蜂膠中揮發(fā)油有效成分的研究.pdf

1、蜂膠(propolis) 是由蜜蜂的工蜂將采自楊樹、柳樹、松樹等植物的幼芽和愈傷組織分泌的樹脂狀物質與自身的消化腺和蠟腺等腺體的分泌物混合之后形成的一種具有黏性的天然混合物。一般來說，蜂膠的基本成分為：50％的樹脂，30％的蜂蠟，10％的揮發(fā)物和芳香油，5％的花粉，以及5％的其它物質。近年來，研究發(fā)現(xiàn)蜂膠具有多種較強的藥理活性，如抗菌、消炎、抗真菌、抗病毒、抗原蟲、抗濾過性病原體、增強免疫調節(jié)、抗腫瘤、抗增殖、抗氧化和清除自由基、抗輻射

2、、對心臟的保護作用、局部麻醉鎮(zhèn)痛作用、降血脂等。蜂膠揮發(fā)油，是蜂膠的重要有效活性組份之一，約為蜂膠的百分之十。目前，研究已發(fā)現(xiàn)蜂膠揮發(fā)油具有抗菌和抗脂質過氧化等功能。本研究主要對蜂膠揮發(fā)油的提取、分離、理化性質及成分鑒定、抗氧化活性、抗菌活性進行了研究，其研究結果可為蜂膠揮發(fā)油作為化妝品或是藥物的開發(fā)與利用提供一定的實驗數據。本文主要研究結果歸納如下。 采用傳統(tǒng)與現(xiàn)代提取技術對蜂膠揮發(fā)油的提取進行了研究，并采用GC/MS對相應蜂

3、膠揮發(fā)油的成分進行分析。通過比較水蒸汽蒸餾法、常溫溶劑法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法、超臨界 CO<,2>流體萃取法的提取工藝，發(fā)現(xiàn)各類方法對蜂膠揮發(fā)油的提取率由高到低依次為：微波輔助提取法>超聲輔助提取法>常溫溶劑法>超臨界CO<,2>萃取法>水蒸汽蒸餾法，微波輔助萃取法最佳工藝條件為：萃取溫度 30℃，液料比為11，萃取時間32min，蜂膠揮發(fā)油的得率達13.83％，其提取率是溶劑提取法的1.51倍，并且時間大大縮短為其2/4

4、5。比較萜烯類及其酯類成分的相對含量可以看出，水蒸汽蒸餾法提取的蜂膠揮發(fā)油萜烯類及其酯類有效成分的相對含量最高，達到 80.1％，主要成分為α-桉葉油醇(30.28％)、γ-桉葉油醇 (10.99％)、異麥芽酚 (9.25％)、正二十烷 (8.76％)、α-沒藥醇 (7.77％)、愈創(chuàng)木醇 (6.15％)、順-14-二十九烯 (3.98％) 桉葉烷-3，7(11)-二烯 (3.45％)、二十九烷 (3.21％)、長葉醛 (1.90％)、

5、菖蒲烯 (1.74％)、姜黃烯 (1.68％)、雪松醇 (1.51％)、匙葉桉油烯醇 (斯巴醇) (1.51％) 等；其次是超臨界 CO<,2>提取法提取的蜂膠揮發(fā)油，萜烯類及其酯類成分相對含量為 26.43％，其中主要的活性成分有α-桉葉油醇 (6.89％)、羊毛甾醇醋酸酯 (5.31％)、γ-桉葉油醇 (2.97％)、羽扇豆醇 (2.55％)。 采用乙醇溶解法和系統(tǒng)溶劑法對蜂膠渣中的揮發(fā)油組分進行了分離。乙醇溶解法使萜烯類及

6、其酯類成分的相對含量由1.18％提高到9.57％；系統(tǒng)溶劑法可以有效地分離得到相對含量為38.71％的揮發(fā)油，同時得到相對含量為45.26％的含有四種黃酮成分的組分，還分離出相對含量為51.02％的油酸。 采用國標和藥典的方法對蜂膠揮發(fā)油13項理化指標的進行了初步鑒定。 采用DPPH法和化學發(fā)光法對蜂膠揮發(fā)油的抗氧化活性進行了研究，并采用三氯化鋁分光光度法和福林酚法分別測定了蜂膠揮發(fā)油的總黃酮含量、總酚含量，探討了蜂膠揮

7、發(fā)油抗氧化的作用機理。結果表明，五種方法提取的蜂膠揮發(fā)油都具有清除DPPH自由基、抑制超氧自由基和羥基自由基的的抗氧化活性，表現(xiàn)為中等強度抗氧化活性，總體較蜂膠醇提物、水提物、超臨界 CO<,2> 萃取物弱；超臨界CO<,2>萃取的蜂膠揮發(fā)油具有很強的抗氧化活性，清除 DPPH 自由基 IC<,50> 約為 50μg/mL，清除超氧陰離子自由基的 IC<,50> 約為0.75mg/mL，清除羥基自由基的IC<,50>約為 1.3mg/m

8、L；蜂膠清除DPPH的作用機理與其中的成分有關，具有抗氧化活性的物質可以分為超臨界CO<,2>萃取的蜂膠揮發(fā)油中的萜烯類、蜂膠乙醇提取物中的黃酮及總酚、蜂膠水提物中的幾種含量較低的水溶性成分四類；蜂膠揮發(fā)油清除·O<,2><'->和·OH的作用機制，可能主要是與其中的黃酮類成分有關。 采用濾紙片法和試管連續(xù)稀釋法對蜂膠揮發(fā)油的抗菌活性進行了比較研究，并對其作用機理做了探討。結果表明，超臨界 CO<,2> 萃取的蜂膠揮發(fā)油的抗菌活

9、性與蜂膠超臨界 CO<,2>萃取物相當，兩者均強于蜂膠醇提物；常溫溶劑法、超聲波輔助提取法及超臨界CO<,2>流體萃取法提取的蜂膠揮發(fā)油對黑曲霉有抑制作用，并且其效果均強于蜂膠醇提物；蜂膠揮發(fā)油樣品對大腸埃希氏桿菌均有抑制作用，水蒸汽蒸餾法和超臨界CO<,2>流體萃取法提取的蜂膠揮發(fā)油對大腸埃希氏桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、普通變形桿菌 MIC 為0.0391～0.625mg/mL；超臨界CO<,2>提取的蜂膠揮發(fā)油對大腸桿菌、