Exendin-4對嚴重燙傷大鼠早期胰腺損傷的影響與機制研究.pdf

1、目的:燒傷后容易發(fā)生以“高糖血癥”為表現的糖代謝障礙，容易引起不良預后。研究表明，燒傷后糖代謝障礙與胰腺損傷密切相關。Exendin-4是一種GLP-1受體激動劑，并具有高糖依賴的胰島素促泌作用，且不會導致低血糖。近年來研究報道Exendin-4能抑制氧化應激、炎癥和凋亡，而目前Exendin-4保護嚴重燒傷后胰腺損傷的機制尚缺乏研究。因此，本研究擬探討Exendin-4對嚴重燙傷大鼠早期胰腺損傷的影響與機制。
　　方法:成年健康

2、Wistar大鼠96只，隨機分為假燙組、假燙給藥組、燙傷組和燙傷給藥組，每組24只。燙傷組和燙傷給藥組大鼠背部浸于94℃熱水12秒，腹部6秒，制備50％TBSAⅢ°燙傷模型，假燙組和假燙給藥組使用37℃溫水，其余處理相同。燙傷給藥組和假燙給藥組傷后立即于皮下注射Exendin-4(4ug/kg)，并于傷后每天8:00和20:00分別給藥一次，其它組大鼠同時以相同方式給予相同劑量的滅菌注射用水。傷后1d、3d和5d，剪尾法采血檢測各組大鼠

3、空腹血糖濃度;放射免疫法檢測血清胰島素濃度;干濕質量法計算胰腺組織含水量;HE染色觀察胰腺形態(tài)變化;硫代巴比妥酸法檢測胰腺組織丙二醛(MDA)含量;免疫組織化學法分析胰腺誘導性一氧化氮合酶(iNOS)表達水平;免疫印跡法分析胰腺組織3-硝基硝基絡氨酸(3-NT)、B細胞淋巴瘤-2相關X蛋白(Bax)蛋白、活化部分半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)表達水平。
　　結果:假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時相點空

4、腹血糖濃度均無明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后1d、3d和5d空腹血糖濃度顯著高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后1d和3d空腹血糖濃度顯著低于燙傷組;燙傷給藥組大鼠傷后1d空腹血糖濃度顯著高于假燙組和假燙給藥組。假燙組和假燙給藥組大鼠各時相點空腹血清胰島素濃度均無明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后各時相點空腹血清胰島素濃度均顯著高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后各時相點空腹血清胰島素濃度均顯著高于燙傷組。假燙組和假燙給藥組大鼠

5、傷后各時相點胰腺組織含水量均無明顯升高或降低;燙傷組和燙傷給藥組大鼠傷后1d胰腺組織含水量顯著高于假燙組和假燙給藥組;與燙傷組比較，燙傷給藥組大鼠胰腺組織含水量無明顯升高或降低。HE染色結果顯示，假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時相點胰島形態(tài)規(guī)則，β細胞數量豐富，分布均勻，排列緊密，胞漿濃染，偶見空泡樣改變;燙傷組大鼠傷后1d即出現胰島空泡樣變和β細胞數量減少，傷后3d胰島內出現廣泛空泡樣變，β細胞數量顯著減少，傷后5d胰島空泡樣變輕于傷后

6、3d，β細胞數量多于傷后3d;燙傷給藥組大鼠傷后各時相點胰島空泡樣變均輕于燙傷組，β細胞數量均多于燙傷組。假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時相點胰腺組織丙二醛(MDA)含量均無明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后各時相點胰腺組織丙二醛(MDA)含量均顯著高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后1d和3d胰腺組織丙二醛(MDA)含量均顯著高于假燙組和假燙給藥組;與燙傷組比較，燙傷給藥組大鼠傷后5d胰腺組織丙二醛(MDA)含量低于燙傷組。免疫組化結

7、果顯示，假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時相點胰島誘導型一氧化氮合酶(iNOS)表達水平均無明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后各時相點胰島誘導型一氧化氮合酶(iNOS)表達水平均高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后各時相點胰島誘導型一氧化氮合酶(iNOS)表達水平均低于燙傷組，高于假燙組和假燙給藥組。Western Blot結果顯示，假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時相點胰腺組織3-硝基酪氨酸(3-NT)蛋白水平表達水平均無明顯升高或降低;傷

8、后3d和5d，燙傷組大鼠胰腺組織3-NT蛋白表達水平顯著高于假燙組和假燙給藥組;傷后3d和5d,燙傷給藥組大鼠胰腺組織3-NT蛋白表達水平顯著低于燙傷組，顯著高于假燙組和假燙給藥組。Western Blot結果顯示，假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時相點胰腺組織Bcl-2相關X(Bax)蛋白表達水平均無明顯升高或降低;傷后3d和5d，燙傷組大鼠胰腺組織Bax蛋白表達水平顯著高于假燙組和假燙給藥組;傷后3d和5d，燙傷給藥組大鼠胰腺組織Bax

9、蛋白表達水平低于燙傷組，顯著高于假燙組和假燙給藥組。Western Blot結果顯示，假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時相點胰腺組織Cleaved caspase-3蛋白表達水平比值均無明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后各時相點胰腺組織Cleaved caspase-3蛋白表達水平顯著高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后各時相點胰腺組織Cleaved caspase-3蛋白表達水平低于燙傷組，高于假燙組和假燙給藥組。
　　結論:皮下