三七姜揮發(fā)油對(duì)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞的侵襲和遷移抑制作用及其機(jī)制初步探討.pdf

1、目的：
　　目的是研究三七姜揮發(fā)油對(duì)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞侵襲和遷移的抑制作用，并探討其可能機(jī)制。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞，CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)三七姜揮發(fā)油對(duì)CNE-2細(xì)胞增值能力的抑制作用，計(jì)算生長(zhǎng)抑制率及半數(shù)抑制濃度（IC50）；選取三七姜揮發(fā)油（0，20，40，60μg·ml-1）作用于CNE-2細(xì)胞0,24,48h，分別于三個(gè)不同時(shí)間段，采用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)三七姜揮發(fā)油對(duì)CNE-2細(xì)胞遷移能力的

2、抑制作用；Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)三七姜揮發(fā)油對(duì)CNE-2細(xì)胞侵襲能力的抑制作用。取作用48h后的CNE-2細(xì)胞，采用蛋白印跡法檢測(cè)MMP-2、MMP-9和VEGF等侵襲和遷移相關(guān)基因蛋白水平的表達(dá)；RT-PCR技術(shù)檢測(cè)MMP-2、MMP-9和VEGF等相關(guān)侵襲和遷移基因的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　三七姜揮發(fā)油作用于CNE-2細(xì)胞24h，48h，72h后，細(xì)胞半數(shù)抑制濃度分別為70.296μg·ml-1,63.749μg

3、·ml-1,59.532μg·ml-1，呈時(shí)間-劑量依賴性(P＜0.05)；不同濃度的三七姜揮發(fā)油（0，20，40，60μg·ml-1）作用于細(xì)胞48h后，劃痕實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與空白對(duì)照組相比，細(xì)胞的遷移能力隨著藥物濃度的增加而降低；Transwell實(shí)驗(yàn)顯示，隨著藥物濃度逐漸的增加，細(xì)胞的侵襲能力逐漸下降；RT-PCR顯示，與陰性對(duì)照組相比，MMP-2、MMP-9和VEGF等基因表達(dá)下調(diào)，且變化趨勢(shì)呈一定的濃度依賴性。蛋白免疫印跡法顯示，與陰