三七姜揮發(fā)油抑制CNE-2細(xì)胞增殖的研究.pdf

1、目的:研究三七姜揮發(fā)油對(duì)人鼻咽癌細(xì)胞株（CNE-2）生長(zhǎng)的抑制作用及其作用機(jī)制。
　　方法:實(shí)驗(yàn)采用人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-2，三七姜揮發(fā)油實(shí)驗(yàn)組分為120μg·mL-1、240μg·mL-1、360μg·mL-1、480μg·mL-1，作用24h后進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)。運(yùn)用MTT法檢測(cè)三七姜揮發(fā)油對(duì)CNE-2增殖抑制作用以及IC50;Hoechst33258熒光染色法觀察三七姜揮發(fā)油作用于CNE-2發(fā)生凋亡時(shí)細(xì)胞形態(tài)的變化;FITC-An

2、nexinV-PI雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè)三七姜揮發(fā)油作用于CNE-2后的細(xì)胞凋亡率的變化;PI染色流式細(xì)胞儀檢測(cè)三七姜揮發(fā)油對(duì)CNE-2周期的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基(ROS)含量;采用JC-1染色檢測(cè)CNE-2細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位（△ψm）的變化情況;RT-PCR技術(shù)檢測(cè)凋亡相關(guān)基因caspase-3、bcl-2編碼基因表達(dá)水平。
　　結(jié)果:三七姜揮發(fā)油對(duì)CNE-2細(xì)胞增殖具有抑制作用，且呈劑量依賴性和時(shí)間依賴性，作用2

3、4h后CNE-2細(xì)胞的IC50為300μg·mL-1;Hoechst33258熒光染色法觀察細(xì)胞核有明顯的凋亡形態(tài)變化;FITC-AnnexinV/PI雙染法發(fā)現(xiàn)三七姜揮發(fā)油能誘導(dǎo)CNE-2細(xì)胞凋亡，且隨著劑量的增加作用增強(qiáng);PI染色法說(shuō)明三七姜揮發(fā)油將CNE-2細(xì)胞阻滯于G1期;三七姜揮發(fā)油能顯著增加CNE-2細(xì)胞內(nèi)ROS的含量并能降低線粒體膜電位，同時(shí)作用24h后，120μg·mL-1、240μg·mL-1能明顯上調(diào)caspase-