黃芩苷對實驗性大鼠牙周炎牙周組織及外周血中BMP-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的:牙周病是口腔的常見病與多發(fā)病，是造成成年人牙齒脫落的主要原因，同時它還是心血管疾病、糖尿病、新生兒早產(chǎn)等疾病的高危因素。牙周病是侵犯牙周組織的慢性進(jìn)行性炎癥，是一種由細(xì)菌感染而引起的破壞性疾病，細(xì)菌、菌斑以及其代謝產(chǎn)物是其主要的致病因素。牙周病的主要特征為牙齦炎癥、牙周附著喪失、牙周袋形成、牙槽骨吸收、牙齒松動甚至脫落等。因此，牙周病治療的關(guān)鍵是消除牙齦炎癥，促進(jìn)已破壞和吸收的牙槽骨再生，恢復(fù)牙齒及牙周組織的正常功能。目前，牙周病

2、的治療方法有很多，臨床上主要以牙周基礎(chǔ)治療為主，同時配合全身或者局部使用抗生素。這種方法雖取得了一定的成效，卻未達(dá)到理想效果，并且長期全身應(yīng)用抗生素可能會造成菌群失調(diào)、產(chǎn)生耐藥性等不良后果。因此，尋求一種既有抗菌、消炎作用，又能促進(jìn)牙周組織再生的藥物是眾多學(xué)者研究的方向。中藥因?qū)θ梭w刺激小、毒副作用小、成本低等特點得到了人們的關(guān)注，國內(nèi)外學(xué)者在中藥應(yīng)用于牙周病治療方面進(jìn)行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)了黃芩苷對牙周致病菌有明顯的的抑制作用，并且可以

3、促進(jìn)成骨細(xì)胞、牙周膜成纖維細(xì)胞(PDLFs)、牙周膜細(xì)胞(PDLCs)等促進(jìn)牙周組織再生的細(xì)胞生長。骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BMP-2）是目前研究認(rèn)為與牙周組織再生密切相關(guān)的一種因子，本實驗通過探討黃芩苷對實驗性牙周炎大鼠牙周組織及外周血中BMP-2表達(dá)的影響，進(jìn)一步研究黃芩苷在牙周炎牙周組織再生中的作用以及對牙周炎的治療機制。
　　方法:取46只SD雄性大鼠，隨機取8只為空白對照組，脂多糖(LPS)局部滴注法建立大鼠牙周炎模型，模型成

4、立后，隨機分為4組，牙周炎模型組、陽性對照組、黃芩苷低濃度組、黃芩苷高濃度組。治療一個月后，分別頸總動脈取各大鼠外周血，然后處死各大鼠，分別取其實驗牙區(qū)骨段并制作牙體牙周組織聯(lián)合切片后，常規(guī)HE染色觀察各組大鼠牙周組織形態(tài)學(xué)改變，免疫組化法檢測大鼠牙周組織中BMP-2的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測各組大鼠血清中BMP-2、骨堿性磷酸酶(BALP)的表達(dá)情況。取實驗部位牙齦組織提取組織蛋白，運用蛋白質(zhì)免疫印跡(WB)的方法檢

5、測BMP-2的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1)臨床表現(xiàn)和病理結(jié)果顯示，與空白對照組相比，牙周炎模型組大鼠出現(xiàn)明顯的牙周組織炎癥癥狀，牙周支持組織破壞嚴(yán)重，用藥干預(yù)后，治療組大鼠牙周組織炎癥明顯減輕，牙周組織成纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞生長活躍，破骨細(xì)胞及骨陷窩減少，修復(fù)再生作用明顯。
　　(2)免疫組化結(jié)果顯示，各組大鼠牙周組織均出現(xiàn)BMP-2陽性表達(dá)，黃芩苷高濃度組與陽性對照組陽性染色最明顯，二者與對照組和模型組相比存在明顯差

6、異，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;黃芩苷低濃度組與模型組相比，陽性染色結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)意義;但其與空白對照組相比差異明顯，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(3) Western blot結(jié)果顯示，黃芩苷高濃度組大鼠牙齦組織中BMP-2含量明顯高于模型組，但與空白對照組之間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義;模型組、辛伐他汀組和黃芩苷低濃度組大鼠牙齦組織中BMP-2表達(dá)量略低于空白對照組，但它們四者之間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(4)酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）結(jié)果顯

7、示，與空白對照組比較，模型組大鼠血清BMP-2、BALP含量顯著升高;與模型組相比，辛伐他汀明顯增高血清中BMP-2的含量，但對BALP的含量的影響與模型組比較沒有顯著性差異;黃芩苷低、高濃度組均可明顯升高血清中BMP-2、BALP含量，但黃芩苷低濃度組與模型組比較沒有顯著差異。
　　結(jié)論:
　　(1)通過齦溝底部滴注內(nèi)毒素脂多糖的方法成功建立實驗性大鼠牙周炎模型
　　(2)黃芩苷能夠增加實驗性大鼠牙周炎牙周組織中BM