不同鈉離子濃度高滲鹽復蘇液對重度燙傷大鼠肝損傷的影響.pdf

1、目的：
　　本實驗通過采用600mmol/L、800mmol/L、1000mmol/L三種 Na+濃度高滲鈉鹽液（HS）和乳酸格林鈉液（LR）對重度燙傷大鼠進行液體復蘇，從肝臟功能，肝組織細胞形態(tài)，炎癥反應，氧化應激，炎癥相關信號轉導通道蛋白等方面探討不同高滲鈉鹽液（HS）對大鼠重度燙傷后肝臟損傷的影響。
　　方法：
　　健康成年雌性SD大鼠104只，體重200-250g，隨機分成五組：假傷組（8只）、其余為燙傷組包括

2、 LR組（24只）、600HS組（24只）、800HS組（24只）、1000HS組（24只）。大鼠麻醉后扎套管針尾靜脈置管，剃去背部毛發(fā)，假傷組大鼠不予燙傷及補液，擬傷后直接取腹主動脈血及肝組織；其余各組均給予大鼠背部Ⅱ°至Ⅲ°開水燙傷，傷后分別使用 LR復蘇和三種不同 HS復蘇。燙傷組大鼠于補液后2h、8h和24h取腹主動脈血及肝組織。
　　第一部分：不同鈉離子濃度高滲鹽復蘇液對重度燙傷大鼠肝功能損傷及肝細胞損傷的影響
　

3、　取出五組大鼠的一部分肝臟組織及血漿，使用自動生化儀檢測血漿中 ALT及AST含量，肝臟組織在使用10%甲醛固定后使用 HE染色法染色觀察組織細胞形態(tài)。
　　第二部分：不同鈉離子濃度高滲鹽復蘇液對重度燙傷大鼠肝臟氧化損傷及炎癥因子的影響
　　取出五組大鼠的一部分肝臟組織及血漿，比色法對肝組織進行丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性測定。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測量血漿中腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素1

4、β（IL-1β）以及高遷移率族蛋白B1（HMGB-1）。將取得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
　　第三部分：不同鈉離子濃度高滲鹽復蘇液對重度燙傷大鼠肝臟組織 p38MAPK及JNK通道活化的影響
　　使用蛋白質印跡法（Western Blot）測量五組大鼠肝臟組織中 p38MAPK以及JNK通道磷酸化蛋白比值并進行統(tǒng)計學分析。
　　結果：
　　第一部分
　　與假傷組相比，傷后各時間點，其余各組 ALT、AST均明顯升高

5、（P＜0.01）；與 LR組相比，傷后各時間點，600HS組 ALT、AST均明顯降低，（P＜0.01），而800HS組及1000HS組ALT、AST在傷后2、8小時未見顯著變化（P＞0.05），在傷后24小時800HS組及1000HS組 ALT、AST均明顯降低（P＜0.01）；與600HS組相比，800HS組及1000HS組 ALT、AST在傷后2、8小時明顯升高（P＜0.01），在傷后24小時，800HS組及1000HS組ALT、

6、AST未見顯著差異（P＞0.05）。肝臟組織 HE染色顯示：傷后各時間點，LR組大鼠肝細胞可見明顯脂肪樣變，部分可見細胞水腫；傷后2、8小時 HS組大鼠隨高滲鹽濃度升高，上述病理變化增多；傷后24小時，三組 HS組大鼠肝臟病理變化無明顯差異。
　　第二部分
　　與假傷組相比，傷后各時間點，LR組、800HS組和1000HS組 TNF-α與IL-1β均明顯升高（P＜0.01），而600HS組未見明顯變化（P＞0.05）；與 L

7、R組相比，傷后各時間點600HS組 TNF-α與 IL-1β均明顯降低（P＜0.01），800HS組和1000HS組未見顯著變化（P＞0.05）。傷后2小時，五組 HMGB-1無顯著差異（P＞0.05），傷后8、24小時，與假傷組相比，LR組、800HS組和1000HS組 HMGB-1均明顯升高（P＜0.01），而600HS組未見明顯差異（P＞0.05）；與 LR組相比，各HS組HMGB-1均明顯降低（P＜0.01）；與600HS組相比

8、，800HS組及1000HS組HMGB-1明顯升高（P＜0.01）。
　　與假傷組相比，傷后各時間點其余各組 MDA含量明顯升高 SOD活性明顯降低（P＜0.01）；與 LR組相比，傷后各時間點600HS組 MDA含量明顯降低SOD活性明顯升高（P＜0.01），800HS組、1000HS組未見顯著變化（P＞0.05）；與600HS組相比，傷后各時間點800HS組及1000HS組MDA含量明顯升高SOD活性明顯降低（P＜0.01）。

9、
　　第三部分
　　肝臟組織p38MAPK以及JNK通道磷酸化蛋白比值顯示：LR組和各HS組在傷后2h、8h及24h，樣本肝臟組織p38MAPK及JNK通道的活性表達均比假傷組顯著升高（P＜0.01）；而LR組、800HS組及1000HS組p38MAPK及JNK通道活性表達均顯著高于600HS組（P＜0.01），而800HS組及1000HS組p38MAPK及JNK通道活性與LR組無差異（P＞0.05）。
　　結論：

10、r>　?。?）與傷后使用LR相比，使用600mmol/L鈉離子濃度的高滲鹽溶液進行液體復蘇能減輕但不終止大鼠的肝功能失常及肝細胞形態(tài)結構的損傷，但是隨著Na+濃度升高達到800及1000mmol/L后，效果降低。
　　（2）與傷后使用LR相比，使用600mmol/L鈉離子濃度的高滲鹽溶液進行液體復蘇能減輕并部分終止重度燙傷大鼠傷后肝臟的氧化損傷以及炎癥反應發(fā)生，但是隨著Na+濃度升高，達到800及1000mmol/L后，效果降低。