遠端缺血預處理對缺血再灌注后腎功能的作用及機制.pdf

1、本文對遠端缺血預處理對缺血再灌注后腎功能的作用及機制進行了研究。本研究分為兩個部分：
　　第一部分：急性腎缺血再灌注模型建立。
　　背景：急性腎損傷（Acute Kidney Injury，AKI）是一種常見的臨床綜合征，主要表現為腎功能的急性快速下降及代謝廢物的累積。在外科手術中，因器官缺血再灌注損傷引起的急性腎損傷是臨床上常見的一種術后并發(fā)癥，它可導致術后死亡率升高。因此在開展急性腎缺血再灌注損傷研究的基礎是建立合適的動

2、物模型。本研究中采用雄性Sprague-Dawley大鼠，在預實驗基礎上，綜合既往研究的實驗方案，建立合適的急性腎缺血再灌注模型。
　　方法：雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分為2組：假手術組（Sham）：開腹，只分離左右兩側腎蒂，關腹；急性缺血再灌注組（IR）：開腹，分離左右兩側腎蒂，采用微創(chuàng)血管夾夾閉左側腎蒂的同時摘除右側腎臟，夾閉45 min后，松開血管夾，恢復血液灌流，關腹。所有分組在術后6 h和24 h時間節(jié)點分

3、別處死并進行相應的標本收集來檢測血液中的肌酐（Creatinine，Cr）、尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）和腎組織中的髓過氧化物酶（Myeloperoxidase，MPO）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD），對左腎組織行蘇木精—伊紅染色（Hematoxylin-Eosin Staining，HE）評估病理變化并進行腎小管評分。<

4、br>　　結果：1.從腎功能指標Cr、BUN和氧化損傷指標MPO、MDA、SOD和腎小管評分來看，IR組均較Sham組在6 h和24 h這兩個時間節(jié)點均顯著升高（P＜0.001），腎臟損傷加重。2.在術后24 h內，IR組腎臟損傷逐漸加重，在24 h達到高值。
　　結論：采取左腎缺血45min，右腎摘除的方式可以建立合適的急性腎缺血再灌注損傷模型。
　　第二部分：遠端缺血預處理對缺血再灌注后腎功能的保護作用比較。
　　

5、目的：在泌尿外科手術如腎部分切除術、腎移植手術中，腎臟會面臨一段缺血過程，即使血流復灌仍將導致缺血再灌注損傷（Ischemia-Reperfusion Injury，IRI）。為減少缺血再灌注損傷，保護措施如缺血預處理（Ischemic Preconditioning，IPC）現象被發(fā)現。IPC最初運用于心血管系統(tǒng)的預處理來實現對心臟的保護。為了規(guī)避IPC對靶器官血管的壓迫損傷，“升級版”遠端缺血預處理現象（Remote Ischemi

6、c Preconditioning，RIPC）出現。RIPC能運用于心外器官，并且不同時期—即刻期RIPC（Acute Phase RIPC）和延遲期RIPC（Delayed Phase RIPC）保護作用不同。RIPC在泌尿外科領域的運用尚處于早期研究階段，對腎功能的保護作用仍具有爭議性。在對 RIPC作用機制研究中，缺氧誘導因子-1（Hypoxia-Inducible Factor-1，HIF-1）可能參與其中。為此，本部分主要探討

7、RIPC對缺血再灌注后腎功能的保護作用及HIF-1在RIPC中的作用。
　　方法：雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分為4組：假手術組（Sham）：開腹，只分離左右兩側腎蒂，關腹；急性缺血再灌注組（IR）：開腹，分離左右兩側腎蒂，采用微創(chuàng)血管夾夾閉左側腎蒂的同時摘除右側腎臟，夾閉45 min后，松開血管夾，恢復血液灌流，關腹。3.即刻期RIPC預處理組（Acute）：予以RIPC預處理后，即刻采取同IR組措施。4.延遲期RI

8、PC預處理組（Delayed）：予以RIPC預處理24 h后，采取同IR組措施。所有分組在術后24 h時間節(jié)點分別處死并進行相應的標本收集來檢測血液中的肌酐（Creatinine，Cr）、尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）和腎組織中的髓過氧化物酶（Myeloperoxidase，MPO）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD），對左腎組織

9、行蘇木精-伊紅染色（Hematoxylin-Eosin Staining，HE）評估病理變化并進行腎小管評分。此外，檢測HIF-1α的免疫印跡（Western Blot，WB）和免疫組化（Immunohistochemistry，IHC）表達，以及血液中腎上腺髓質素（Adrenomedullin，ADM）的檢測。
　　結果：1.從腎功能指標Cr、BUN和氧化損傷指標MPO、MDA、SOD和腎小管評分來看，Acute、Delayed

10、組均較 IR組顯著改善（P＜0.05），腎臟損傷減輕，保護效果顯著。2. Delayed組在BUN、MPO和腎小管評分上顯著優(yōu)于Acute組（P＜0.05），保護效果較Acute組好。3.經RIPC預處理后，HIF-1α表達水平在Acute和Delayed組較IR組顯著提高（P＜0.05），且Delayed組與Acute組相比具有更高的表達（P＜0.05）。延遲期 RIPC可顯著提高血液中腎上腺髓質素（ADM）水平（P＜0.001）。<