四君子湯對脾虛大鼠腸粘膜修復(fù)及葡萄糖吸收的機(jī)理研究.pdf

1、目的：
　　研究四君子湯對脾氣虛證大鼠腸粘膜損傷修復(fù)和葡萄糖吸收的影響，從而進(jìn)一步探究四君子湯“健脾助運(yùn)”的作用機(jī)理。
　　方法：
　?。?）采用皮下注射利血平的方法建立大鼠脾虛模型，并通過造模前后大鼠一般狀態(tài)和D-木糖排泄率的變化進(jìn)行模型驗證。
　　（2）將SD大鼠分為：正常組，自然恢復(fù)組，精瞇低、中、高劑量組，四君子湯低、中、高劑量組和表皮生長因子(EGF)組。采用在體單向腸灌流模型、硫酸-苯酚法和紫外-可見

2、分光光度法相結(jié)合，測定各實驗組大鼠空腸對葡萄糖的吸收；并將各實驗組的大鼠空腸組織制作病理切片，觀察比較其粘膜的損傷修復(fù)情況。
　?。?）采用免疫組化技術(shù)測定各實驗組鈉依賴性葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體(SGLT-1)和易化性葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體(GLUT-2)蛋白在空腸粘膜的表達(dá)差異；運(yùn)用實時熒光定量PCR(RT-PCR)測定各實驗組大鼠空腸粘膜SGLT-1 mRNA，GLUT-2 mRNA的表達(dá)差異。
　?。?）建立柱前衍生的反相高效液相色譜

3、法(HPLC)，測定各實驗組大鼠空腸多胺含量；運(yùn)用 RT-PCR測定各實驗組大鼠空腸粘膜上鳥苷酸脫羧酶基因(ODC mRNA)的表達(dá)差異。
　　結(jié)果：
　?。?）利血平注射造模后，大鼠體重和尿 D-木糖排泄率明顯低于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　?。?）與正常組相比，自然恢復(fù)組大鼠對葡萄糖的吸收顯著降低，且空腸粘膜損傷明顯；與自然恢復(fù)組相比，各給藥組葡萄糖的吸收速率常數(shù)(Ka)和有效滲透系數(shù)(Papp)

4、顯著增加(P<0.05)。對各組空腸粘膜病理切片進(jìn)行觀察比較得出：各給藥組空腸粘膜損傷明顯得到修復(fù)(P<0.05)。
　?。?）免疫組化結(jié)果顯示，各給藥組的SGLT-1和GLUT-2蛋白表達(dá)與自然恢復(fù)組相比均增加(P<0.05)。RT-PCR結(jié)果顯示，與自然恢復(fù)組相比，各給藥組的SGLT-1mRNA、GLUT-2 mRNA表達(dá)均上調(diào)，且存在顯著性差異(P<0.05)。
　?。?） HPLC結(jié)果表明，與自然恢復(fù)組相比，各給藥組