金山五味子果實(shí)化學(xué)成分和生物活性暨2-甲氧基胡桃醌誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡機(jī)制.pdf

1、本論文共分為三個(gè)部分。
　　第一章對(duì)神農(nóng)架產(chǎn)五味子屬植物金山五味子(Schisandra glaucescens Diels)果實(shí)的化學(xué)成分及其生物學(xué)活性進(jìn)行了研究。第二章對(duì)從野核桃根皮中分離獲得的抗腫瘤活性成分2-甲氧基胡桃醌誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞HepG2凋亡的機(jī)制進(jìn)行了研究。論文第三部分對(duì)2001-2012年間獲頒Arthur E. Schwarting獎(jiǎng)和Jack L. Beal獎(jiǎng)的25篇J. Nat. Prod.期刊文章及相關(guān)背

2、景進(jìn)行了綜述。
　　一、金山五味子果實(shí)化學(xué)成分及生物活性研究
　　金山五味子(Schisandra glaucescens Diels)是一種五味子科五味子屬的藤本植物，主要分布于湖北省西部和四川省東南部地區(qū)。本實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)該植物藤莖的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究，從中發(fā)現(xiàn)了一系列結(jié)構(gòu)新穎、生物活性顯著的化合物，但目前尚無關(guān)于金山五味子果實(shí)化學(xué)成分及生物活性的研究報(bào)道。
　　為開發(fā)利用金山五味子果實(shí)資源，對(duì)其化學(xué)成分和生物學(xué)

3、活性進(jìn)行了系統(tǒng)研究，從中共分離得到36個(gè)化合物，包括10個(gè)新化合物?；衔镱愋秃w木脂素、三萜、倍半萜、有機(jī)酸和脂肪醇。通過理化常數(shù)測(cè)定及UV、IR、HRESIMS、ECD、1H NMR、13C NMR、DEPT、HSQC、HMBC、1H-1H COSY、NOESY等波譜數(shù)據(jù)分析，并結(jié)合ECD計(jì)算、水解反應(yīng)、氣相分析、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照等方法，最終確定了上述36個(gè)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。在所得到的的化合物中，化合物1、2、3、4a、4b為新的木脂素類

4、成分，而化合物15、16、17、18、19為新的三萜類成分。
　　本實(shí)驗(yàn)還分別對(duì)分離獲得的木脂素類成分（化合物1-14）和三萜類成分（化合物15-31）的生物活性進(jìn)行了研究。對(duì)于木脂素類成分，我們測(cè)試了其抗氧化活性及神經(jīng)保護(hù)作用，結(jié)果顯示化合物4、7、8、10、11和12在DPPH氧化自由基清除實(shí)驗(yàn)及FRAP總抗氧化活性測(cè)試中表現(xiàn)出不同程度的抗氧化作用，而化合物1、2、6、7、8、11和12則表現(xiàn)出對(duì)Aβ25-35引起的人神經(jīng)母瘤

5、細(xì)胞SHSY5Y損傷的保護(hù)作用。此外，我們還測(cè)試了三萜類成分對(duì)小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16的細(xì)胞毒性作用，結(jié)果顯示化合物22、25、28和29對(duì)B16細(xì)胞表現(xiàn)出較強(qiáng)的細(xì)胞毒性（其中化合物22和28的IC50值均小于10μM），且上述4種三萜類化合物的細(xì)胞毒活性為首次報(bào)道。
　　二、2-甲氧基胡桃醌誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡機(jī)制研究
　　2-甲氧基胡桃醌是從野核桃(Juglans cathayensis Dode)根皮中分離獲得的一種

6、含量較大的萘醌類化合物。本實(shí)驗(yàn)室前期工作顯示，該化合物在體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中對(duì)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)表現(xiàn)出很強(qiáng)的抑制作用，具有良好的抗腫瘤藥理活性，但目前尚無關(guān)于該化合物抗腫瘤作用機(jī)制的研究報(bào)道。
　　為弄清2-甲氧基胡桃醌對(duì)HepG2細(xì)胞的作用機(jī)制，利用流式細(xì)胞儀結(jié)合PI染色的方法分析了2-甲氧基胡桃醌對(duì)HepG2細(xì)胞細(xì)胞周期的影響，利用流式細(xì)胞儀結(jié)合AnnexinV-FITC/PI染色的方法測(cè)試了2-甲氧基胡桃醌誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的凋亡率