BMP-2及bFGF在出生后小鼠牙體牙周組織發(fā)育中表達(dá)的研究.pdf

1、骨形成蛋白-2(bone morphogenic protein-2，BMP-2)屬于轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)超家族，是一種具有高度骨誘導(dǎo)活性的低分子多肽，它主要分布在一些具有成骨傾向的細(xì)胞中，并參與骨組織、牙齒組織的形成。堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblastgrowth factor，bFGF)屬于成纖維細(xì)胞生長因子家族，是一種多功能、作用廣泛的細(xì)胞因

2、子，能廣泛促進(jìn)來源于中胚層及神經(jīng)外胚層細(xì)胞的增殖，是體內(nèi)重要的創(chuàng)傷愈合因子之一，對骨誘導(dǎo)有重要調(diào)節(jié)作用。它們都參與牙齒的發(fā)育，對牙周組織的再生具有重要作用，體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)研究均發(fā)現(xiàn)二者聯(lián)合應(yīng)用有一定的協(xié)同作用，但是從牙齒發(fā)育角度對BMP-2和bFGF表達(dá)的系統(tǒng)研究卻較少。本研究采用生后BALB/c小鼠牙齒發(fā)育實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，利用免疫組化技術(shù)對BMP-2及bFGF在出生后小鼠牙體牙周組織中的表達(dá)進(jìn)行定位，為研究牙齒發(fā)育和及將BMP-2、bFGF應(yīng)

3、用于牙周組織的再生提供相應(yīng)的理論依據(jù)。 目的 (1)建立出生后BALB/c小鼠牙齒發(fā)育動(dòng)物模型。 (2)探討B(tài)MP-2及bFGF在出生后小鼠牙體牙周組織發(fā)育過程中的時(shí)空表達(dá)及意義。 方法： 隔天取出生后第1～27天的BALB/c小鼠，拉頸處死，分離并解剖含下頜第一磨牙區(qū)下頜骨，新鮮配制4％多聚甲醛固定過夜。自出生后第7天的標(biāo)本開始用甲酸-甲酸鈉復(fù)合脫鈣液脫鈣，脫鈣時(shí)間1～28天不等。常規(guī)石蠟切片，

4、蘇木素-伊紅染色，確定小鼠牙齒發(fā)育情況。另外用免疫組化法檢測牙發(fā)育過程中BMP-2和bFGF的表達(dá)。 結(jié)果 (1)出生后小鼠牙發(fā)育：出生后第一天小鼠下頜第一磨牙牙胚處于鐘狀晚期；第5天時(shí)內(nèi)釉上皮和外釉上皮形成的上皮根鞘內(nèi)折，牙根開始發(fā)育；第9天時(shí)根部的牙囊組織開始分化形成牙周組織；第17天時(shí)牙根發(fā)育約一半，牙周膜成纖維細(xì)胞排列具有方向性；第27天時(shí)牙周組織排列方向性明顯，根尖區(qū)有大量的細(xì)胞性牙骨質(zhì)，根尖孔縮窄，牙根的發(fā)育

5、逐漸完成。 (2)BMP-2在出生后小鼠牙體牙周組織發(fā)育中的表達(dá)：牙齒發(fā)育早期，BMP-2的表達(dá)比較廣泛，它不僅在新生的牙槽骨邊緣、成骨細(xì)胞胞漿、骨細(xì)胞陷窩中表達(dá)，也在前期牙本質(zhì)、牙囊細(xì)胞、牙髓細(xì)胞中表達(dá)，并且在前期牙本質(zhì)中表達(dá)較強(qiáng)，但是在成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞中BMP-2的表達(dá)不明顯。隨著牙囊細(xì)胞的分化，BMP-2開始在分化形成的牙周膜細(xì)胞中陽性表達(dá)，并且此時(shí)BMP-2在牙槽骨、牙髓細(xì)胞和牙周膜細(xì)胞中的表達(dá)最強(qiáng)。隨著牙齒的進(jìn)一

6、步發(fā)育，BMP-2在牙槽骨、前期牙本質(zhì)、牙髓中的表達(dá)逐漸減弱直至消失，但在牙周膜中的表達(dá)一直比較明顯。整個(gè)發(fā)育過程中，BMP-2在牙本質(zhì)、無細(xì)胞性牙骨質(zhì)及牙齒發(fā)育后期形成的細(xì)胞性牙骨質(zhì)中都不表達(dá)。 (3)bFGF在出生后小鼠牙體牙周組織發(fā)育中的表達(dá)：bFGF的表達(dá)情況與BMP-2類似，但是在牙周膜和前期牙本質(zhì)中，bFGF的表達(dá)要弱于BMP-2；而在牙髓細(xì)胞中，bFGF的表達(dá)要強(qiáng)于BMP-2。 結(jié)論 (1)BALB

7、/c小鼠下頜第一磨牙在出生后第5天牙周組織開始發(fā)育，27天基本發(fā)育完成。 (2)BMP-2在牙體牙周組織發(fā)育過程中的表達(dá)具有時(shí)空特異性。BMP-2廣泛參與牙齒的發(fā)育，牙齒硬組織的形成、礦化，但是BMP-2在牙齒發(fā)育后期的表達(dá)弱于早期，這表明BMP-2除在牙齒發(fā)育早期具有重要作用外，亦在牙齒發(fā)育后期對牙體牙周組織的發(fā)育，維持牙周組織的功能起必不可少的階段特異性作用，但是其在牙齒發(fā)育早期，對細(xì)胞的分化和硬組織礦化的啟動(dòng)的作用可能更為