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文檔簡介
1、目的:觀察exendin-4類似物(Exendin-4 analogue,E4a)對鏈脲佐菌素(STZ)造模大鼠的血糖和視網膜形態(tài)學、功能學的影響。探討Exendin-4類似物參與糖尿病大鼠視網膜病變(Diabetic Retinopathy,DR)的保護作用的相關機理。
方法:1.建立糖尿病大鼠模型,皮下及玻璃體腔注射exendin-4類似物,化學法觀察其對大鼠血糖的影響及對視網膜形態(tài)學的影響。反轉錄聚合酶鏈式反應(Re
2、verse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)、蛋白免疫印跡(Western immunoblotting,wB)、免疫組織化學法(Immunohistochemistry,IHC)觀察糖尿病大鼠視網膜及其他組織胰升糖素樣肽-1受體(Glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)的表達情況。2.觀察皮下注射exendin-4類似物對糖尿病大鼠視
3、網膜厚度、細胞計數(shù)、視網膜電圖(Electroretinogram,ERG)的影響。3.觀察玻璃體腔內注射exendin-4類似物對糖尿病性大鼠視網膜厚度、細胞計數(shù)、視網膜電圖的影響。4.觀察玻璃體腔內注射E4a后視網膜谷氨酸含量的變化;免疫組化、蛋白免疫印跡、反轉錄聚合酶鏈式反應觀察糖尿病大鼠視網膜谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、谷氨酸轉運蛋白(glutamine-aspartate transpor
4、ters,GIAST)的表達情況;高糖培養(yǎng)視網膜Müller細胞株,觀察其谷氨酰胺合成酶、谷氨酸轉運體的表達情況。
結果:1,皮下注射Exendin-4類似物0.05 μg/g Bw/day能取得較好的降血糖效果,玻璃體腔內注射Exendin-4類似物0.1 μg對糖尿病引起的視網膜形態(tài)學改變的保護最明顯。糖尿病大鼠視網膜及其他組織如肝、睪丸等在RNA及蛋白水平均有GLP-1R的表達。2.糖尿病可致大鼠視網膜厚度減小,各層
5、細胞數(shù)減少、視網膜電圖的振幅降低,而皮下注射E4a可使其受病變影響的程度顯著減小。3.玻璃體腔內注射E4a可使糖尿病所致的視網膜變薄、細胞數(shù)減少、視網膜電圖振幅降低明顯改善;4.玻璃體腔內注射E4a后視網膜內谷氨酸含量明顯降低;糖尿病大鼠視網膜均有GLP-1R、GIAST的表達,E4a可使其表達上調;高糖培養(yǎng)的Muller細胞株上GLP-1R、GLAST表達減弱,E4a可使其表達上調。
結論:1.皮下注射E4a可使糖尿病大
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