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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研宄C57BL/6小鼠形覺(jué)剝奪性近視(form-deprivation myopia,F(xiàn)DM)模型中,視網(wǎng)膜及鞏膜中BMP/TGF-0信號(hào)通路中BMP-2的表達(dá)情況,探討其在正常屈光發(fā)育及FDM形成中的作用。
方法:選取98只21d的C57BL/6小鼠,以隨機(jī)數(shù)字表法,隨機(jī)分為形覺(jué)剝奪組(48只)和同齡對(duì)照組(48只),另取2只正常小鼠用于免疫熒光染色。形覺(jué)剝奪組和同齡對(duì)照組又分別分為FDM7d組、FDM21d、FDM2
2、8d,每組各16只。實(shí)驗(yàn)組用半透明的眼罩縫合在小鼠右眼周圍以建立FDM模型,左眼則作為自身對(duì)照眼,根據(jù)遮蓋時(shí)間7d、21d和28d分別建立不同時(shí)間點(diǎn)動(dòng)物模型,用帶狀光剪影驗(yàn)光和電子游標(biāo)卡尺分別檢測(cè)每組小鼠形覺(jué)剝奪前后屈光度數(shù)的變化和眼軸長(zhǎng)度的改變,免疫熒光觀察正常小鼠視網(wǎng)膜及鞏膜中BMP-2的表達(dá),蘇木素-伊紅(ffi)染色觀察各組小鼠后極部鞏膜組織的形態(tài)變化,造模后,分別于7d、21d和28d取小鼠的視網(wǎng)膜及鞏膜組織,用實(shí)時(shí)熒光定量聚
3、合酶鏈反應(yīng)(QRT-PCR)和免疫組化分別檢測(cè)各組小鼠視網(wǎng)膜和鞏膜中BMP-2 mRNA及其蛋白的變化。
結(jié)果:FDM7d時(shí),實(shí)驗(yàn)眼屈光度和眼軸長(zhǎng)度與自身對(duì)照眼及正常對(duì)照眼相比,無(wú)明顯差異(P>0.05); FDM21d后,與自身對(duì)照眼及正常對(duì)照眼相比,實(shí)驗(yàn)眼誘導(dǎo)出(-4.6?±0.13)D的相對(duì)近視,眼軸延長(zhǎng)了(16±12)ym;隨著剝奪時(shí)間的延長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)眼逐漸向近視方向漂移,F(xiàn)DM28d后,實(shí)驗(yàn)眼誘導(dǎo)出(-7.40D土0.2
4、7)D的相對(duì)近視,同時(shí)眼軸長(zhǎng)度增加了(21±13)ym,與自身對(duì)照組和正常對(duì)照相比較,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(代0.05)。染色觀察鞏膜形態(tài)學(xué)變化,可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)眼鞏膜呈明顯變薄,膠原纖維排列紊亂。免疫熒光結(jié)果顯示BMP-2在視網(wǎng)膜各層均有表達(dá),且主要分布在內(nèi)核層;均勻的分布在鞏膜成纖維細(xì)胞的細(xì)胞膜上;QRT-PCR和免疫組化結(jié)果顯示視網(wǎng)膜和鞏膜中BMP-2 mRNA和蛋白的表達(dá)水平呈明顯下降趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(代0.05)。
結(jié)
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