YM155在腫瘤細胞化療增敏中的作用及機制研究.pdf

1、背景：
　　腫瘤是一種世界范圍內(nèi)均很常見的多發(fā)病，而惡性腫瘤則是目前對人類健康的危害表現(xiàn)最嚴重的一類疾病。我國最常為人所知和危害國人最嚴重的腫瘤有肺癌、乳腺癌、胃癌、肝癌、宮頸癌、白血病等，其中肺癌是最常見的、死亡率最高的腫瘤，而乳腺癌是中國女性所患最常見的惡性腫瘤。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族成員survivin，其蛋白水平在阿霉素耐藥及高轉(zhuǎn)移性乳腺癌

2、細胞中表達上調(diào)，提示 survivin在乳腺癌生存和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重要作用。YM155，survivin靶向抑制劑，其能顯著下調(diào)乳腺癌細胞中 survivin的表達。因此，我們推測 YM155可能通過抑制survivin來促進腫瘤細胞凋亡，增加腫瘤細胞對化療藥物的敏感性，在腫瘤細胞的生存及惡性腫瘤的治療中起到重要作用。
　　目的：
　　通過體外細胞學等實驗檢測YM155對4種不同生物學特性的腫瘤細胞系（2種肺癌細胞及2種乳腺癌

3、細胞）的促凋亡作用，以及檢測YM155是否增強腫瘤細胞對化療藥物紫杉醇（Paclitaxel，PAC）的敏感性，并闡述不同腫瘤細胞對YM155敏感性不同的可能原因及其機制。
　　方法：
　　1.采用體外實驗如 MTT、克隆形成等實驗檢測 YM155及紫杉醇單獨或聯(lián)合使用時對4種腫瘤細胞的增殖所產(chǎn)生的影響；
　　2.采用體外實驗如MTT、克隆形成、細胞凋亡、細胞周期等實驗檢測不同濃度的YM155作用于4種腫瘤細胞時對其增

4、殖、凋亡、周期所產(chǎn)生的影響，并觀察4種腫瘤細胞對 YM155敏感性是否不同；
　　3.采用體外實驗如western blot，qRT-PCR等實驗檢測P53，survivin，NF-κB通路等指標的變化，分析YM155促凋亡及其敏感性差異的作用機制。
　　結果：
　　1. YM155與化療藥物紫杉醇均抑制腫瘤細胞增殖誘導其凋亡，而YM155與紫杉醇聯(lián)合使用時所表現(xiàn)出的促進凋亡作用明顯優(yōu)于單獨使用紫杉醇；
　　2.

5、 YM155對腫瘤細胞的殺傷作用呈現(xiàn)濃度依賴性，隨著濃度的增加對腫瘤細胞的殺傷作用也增加。并且p53狀態(tài)不同的腫瘤細胞對YM155的敏感性也不同，p53野生型的腫瘤細胞對YM155的敏感性要低于p53突變型或p53缺失型的腫瘤細胞；
　　3. P53狀態(tài)不同的腫瘤細胞對YM155所產(chǎn)生的誘導MDM2的作用并不相同。在低濃度YM155的刺激下，P53野生型腫瘤細胞中MDM2轉(zhuǎn)錄水平上升， YM155作為survivin的靶向抑制劑仍