萊菔承氣湯對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠腸粘膜屏障保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:觀察大鼠嚴(yán)重燙傷后應(yīng)用中藥萊菔承氣湯對(duì)腸粘膜屏障保護(hù)作用的影響,為臨床應(yīng)用中藥萊菔承氣湯輔助預(yù)防和治療嚴(yán)重?zé)齻颊卟l(fā)癥提供依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.共36只wistar大鼠,隨機(jī)選擇30只作為處理組,給每只大鼠腹腔內(nèi)注射10％水合氯醛(40mg/kg)麻醉后,背部用4％硫化鈉脫毛,第2天在清醒狀態(tài)下,將背部脫毛區(qū)置于98℃水中13秒,造成背部30％TBSAⅢ度燙傷(8×4.5cm2)(經(jīng)病理切片證實(shí))創(chuàng)面,

2、然后再隨機(jī)分成兩組(燙傷治療組和燙傷對(duì)照組),每組各15只,燙傷治療組給予中藥萊菔承氣湯2ml/100g體重,每天早晚各一次灌胃,連續(xù)灌三天,燙傷對(duì)照組給予同量的蒸餾水灌胃。剩余的6只不燙傷,給予正常飲食,作為空白對(duì)照組。
　　 2.傷后72h無(wú)菌心臟穿刺采血,進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)；處死動(dòng)物,收集腹腔沖洗液接種于LB瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)；無(wú)菌分離肝、脾、腸系膜淋巴結(jié),制成勻漿,稀釋后接種于LB瓊脂培養(yǎng)基,置C02孵箱、37℃做需

3、氧細(xì)菌培養(yǎng),48 h后計(jì)算菌落數(shù),計(jì)算每克組織內(nèi)細(xì)菌菌落形成單位(CEU)及其標(biāo)準(zhǔn)差；將腸系膜淋巴結(jié)、肝、脾組織勻漿液培養(yǎng)獲得的菌落,用自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀Auto24(美國(guó)DADE公司)及配套的NC21鑒定板進(jìn)行菌種鑒定。取空腸常規(guī)制石蠟切片,HE染色,觀察腸黏膜組織的病理變化。
　　 3.采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,所有計(jì)量資料數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)士s)表示。計(jì)量資料均數(shù)間比較采用單因素方差分析,治療前后比較

4、采用配對(duì)t檢驗(yàn)(Paired samples Test)。
　　 結(jié)果:
　　 1.大鼠的精神、飲食及排便等情況燙傷治療組和燙傷對(duì)照組大鼠與空白對(duì)照組相比明顯精神萎靡,反應(yīng)遲鈍,懶動(dòng),豎毛,呼吸急促,拒食等,傷后早期大多數(shù)排便量及次數(shù)明顯減少；給予中藥治療后精神狀況有所改善,籠內(nèi)活動(dòng)增加,排便次數(shù)及量增多,便質(zhì)稀??；燙傷對(duì)照組精神狀況及排便改善不明顯。
　　 2.血漿內(nèi)毒素含量燙傷治療組(4126.4±319.7

5、)明顯低于燙傷對(duì)照組,燙傷治療組略高于空白對(duì)照組(1062.3±113.4),均數(shù)差別無(wú)顯著性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而燙傷對(duì)照組(6724.9±541.2)明顯高于空白對(duì)照組。
　　 3.腸道細(xì)菌移位情況除空白對(duì)照組外,燙傷治療組和燙傷對(duì)照組內(nèi)臟組織細(xì)菌培養(yǎng)均有菌落形成,燙傷治療組內(nèi)臟組織細(xì)菌移位量(腸系膜淋巴結(jié)217±14.7、肝臟67±9.3、脾臟100±10.3)明顯低于燙傷對(duì)照組(腸系膜淋巴結(jié)850±107.8、肝臟150±1

6、2.5、脾臟285±18.5),燙傷治療組內(nèi)臟組織細(xì)菌移位量略高于空白對(duì)照組。
　　 4.各組小腸組織學(xué)觀察結(jié)果燙傷治療組可見(jiàn)小腸腺輕度擴(kuò)大,燙傷對(duì)照組大鼠小腸絨毛上皮松散、脫落,小腸腺腔擴(kuò)大,淋巴細(xì)胞侵蝕小腸腺,并向黏膜下層至肌層浸潤(rùn),空白對(duì)照組未見(jiàn)異常。
　　 5.大鼠腸組織超微結(jié)構(gòu)變化的影響正常組大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞微絨毛排列整齊、規(guī)則且緊密,細(xì)胞內(nèi)線粒體豐富,結(jié)構(gòu)清晰,脊清楚,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)正常,細(xì)胞間隙及橋粒清楚；

7、燙傷對(duì)照組大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯改變,微絨毛排列相對(duì)稀疏,并有散在脫落呈倒置狀,上皮細(xì)胞內(nèi)線粒體結(jié)構(gòu)模糊,脊消失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張明顯,部分內(nèi)質(zhì)網(wǎng)甚至呈囊泡狀,細(xì)胞間隙及橋粒結(jié)構(gòu)尚不清楚:燙傷治療組大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)較對(duì)照組明顯見(jiàn)好,微絨毛排列基本規(guī)則、緊密、整齊,但大多數(shù)線粒體結(jié)構(gòu)仍模糊,見(jiàn)部分內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張,細(xì)胞『日J(rèn)隙及橋粒結(jié)構(gòu)基本清楚。
　　 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)早期給予嚴(yán)重燙傷wistar大鼠中藥萊菔承氣湯

8、灌胃治療,研究其對(duì)大鼠腸粘膜屏障功能的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠嚴(yán)重燙傷后早期給予萊菔承氣湯治療,大鼠的精神、飲食及排便等情況明顯好轉(zhuǎn),籠內(nèi)活動(dòng)增加,排便次數(shù)及量增多,便質(zhì)稀?。谎獫{內(nèi)毒素含量明顯低于燙傷對(duì)照組；腸道細(xì)菌移位量亦低于燙傷對(duì)照組:病理學(xué)顯示小腸腸腔輕度擴(kuò)大,小腸黏膜上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)較對(duì)照組明顯見(jiàn)好,微絨毛排列基本規(guī)則、緊密、整齊,線粒體結(jié)構(gòu)模糊,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張,細(xì)胞間隙及橋粒結(jié)構(gòu)基本清楚。綜上所述,中藥萊菔承氣湯具有保護(hù)燙傷大鼠腸