200mmol-L高滲鈉鹽復(fù)蘇液對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠腸損傷影響的分子機(jī)制.pdf

1、一.研究目的：
　　本研究通過觀察200mmol/L高滲鈉鹽液(HS)和乳酸鈉林格液(LR)對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠液體復(fù)蘇的效果,從炎癥因子,氧化損傷,信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通道等方面闡述200mmol/L高滲鈉鹽液(HS)對(duì)大鼠嚴(yán)重燙傷后腸損傷影響的分子機(jī)制。
　　二.研究方法：
　　于安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心預(yù)先購置56只雌性SD大鼠,體重在200-250g。將購買的大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周,實(shí)驗(yàn)前將其隨機(jī)分成三組:對(duì)照組(8只)、LR組(2

2、4只)、HS組(24只)。所有大鼠使用尾靜脈置管,去除所有大鼠背部毛發(fā),假燙傷組大鼠不予燙傷,LR組與HS組給予大鼠背部燙傷。燙傷組分別使用LR復(fù)蘇和HS復(fù)蘇。LR組和HS組大鼠均在傷后2小時(shí)、8小時(shí)和24小時(shí)處死取血以及腸組織。
　　第一部分:200mmol/L高滲鈉鹽復(fù)蘇液對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠血鈉,腸道水腫以及炎性因子表達(dá)的影響分別稱取三組大鼠腸組織干重與濕重并測(cè)量血漿鈉濃度、計(jì)算腸含水量,使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)量血漿中

3、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)以及高遷移率蛋白B1(HMGB1)。將取得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　第二部分:200mmol/L高滲鈉鹽復(fù)蘇液對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠腸道氧化損傷以及腸血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響將三組大鼠的一部分腸組織進(jìn)行丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和二胺氧化酶(DAO)活性測(cè)定。另一部腸組織在使用10％甲醛固定后使用免疫組化法測(cè)定血管性血友病因子(VWF)以及細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)

4、的活化程度。
　　第三部分:200mmol/L高滲鈉鹽復(fù)蘇液對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠腸組織 p38MAPK以及JNK通道影響使用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)測(cè)量三組大鼠腸組織中p38MAPK以及JNK通道的活性表達(dá)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　三.結(jié)果：
　　第一部分LR組血鈉濃度明顯低于HS組和對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。HS組與對(duì)照組無明顯差異(P>0.05)。在使用 LR組與 HS組復(fù)蘇后,腸組織含水

5、量均高于于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或 P<0.01),HS組與 LR組相比其腸組織含水量比較低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。LR組各時(shí)間點(diǎn)血 TNF-α、IL-1β濃度均高于相應(yīng) HS組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或 P<0.01)。LR組和HS血HMGB1與對(duì)照組相比在傷后2小時(shí)無明顯差異(P>0.05),但8小時(shí)和24小時(shí)點(diǎn)均高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),LR組傷后8小時(shí)和

6、24小時(shí)血中HMGB1濃度均高于相應(yīng)的HS組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　第二部分LR組和HS組各時(shí)間點(diǎn)腸組織MDA含量均高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。 LR組各時(shí)間點(diǎn)的腸組織MDA含量均高于HS組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。LR組與HS組腸組織SOD與DAO活性均低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。LR組腸組織SOD與DAO活性均低于各時(shí)間點(diǎn)的HS

7、組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或 P<0.01)。腸組織VWF及ICAM-1免疫組化活性顯示:與HS組相比,LR組各時(shí)間點(diǎn)腸組織ICAM-1表達(dá)均增強(qiáng)而VWF表達(dá)減弱。
　　第三部分腸組織p38MAPK及JNK通道的活性表達(dá)檢測(cè)示:LR組和HS組在2h,8h,24h三點(diǎn),腸組織p38MAPK及JNK通道的活性表達(dá)均比對(duì)照組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),其中LR組各時(shí)間點(diǎn)腸組織p38MAPK及JNK通道

8、活性表達(dá)均高于HS組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。
　　四.結(jié)論：
　　(1)與LR相比,使用200mmol/L的HS進(jìn)行液體復(fù)蘇能防止低鈉血癥的發(fā)生,減輕大鼠嚴(yán)重燙傷后的腸道水腫并能抑制相關(guān)炎性因子的表達(dá)。
　　(2)與LR相比,使用200mmol/L的HS進(jìn)行液體復(fù)蘇能減輕嚴(yán)重燙傷大鼠傷后腸道的氧化損傷,并能有效保護(hù)腸血管內(nèi)皮細(xì)胞。
　　(3)與LR相比,使用200mmol/L的HS進(jìn)行