復(fù)方燙傷膏對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷模型的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、燒燙傷(burns/scalds)為臨床常見病和多發(fā)病,是日常工作和生活中最常見的意外傷害之一。致病因素多種多樣,嚴(yán)重程度取決于受傷組織的范圍和深度,有較高的病死率,目前尚無特效治療方法。復(fù)方燙傷膏(Fu fang tang shang gao, FFTSG)是名老中醫(yī)祖?zhèn)髅胤?由黃柏、黃芪、黃芩等藥物組成,具有化腐生肌、抗菌、消炎、止痛,促進(jìn)組織細(xì)胞、表皮細(xì)胞再生等功效。本課題主要觀察復(fù)方燙傷膏對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷模型的保護(hù)作用,并進(jìn)一步

2、探討其可能的作用機(jī)制,為進(jìn)一步促進(jìn)復(fù)方燙傷膏在臨床的推廣應(yīng)用及開發(fā)提供充足的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1、FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷模型的保護(hù)作用
　　采用浸入沸水的鐵棒制備大鼠深Ⅱ度燙傷模型,并經(jīng)病理組織學(xué)檢查、鑒定為深Ⅱ度燙傷。燙傷30min后,燙傷大鼠單籠飼養(yǎng),隨機(jī)分組,給藥組分別在燙傷部位涂相應(yīng)的藥物0.5g/只,每天一次,連續(xù)給藥21天。分別在傷后不用時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面取材,測(cè)定藥物對(duì)燙傷創(chuàng)面的創(chuàng)面愈合率、組

3、織含水量及病理組織學(xué)的影響。
　　1.1FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷組織創(chuàng)面愈合率的影響
　　采用描記稱重法測(cè)定大鼠燙傷后24h、7d、14d、21d的創(chuàng)面愈合率。結(jié)果顯示,FFTSG(0.4,0.2g浸膏.g生藥-1)燙傷后7d創(chuàng)面愈合率明顯升高;FFTSG(0.4,0.2,0.1g浸膏.g生藥-1)燙傷后14d、21d創(chuàng)面愈合率明顯升高。表明FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷模型具有良好的保護(hù)作用,能明顯促進(jìn)創(chuàng)面愈合,并具有一定的

4、量效、時(shí)效關(guān)系。
　　1.2FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷組織組織含水量的影響
　　采用干濕法測(cè)定大鼠燙傷后24h、48h、7d、14d、21d的組織含水量。結(jié)果顯示,FFTSG(0.4g浸膏.g生藥-1)組燙傷后48h組織含水量有明顯下降。燙傷后第7d、14d、21d,FFTSG(0.2,0.1g浸膏.g生藥-1)中、低劑量組織含水量進(jìn)一步下降。
　　1.3FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷組織創(chuàng)面病理組織學(xué)的影響
　　分

5、別于燙傷后24h、7d、14d、21d切取創(chuàng)面組織標(biāo)本制成石蠟切片,HE染色,光鏡觀察創(chuàng)面修復(fù)情況。結(jié)果如下:模型組表現(xiàn)為表皮結(jié)構(gòu)不完整,有水腫、壞死及炎性滲出,部分創(chuàng)面有表皮覆蓋,膠原纖維束及成纖維細(xì)胞數(shù)較少;各用藥組表現(xiàn)為表皮結(jié)構(gòu)基本完整,可見創(chuàng)面部分或完全被表皮覆蓋,膠原纖維及纖維細(xì)胞數(shù)量明顯多于模型組,肉芽組織形成,毛囊增生,炎性滲出較少。隨著時(shí)間延續(xù),各用藥組大鼠燙傷創(chuàng)面組織修復(fù)明顯好轉(zhuǎn)。
　　2、FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度

6、燙傷模型的保護(hù)作用機(jī)制
　　2.1FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷組織創(chuàng)面血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)含量的影響
　　采用ELISA法測(cè)定大鼠燙傷后24h、48h、7d、14d、21d組織中VEGF含量。結(jié)果顯示,在燙傷后第14d,FFTSG(0.4,0.2g浸膏.g生藥-1)組創(chuàng)面VEGF含量顯著增加。燙傷后第21d,FFTSG(0.4,0.2,0.1g浸膏

7、.g生藥-1)創(chuàng)面VEGF含量進(jìn)一步升高。提示FFTSG促進(jìn)燙傷創(chuàng)面組織愈合可能與增加創(chuàng)面組織VEGF含量有關(guān)。
　　2.2FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷組織創(chuàng)面微血管密度(Microvascular density, MVD)的影響
　　采用免疫組織化學(xué)染色法測(cè)定大鼠燙傷后48h、7d、14d、21d組織中MVD。結(jié)果顯示,燙傷后第7d,FFTSG(0.4,0.2g浸膏.g生藥-1)組創(chuàng)面組織MVD顯著升高。燙傷后第14、21

8、d,FFTSG(0.4,0.2,0.1g浸膏.g生藥-1)創(chuàng)面組織MVD均顯著增加。提示FFTSG促進(jìn)燙傷創(chuàng)面組織愈合可能與增加創(chuàng)面組織MVD有關(guān)。
　　2.3FFTSG的抗脂質(zhì)過氧化作用
　　采用紫外分光光度法測(cè)定大鼠燙傷后24h、48h、7d血清中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性。結(jié)果顯示,燙傷后48h,FFTSG(0.4,0.2

9、g浸膏.g生藥-1)組MDA含量顯著下降,SOD活性明顯升高;燙傷后第7d,FFTSG(0.4,0.2,0.1g浸膏.g生藥-1)血清MDA含量進(jìn)一步下降,SOD活性進(jìn)一步提高。提示FFTSG具有抗脂質(zhì)過氧化作用,這可能與其發(fā)揮燙傷創(chuàng)面的保護(hù)作用密切相關(guān)。
　　2.4FFTSG對(duì)大鼠深Ⅱ度燙傷血清中腫瘤壞死因子-a(Tumor necrosis factor-a,TNF-a)和白細(xì)胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)

10、水平的影響
　　采用ELISA法測(cè)定大鼠燙傷后24h、48h血清中TNF-a和IL-1水平。結(jié)果顯示,燙傷后24h、48h,FFTSG(0.4,0.2,0.1g浸膏.g生藥-1)大鼠血清TNF-a水平呈明顯下降;燙傷后48h,FFTSG(0.4,0.2g浸膏.g生藥-1)組血清中IL-1水平顯著下降。提示FFTSG能夠抑制炎癥介質(zhì)的釋放,這可能是其促進(jìn)燙傷創(chuàng)面組織愈合,發(fā)揮燙傷創(chuàng)面保護(hù)作用的重要機(jī)制。
　　結(jié)論:復(fù)方燙傷膏能