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白是調(diào)節(jié)血漿氨基酸進出細胞的重要環(huán)節(jié)，了解其對血漿氨基酸濃度是否存在影響，對研究胰島素抵抗和2型糖尿病患者空腹血漿支鏈氨基酸含量升高的原因和機制具有重要意義。肝臟是支鏈氨基酸代謝和轉(zhuǎn)運的重要器官，肝臟氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白變化很可能會影響血漿支鏈氨基酸濃度。有

2、研究證實高脂膳食時易引發(fā)脂肪組織、肝組織等炎癥反應(yīng)，脂肪炎癥與BCAA代謝呈負相關(guān)，既往我們的研究顯示運動會抑制NF-κB信號，減輕肥胖/T2DM時炎癥反應(yīng)，改善胰島素抵抗，了解運動是否有通過下調(diào)炎癥信號改善氨基酸轉(zhuǎn)運和代謝，將為治療高脂飲食導致的一些列疾病提供更多解決思路。本研究擬用高脂膳食誘導的肥胖型胰島素抵抗大鼠作為模型，探討運動結(jié)合NF-κB抑制劑PDTC的方式對其血漿BCAA濃度及肝臟氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白的影響。
　　對象與方

3、法：
　　取體重在100-150g之間的SPF級雄性SD大鼠40只，正常膳食適應(yīng)性喂養(yǎng)1個星期后淘汰體重增長最少的10只，余下的30只大鼠隨機選取6只繼續(xù)正常膳食喂養(yǎng)，作為正常飲食組（簡稱A組），其余24只大鼠進行高脂膳食喂養(yǎng)6周之后，于第7周起進行造模前的適應(yīng)性訓練1周，然后隨機分為4組，每組6只，具體分組方案為：高脂安靜對照組（簡稱H組）、高脂飲食+運動組（簡稱HE組）、高脂飲食+吡咯烷二硫代甲酸銨組（HP組）、高脂飲食+運動

4、+吡咯烷二硫代甲酸銨組（簡稱HEP組）。HE和HEP組進行4周跑臺耐力訓練，每周5次。第10周起對HP和HEP組腹腔注射藥物2周（劑量：80mg/Kg體重）。于第11周末禁食12h后，麻醉后取肝臟組織及腹主動脈血（在5min內(nèi)離心），用于血漿氨基酸分析、熒光PCR定量及蛋白定量等。
　　結(jié)果：
　　1.高脂膳食大鼠血漿支鏈氨基酸水平顯著升高，特別是亮氨酸、異亮氨酸的濃度(P<0.05）；高脂膳食大鼠肝臟氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白SLC3

5、6A1、SLC38A2、SLC3A2、SLC7A5mRNA的表達無明顯影響（P＞0.05）；高脂膳食大鼠肝臟氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白SLC36A1、SLC38A2、SLC38A4、SLC7A5、SLC7A2的含量顯著減少（P＜0.05），SLC1A4的含量顯著增加（P＜0.05）；高脂膳食肝臟胞漿蛋白I-κB的含量顯著減少（P＜0.05），肝臟胞核蛋白P65的含量顯著增加（P＜0.05）。
　　2. HE、HP、HEP組大鼠血漿支鏈氨基酸濃

6、度顯著降低（P＜0.05），HE組下降幅度明顯大于HP和HEP組（P＜0.05）；大鼠肝臟轉(zhuǎn)運蛋白SLC7A5的mRNA表達顯著增加（P＜0.05）。
　　3.相較于H組大鼠肝臟蛋白含量，HE、HP、HEP組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC7A2的含量變化無明顯差異（P＞0.05）；HE、HP、HEP組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC36A1的含量均明顯增加（P＜0.05）；HE組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC7A5的含量明顯增加（P＜0.05），且HP、HEP組的轉(zhuǎn)運蛋白S

7、LC7A5的含量均雖有增加，但增加幅度遠不如HE組（P＞0.05）；HE組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC1A4的明顯減少（P＜0.05），HP、HEP組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC1A4的含量雖有減少，但較少幅度遠不如HE組（P＞0.05）；HE組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC38A2的含量明顯增加（P＜0.05），且HP、HEP組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC38A2的含量均沒有同HE組一樣出現(xiàn)增加，甚至呈現(xiàn)一定程度的減少（P＞0.05）；HP、HEP組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC38A4的含量有明

8、顯增加，（P＜0.05），但HE組的轉(zhuǎn)運蛋白SLC38A4的含量增加并不明顯（P＞0.05）。
　　結(jié)論：（1）高脂膳食誘導的肥胖型胰島素抵抗會增加血漿支鏈氨基酸水平，同時使肝臟SLC36A1、SLC38A2、SLC38A4、SLC7A5、SLC7A2氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白含量降低，但SLC1A4升高；（2）運動和抑制炎癥皆降低高脂膳食誘導的肥胖型胰島素抵抗大鼠增加的血漿支鏈氨基酸水平，但運動同時抑制炎癥卻會阻礙血漿支鏈氨基酸水平的降低；