亞麻酸對(duì)高脂大鼠血脂影響及促進(jìn)肝臟SR-BI表達(dá)機(jī)制研究.pdf

1、背景：α-亞麻酸(α-1inolenicacid，ALA)是n-3系多不飽和脂肪酸，α-亞麻酸為全順式9，12，15—十八碳三烯酸(C，8，3n-3)，是體內(nèi)更長(zhǎng)鏈n-3系不飽和脂肪酸的前體，經(jīng)脫飽和與碳鏈延長(zhǎng)作用生成一系列代謝產(chǎn)物，其中最重要的為二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，目前一般認(rèn)為α-亞麻酸的作用是通過(guò)EPA和DHA的作用而發(fā)揮的。大量流行病和試驗(yàn)表明ALA可通過(guò)調(diào)節(jié)血脂而發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用，如降低血漿

2、甘油三酯和總膽固醇，而對(duì)血漿HDL代謝的研究很少。 本研究以雄性SD大鼠為研究對(duì)象，以含亞麻酸量高達(dá)56.1％的精制芥蘭油為受試物，觀察亞麻酸對(duì)高脂大鼠血脂代謝的影響及探討其調(diào)節(jié)HDL代謝的可能機(jī)制。 第一部分亞麻酸調(diào)節(jié)大鼠血脂及對(duì)機(jī)體氧化損傷作用研究 目的：觀察亞麻酸對(duì)高脂大鼠血脂代謝及對(duì)機(jī)體氧化損傷的影響 方法：將大鼠分為基礎(chǔ)對(duì)照組、高脂對(duì)照組、魚(yú)油組和低、中、高劑量亞麻酸組，在試驗(yàn)期間每周稱大鼠體重

3、。在第6周將大鼠處死，稱量大鼠的肝臟重量。試劑盒測(cè)定大鼠肝臟和血漿中的膽固醇和甘油三酯以及大鼠肝臟和血漿的氧化抗氧化指標(biāo)SOD、MDA、T-AOC、CAT；聚乙二醇20000(PEG20000)沉淀法測(cè)定高密度脂蛋白(HDL)及亞組份膽固醇(HDL2-C，HDL3-C)的組成；脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳觀察HDL微粒的電泳位移；試劑盒測(cè)定大鼠肝臟的AST、ALT水平。 結(jié)果：大鼠體重隨試驗(yàn)的進(jìn)行穩(wěn)定增長(zhǎng)，但各組沒(méi)有顯著性差異；高脂對(duì)照

4、組、魚(yú)油組和低、中、高劑量亞麻酸組肝臟重量和肝體比明顯高于基礎(chǔ)對(duì)照組。高脂對(duì)照組、魚(yú)油組和低、中、高劑量亞麻酸組肝臟膽固醇和甘油三酯明顯高于基礎(chǔ)對(duì)照組，魚(yú)油組和亞麻酸組有使肝臟膽固醇降低的趨勢(shì)；魚(yú)油組和亞麻酸組明顯降低高脂飲食大鼠血漿膽固醇和甘油三酯的含量。基礎(chǔ)飲食、高脂飲食、魚(yú)油以及亞麻酸對(duì)血漿氧化損傷影響沒(méi)有顯著性差異，但是高脂飲食明顯增加肝臟的氧化損傷，降低肝臟的抗氧化水平，魚(yú)油和亞麻酸未對(duì)高脂飲食大鼠肝臟造成額外的損傷。高脂對(duì)照

5、組的HDL含量和HDL3與HDL的比值(HDL3/HDL)明顯低于基礎(chǔ)對(duì)照組，魚(yú)油組和亞麻酸組的HDL含量又低于高脂對(duì)照組，但是HDL3/HDL高于高脂對(duì)照組。亞麻酸使HDL微粒在瓊脂糖凝膠上的電泳位移增加，HDL微粒趨于小型化。魚(yú)油和亞麻酸明顯降低高脂飲食導(dǎo)致的肝臟AST升高。 結(jié)論：亞麻酸對(duì)高脂大鼠的血脂有明顯調(diào)節(jié)作用，明顯降低了高脂大鼠血漿甘油三酯、血漿總膽固醇和HDL-C水平，增加大鼠血漿HDL3/HDL比值，使HDL微

6、粒趨于小型化。亞麻酸不增加高脂大鼠血漿和肝臟的氧化損傷。 第二部分亞麻酸促進(jìn)大鼠肝臟SR-BI表達(dá)機(jī)制研究 目的：探討亞麻酸促進(jìn)大鼠肝臟SR-BI表達(dá)的可能機(jī)制。 方法：將大鼠分為基礎(chǔ)對(duì)照組、高脂對(duì)照組和高脂加低高劑量亞麻酸組、高脂加中劑量亞麻酸組、高脂加高劑量亞麻酸組、高脂加羅格列酮組和基礎(chǔ)飼料加羅格列酮組。6周后，用RT-PCR和Westenblotting檢測(cè)大鼠肝臟PPARγ、SR-BI的mRNA以及蛋白

7、的表達(dá)，用RT-PCR檢測(cè)大鼠肝臟PDZK1和apoAI的表達(dá)。 結(jié)果：1、大鼠肝臟存在PPARγ的表達(dá)。亞麻酸適度增加而羅格列酮明顯增加大鼠肝臟PPARγmRNA和蛋白表達(dá)。2、高脂飲食降低大鼠肝臟SR-BI的轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)，亞麻酸和羅格列酮明顯促進(jìn)大鼠肝臟SR-BImRNA轉(zhuǎn)錄、但是亞麻酸明顯增加大鼠肝臟SR-BI蛋白表達(dá)而羅格列酮僅少量增加SR-BI蛋白的表達(dá)。4.亞麻酸明顯促進(jìn)大鼠肝臟PDZK1mRNA和apoAImRN