COX-2抑制劑尼美舒利通過(guò)mTOR途徑上調(diào)脂變肝細(xì)胞自噬基因Atg5的表達(dá).pdf

1、目的：研究COX-2抑制劑尼美舒利與脂變肝細(xì)胞自噬基因Atg5及mTOR信號(hào)通路的關(guān)系，揭示COX-2抑制劑尼美舒利對(duì)脂變肝細(xì)胞自噬的作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.體外培養(yǎng)L-O2細(xì)胞，利用MTT法結(jié)合油紅染色、TG含量檢測(cè)篩選油酸對(duì)L-O2最為有效的作用濃度及時(shí)間；利用MTT法篩選不同濃度尼美舒利及雷帕霉素對(duì)L-O2活性的影響，確定尼美舒利及雷帕霉素最為有效的作用濃度；
　　2.實(shí)驗(yàn)分為5組：正常對(duì)照組、脂變模型組

2、、尼美舒利組、雷帕霉素組、尼美舒利+雷帕霉素組，運(yùn)用Q-PCR法檢測(cè)自噬基因Atg5及mTOR信號(hào)通路mTOR基因的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.結(jié)合MTT、油紅染色、TG含量結(jié)果確定油酸20μg/mL為誘導(dǎo)肝細(xì)胞脂變的最佳濃度，72h為最佳時(shí)間，尼美舒利200μg/mL為抑制COX-2最佳濃度，雷帕霉素30nmol/L為抑制mTOR信號(hào)通路最佳濃度。
　　2.與尼美舒利組比較，尼美舒利+雷帕霉素組mTOR基因的表達(dá)量明

3、顯降低，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）
　　3.與脂變模型組比較，尼美舒利組mTOR基因的表達(dá)量明顯降低，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　4.與脂變模型組比較，尼美舒利組自噬基因Atg5表達(dá)量明顯增加，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　5.與脂變模型組比較，雷帕霉素組自噬基因Atg5的表達(dá)量明顯增高，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)
　　結(jié)論：
　　1.COX-2抑制劑尼美舒利可以上調(diào)非酒精性脂肪肝