Smad1在小鼠屈光發(fā)育及形覺剝奪性近視形成中的作用.pdf

1、目的：研究C57BL/6小鼠屈光發(fā)育及形覺剝奪性近視（form-deprivation myopia，FDM）模型中BMP/TGF-β信號通路下游因子Smad1的表達情況，探究Smad1在屈光發(fā)育及形覺剝奪性近視形成過程中的作用及機制。
　　方法：取21日齡實驗小鼠96只，分為實驗組（n=48只）和正常對照組（n=48只）。實驗組右眼采用遮蓋法進行形覺剝奪，左眼自然暴露作為自身對照組，正常對照組雙眼均不予任何處理。實驗組和正常對照

2、組分別以7d、21d、28d建立動物近視模型。在各實驗時間點對各組小鼠分別進行以下檢測：帶狀光檢影測量屈光度；電子游標卡尺測量眼軸長度；蘇木素-伊紅（HE）染色聯合光鏡觀察眼球后壁形態(tài)學變化；免疫熒光染色法及免疫組織化學法檢測眼球后壁Smad1蛋白表達情況；實時熒光定量聚合酶鏈反應（QRT-PCR）檢測眼球后壁中Smad1 mRNA表達情況。
　　結果：
　　（1）形覺剝奪7d時，實驗眼屈光度、眼軸長度與自身對照眼、正常對照

3、眼相比無顯著性差異（P>0.05）；形覺剝奪21d、28d后，實驗眼分別誘導出（-4.65±0.13）D及（-7.40±0.27）D的相對近視，眼軸分別拉長（16±12）um及（21±13）um，與自身對照組及正常對照組相比，差異均具有統計學意義（P均<0.05），且近視漂移程度隨著剝奪時間的延長而加深（P<0.05）；
　　（2）相比自身對照組及正常對照組，眼球后壁形態(tài)學觀察可見形覺剝奪21d、28d時實驗眼視網膜（尤其是內層區(qū)

4、）明顯變薄、細胞結構排列稀疏，鞏膜變薄、膠原纖維排列紊亂；
　　（3）免疫熒光法結果示Smad1表達于鞏膜和視網膜（尤其是內層區(qū)和外核層）；免疫組織化學染色法及QRT-PCR結果顯示，在正常對照組中Smad1的表達并沒有隨著鼠齡的增長而增加，而在形覺剝奪實驗眼中Smad1 mRNA及蛋白表達量較自身對照組及正常對照組均明顯減少，差異具有統計學意義（P<0.05）。自身對照組的上述所有檢測指標與正常對照組相比均無明顯差異（P>0.0