200mmol-L高滲鈉鹽復蘇液對嚴重燙傷大鼠腸損傷影響的分子機制.pdf

1、一.研究目的：
　　本研究通過觀察200mmol/L高滲鈉鹽液(HS)和乳酸鈉林格液(LR)對嚴重燙傷大鼠液體復蘇的效果,從炎癥因子,氧化損傷,信號轉導通道等方面闡述200mmol/L高滲鈉鹽液(HS)對大鼠嚴重燙傷后腸損傷影響的分子機制。
　　二.研究方法：
　　于安徽醫(yī)科大學實驗動物中心預先購置56只雌性SD大鼠,體重在200-250g。將購買的大鼠適應性飼養(yǎng)一周,實驗前將其隨機分成三組:對照組(8只)、LR組(2

2、4只)、HS組(24只)。所有大鼠使用尾靜脈置管,去除所有大鼠背部毛發(fā),假燙傷組大鼠不予燙傷,LR組與HS組給予大鼠背部燙傷。燙傷組分別使用LR復蘇和HS復蘇。LR組和HS組大鼠均在傷后2小時、8小時和24小時處死取血以及腸組織。
　　第一部分:200mmol/L高滲鈉鹽復蘇液對嚴重燙傷大鼠血鈉,腸道水腫以及炎性因子表達的影響分別稱取三組大鼠腸組織干重與濕重并測量血漿鈉濃度、計算腸含水量,使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測量血漿中

3、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)以及高遷移率蛋白B1(HMGB1)。將取得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
　　第二部分:200mmol/L高滲鈉鹽復蘇液對嚴重燙傷大鼠腸道氧化損傷以及腸血管內(nèi)皮細胞的影響將三組大鼠的一部分腸組織進行丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和二胺氧化酶(DAO)活性測定。另一部腸組織在使用10％甲醛固定后使用免疫組化法測定血管性血友病因子(VWF)以及細胞間黏附分子-1(ICAM-1)

4、的活化程度。
　　第三部分:200mmol/L高滲鈉鹽復蘇液對嚴重燙傷大鼠腸組織 p38MAPK以及JNK通道影響使用蛋白質印跡法(Western Blot)測量三組大鼠腸組織中p38MAPK以及JNK通道的活性表達并進行統(tǒng)計學分析。
　　三.結果：
　　第一部分LR組血鈉濃度明顯低于HS組和對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。HS組與對照組無明顯差異(P>0.05)。在使用 LR組與 HS組復蘇后,腸組織含水

5、量均高于于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或 P<0.01),HS組與 LR組相比其腸組織含水量比較低,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。LR組各時間點血 TNF-α、IL-1β濃度均高于相應 HS組差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或 P<0.01)。LR組和HS血HMGB1與對照組相比在傷后2小時無明顯差異(P>0.05),但8小時和24小時點均高于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01),LR組傷后8小時和

6、24小時血中HMGB1濃度均高于相應的HS組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　第二部分LR組和HS組各時間點腸組織MDA含量均高于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。 LR組各時間點的腸組織MDA含量均高于HS組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。LR組與HS組腸組織SOD與DAO活性均低于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。LR組腸組織SOD與DAO活性均低于各時間點的HS

7、組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或 P<0.01)。腸組織VWF及ICAM-1免疫組化活性顯示:與HS組相比,LR組各時間點腸組織ICAM-1表達均增強而VWF表達減弱。
　　第三部分腸組織p38MAPK及JNK通道的活性表達檢測示:LR組和HS組在2h,8h,24h三點,腸組織p38MAPK及JNK通道的活性表達均比對照組高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01),其中LR組各時間點腸組織p38MAPK及JNK通道

8、活性表達均高于HS組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。
　　四.結論：
　　(1)與LR相比,使用200mmol/L的HS進行液體復蘇能防止低鈉血癥的發(fā)生,減輕大鼠嚴重燙傷后的腸道水腫并能抑制相關炎性因子的表達。
　　(2)與LR相比,使用200mmol/L的HS進行液體復蘇能減輕嚴重燙傷大鼠傷后腸道的氧化損傷,并能有效保護腸血管內(nèi)皮細胞。
　　(3)與LR相比,使用200mmol/L的HS進行