嚴(yán)重燙傷早期大鼠血腦屏障損害及其機(jī)制的探討.pdf

1、腦水腫是引起嚴(yán)重?zé)齻颊咚劳龅闹饕?，但腦水腫癥狀往往被其它并發(fā)癥掩蓋，容易被醫(yī)生忽視。過(guò)去的研究表明：嚴(yán)重?zé)齻竽X水腫的形成與血腦屏障損害是密切相關(guān)的，其發(fā)生率與燒傷的嚴(yán)重程度成正比。但燒傷后血腦屏障損害及腦水腫形成的機(jī)制尚不完全明了。本研究目的是探討嚴(yán)重燙傷對(duì)大鼠血腦屏障的損害及其調(diào)控機(jī)制；為如何防治腦水腫的形成，減少患者死亡率提供新的思路。 方法與內(nèi)容： 第一部分研究嚴(yán)重燙傷大鼠血腦屏障的結(jié)構(gòu)損害與腦水腫之間的關(guān)

2、系，用透射電鏡觀察大鼠腦組織內(nèi)神經(jīng)元、突觸及血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的改變。 第二部分用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)各組大鼠腦組織內(nèi)伊文氏藍(lán)(Evansblue,EB)的含量、測(cè)量腦組織的腦百分含水量，探討嚴(yán)重燙傷對(duì)大鼠血腦屏障通透性的損傷，用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)及Western免疫印跡(Western-blot)檢測(cè)嚴(yán)重燙傷大鼠腦內(nèi)ZO-1基因及蛋白的表達(dá)變化。探討嚴(yán)重燙傷引起血腦屏障損傷的分子機(jī)制。 第三部分用

3、免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)嚴(yán)重燙傷大鼠模型腦內(nèi)明膠酶B(MMP-9)及膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)變化，探討MMP-9及GFAP與嚴(yán)重燙傷后血腦屏障損傷之間的關(guān)系。 第四部分觀察運(yùn)用一氧化氮合酶抑制劑L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)、鈣通道阻滯劑尼莫地平(Nimodipine)對(duì)燙傷大鼠血腦屏障(BBB)的保護(hù)作用。為臨床上防治嚴(yán)重燙傷對(duì)血腦屏障損害及腦水腫的形成提供新的思路。 結(jié)果：嚴(yán)重燙傷大鼠腦內(nèi)EB含量、腦百分

4、含水量明顯增高，MMP-9及GFAP陽(yáng)性表達(dá)升高，ZO-1mRNA及蛋白表達(dá)下降，具有顯著差異。電鏡顯示：燙傷以后腦毛細(xì)血管周?chē)霈F(xiàn)空泡化，內(nèi)皮腫脹，基底膜厚薄不均，星形膠質(zhì)細(xì)胞足突空泡化。突觸數(shù)量及突觸小泡減少，突觸間隙增寬。用L-NAME及尼莫地平治療后，腦EB含量及百分含水量與假燙組比較明顯下降，ZO-1mRNA表達(dá)升高。經(jīng)L-NAME治療后顯示MMP-9表達(dá)恢復(fù)至正常水平，腦毛細(xì)胞血管的超微結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)到正常。 結(jié)論：

5、 ①嚴(yán)重燙傷后大鼠血腦屏障通透性增高與血腦屏障的超微結(jié)構(gòu)變化，突觸結(jié)構(gòu)異常有關(guān)。 ②嚴(yán)重燙傷后大鼠血腦屏障的通透性增高與腦內(nèi)MMP-9及GFAP表達(dá)升高及ZO-1mRNA及蛋白的表達(dá)下降有關(guān)，提示MMP-9、GFAP在嚴(yán)重燙傷對(duì)血腦屏障的損害及腦水腫的形成中起著重要的作用。 ③早期應(yīng)用L-NAME能明顯減輕燙傷對(duì)腦BBB的損傷，可能是與L-NAME能抑制MMP-9的表達(dá)，防止ZO-1mRNA表達(dá)水平降低有關(guān)。