海水浸泡對(duì)淺二度燙傷大鼠創(chuàng)面早期影響及其機(jī)制的初步探討.pdf

1、目的：
　　近年來(lái)隨著我國(guó)對(duì)海洋開(kāi)發(fā)的不斷深入，隨著社會(huì)發(fā)展，海洋活動(dòng)日益頻繁，海事人員在受到各種外傷后傷口容易受到海水污染，會(huì)對(duì)全身造成影響，還有可能影響傷口的修復(fù)。由于受傷環(huán)境限制，患者很難得到較為及時(shí)、正確的救治。燒傷合并海水浸泡對(duì)傷情的影響也越來(lái)越受?chē)?guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)注，但迄今為止有關(guān)海水浸泡對(duì)淺二度燒傷患者的傷情影響及其處理措施的研究鮮有報(bào)道。本研究以5％TBSA淺Ⅱ度燙傷大鼠作為模型，分別從創(chuàng)面組織病理?yè)p害特點(diǎn)、創(chuàng)面組織及血

2、清TNF-α、SOD、MDA含量變化等幾方面探討海水浸泡對(duì)淺二度燙傷大鼠的傷情影響及可能的作用機(jī)制，并探討相關(guān)局部治療，為海上燒、創(chuàng)傷救治提供理論參考依據(jù)。
　　方法：
　　1、實(shí)驗(yàn)分組:SPF級(jí)Wistar大鼠70只，體重為180～220g，雄性，隨機(jī)分為健康對(duì)照組(n=7)、單純燙傷組(n=21)、燙傷+淡水浸泡組(n=21)、燙傷+海水浸泡組(n=21);
　　2、致傷方法:實(shí)驗(yàn)時(shí)0.3％戊巴比妥鈉(1ml/10

3、0g)腹腔注射將大鼠麻醉后，使用電動(dòng)剃毛機(jī)去除大鼠背部體毛;除健康對(duì)照組組外，將其余各組動(dòng)物四肢固定，將已脫毛區(qū)域置于70℃恒溫水浴中12s，造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物5％TBSA淺Ⅱ度燙傷（已經(jīng)病理證實(shí)），致傷后再將淡水及海水浸泡組動(dòng)物背部創(chuàng)面皮膚浸泡于海水中，浸泡時(shí)間分別為2h、4h和6h。
　　3、檢測(cè)指標(biāo)及方法:浸泡后2、4、6h切取創(chuàng)面組織做電子顯微鏡及光學(xué)顯微鏡鏡病理學(xué)觀察;取材的同時(shí)于眶靜脈叢采血待測(cè)，血液行肝素抗凝處理后，立刻提

4、取血清;切取創(chuàng)面皮膚組織樣本，進(jìn)行組織勻漿處理，提取上清液;用ELISA法測(cè)定TNF-α含量，用TBA法測(cè)定MDA含量;用羥胺法測(cè)定SOD含量;
　　4、數(shù)據(jù)處理:數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示（X±s），采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件析因方差分析、單因素方差分析及LSD、Tamhane、Welch、Brown-Forsythe(B)檢驗(yàn)比較各組內(nèi)差異（軟件自動(dòng)略去該統(tǒng)計(jì)量值），P＜0.05為顯著性差異。
　　結(jié)果：
　　1、創(chuàng)

5、面組織病理形態(tài)學(xué)觀察:健康對(duì)照組鏡下表皮細(xì)胞排列整齊、連續(xù)。上皮細(xì)胞著色良好。真皮層組織及附屬結(jié)構(gòu)清晰完整，真皮膠原排列整齊。單純燙傷組鏡下可見(jiàn)表皮層次尚清楚，細(xì)胞出現(xiàn)腫脹，層次結(jié)構(gòu)尚清楚，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)不清。表皮內(nèi)有水皰形成，真皮出現(xiàn)水腫、間質(zhì)疏松，血管擴(kuò)張充血，符合淺二度燙傷病理表現(xiàn)。淡水浸泡組、海水浸泡組動(dòng)物創(chuàng)面表皮層次減少，部分表皮細(xì)胞核結(jié)構(gòu)不清，并有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，真皮附件水腫，微血管擴(kuò)張充血，且隨著浸泡時(shí)間增長(zhǎng)而加重。

6、　　2、電子顯微鏡下創(chuàng)面形態(tài)學(xué)改變:正常對(duì)照組鏡下角質(zhì)層排列整齊、連續(xù)，真皮毛細(xì)血管基膜完整，腔內(nèi)絨毛、內(nèi)皮細(xì)胞邊緣清晰，形態(tài)飽滿，內(nèi)皮細(xì)胞間的連接以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn);單純燙傷組鏡下角質(zhì)層排列紊亂，細(xì)胞邊界不清，真皮毛細(xì)血管基膜基本完整，腔內(nèi)有紅細(xì)胞堆積，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，間隙增大，胞質(zhì)松散;淡水浸泡組鏡下角質(zhì)層排列較規(guī)整，毛細(xì)血管基膜可見(jiàn)，血管腔中可見(jiàn)紅細(xì)胞堆積，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，細(xì)胞器未見(jiàn)明顯異常;海水浸泡組鏡下可見(jiàn)，角質(zhì)層排列雜亂無(wú)章，

7、核固縮，部分細(xì)胞器消失，毛細(xì)血管基膜消失，可見(jiàn)紅細(xì)胞外溢，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、胞質(zhì)松散，胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡樣物，失去完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)，部分細(xì)胞皺縮，部分細(xì)胞已有脫落，形成空洞;
　　3、創(chuàng)面TNF-α，SOD，丙二醛含量:與健康對(duì)照組（63±25）pg/ml比較，單純燙傷組、燙傷+海水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織TNF-α含量在傷后2、4、6h分別為（496±89，263±39，108±19）（1373±15，1742±12，2136±44）pg/mg，

8、明顯增高（P＜0.05或P＜0.01）;燙傷+淡水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織TNF-α含量在傷后2h為（276±46）pg/mg明顯增高(P＜0.01)，在傷后4、6h無(wú)明顯變化(P值均大于0.05)。
　　與健康對(duì)照組（46±6）U/mg比較，單純燙傷組、燙傷+淡水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織SOD含量在傷后2、4、6h分別為（304±27，259±31，152±14）（258±22，215±15，78±19）U/mg均增高（P＜0.05或P＜0

9、.01）;燙傷+海水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織SOD含量在傷后2、4h分別為（279±28，176±10）U/mg均增高（P值均小于0.01），在傷后6h無(wú)明顯變化（P值大于0.05）。
　　單純燙傷組、燙傷+淡水浸泡、燙傷+海水浸泡組大鼠創(chuàng)面組織丙二醛含量在傷后2、4、6h分別為（10.9±1.2，14.1±1.5，31.4±2.4）（15.1±1.6，23.9±1.7，41.7±5.4）（19.5±2.3，28.2±3.2，48.±6

10、.9）nmol/mg，明顯高于健康對(duì)照組（6.3±0.8）nmol/mg(P值均小于0.01)。
　　4、血清TNF-α，SOD，丙二醛含量:與健康對(duì)照組（247±27）pg/ml比較，單純燙傷組大鼠血清TNF-α含量在傷后2、4h分別為（675±122，367±54）pg/ml明顯增高(P＜0.05或P＜0.01)，在傷后6h為（147±27）pg/ml明顯下降(P＜0.01);燙傷+淡水浸泡組大鼠血清TNF-α含量在傷后2、4

11、h無(wú)明顯變化(P值均大于0.05)，在傷后6h為（90±24）pg/ml明顯下降(P＜0.01);燙傷+海水浸泡組大鼠血清TNF-α含量在傷后2、4、6h分別為（1646±58，2086±114，2951±58）pg/ml明顯增高（P值均小于0.01）。
　　與健康對(duì)照組（364±123）U/ml比較，單純燙傷組大鼠血清SOD含量在傷后2、4h分別為（489±13，447±14）U/ml明顯增高（P值均小于0.05），在傷后6h無(wú)

12、明顯變化(P＞0.05);燙傷+淡水浸泡組大鼠血清SOD含量傷后2、4h無(wú)明顯變化（P值均大于0.05），在傷后6h為（282±13）U/ml明顯降低（P＜0.05);燙傷+海水浸泡組大鼠血清SOD含量在傷后2h（461±23）U/ml明顯增高（P＜0.05），在傷后4、6h(226±8，205±10)U/ml明顯下降(P值均小于0.01)。
　　與健康對(duì)照組（5.4±1.5）nmol/mL比較，單純燙傷組、燙傷+淡水浸泡組、燙傷

13、+海水浸泡組大鼠血清丙二醛含量在傷后2、4、6h（14.2±1.2，18.2±1.1，39.1±2.7）（18.8±1.2，29.9±1.1，52.6±3.9）（19.1±1.5，35±3.3，55.4±9.8）nmol/mL均明顯增高（P值均小于0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、海水浸泡會(huì)加重淺二度燙傷創(chuàng)面炎癥反應(yīng)，從而加深創(chuàng)面損傷。其機(jī)制可能為海水高滲、堿性狀態(tài)直接導(dǎo)致機(jī)體組織細(xì)胞脫水、變性壞死，還有海水低溫強(qiáng)散熱的特點(diǎn)

14、，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體體溫的急劇下降而引起血流動(dòng)力學(xué)紊亂，從而加深創(chuàng)面損傷程度，使更多的間生態(tài)組織轉(zhuǎn)變?yōu)閴乃澜M織，而壞死組織的增多則會(huì)加劇炎癥因子的分泌，進(jìn)一步加劇機(jī)體全身及創(chuàng)面組織損傷。
　　2、海水浸泡會(huì)加重淺二度燙傷創(chuàng)面炎癥反應(yīng)創(chuàng)面的氧自由基損傷。其機(jī)制可能為海水低溫強(qiáng)散熱的特點(diǎn)直接導(dǎo)致機(jī)體微循環(huán)障礙，加重能量代謝紊亂，氧自由基生成增加，過(guò)氧化脂質(zhì)反應(yīng)增強(qiáng)。
　　3、大鼠燙傷后合并海水浸泡其炎癥反應(yīng)及氧自由基損傷加重程度與海水浸