花椒揮發(fā)油GC-MS指紋圖譜及其成分的研究.pdf

1、花椒是一種常見的調(diào)味品，其化學(xué)成分主要有揮發(fā)油、生物堿、酰胺、木脂素、香豆素、黃酮類物質(zhì)、脂肪酸等?；ń樊a(chǎn)地不同，花椒中的各種組分及其含量也不同。花椒揮發(fā)油由于受氣候條件、土壤性質(zhì)、產(chǎn)地、品種等諸多因素的影響，極少出現(xiàn)有完全相同的成分組成和相同含量的分析結(jié)果。本論文比較了水蒸汽蒸餾法、溶劑萃取法和同時蒸餾萃取法三種揮發(fā)油提取方法，將GC-MS指紋圖譜技術(shù)應(yīng)用于花椒揮發(fā)油的分析，建立了花椒揮發(fā)油指紋圖譜，并對花椒揮發(fā)油的成分進(jìn)行了分析，采

2、用GC法測定了花椒揮發(fā)油中檸檬烯和芳樟醇的含量。研究結(jié)果如下：
　　 (1)比較了水蒸汽蒸餾法、溶劑萃取法和同時蒸餾萃取法，得到同時蒸餾萃取法提取花椒揮發(fā)油效果最好，并且確定了提取條件為：將干燥花椒果皮粉碎，過40目，采用無水乙醚為提取溶劑，超聲波處理5min，同時蒸餾萃取提取3h。
　　 (2)對花椒揮發(fā)油指紋圖譜進(jìn)行研究，建立了花椒揮發(fā)油指紋圖譜分析條件。氣相色譜條件：石英毛細(xì)管柱Rtx-Wax(0.25μm×30m

3、×0.32mm，100％聚乙二醇固定相)；程序升溫，柱溫40℃，保持1min，以3℃/min升至65℃，再以10℃/min升至90℃，然后以1.5℃/min升至120℃，最后以10℃/min升至230℃，保持5min；分流比25∶1；載氣為高純He，柱前壓為50kPa，流速為1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度250℃；接口溫度250℃；溶劑延遲時間2.5 min。質(zhì)譜條件：EI電子源，離子源溫度220℃，掃描范圍35-450m/z，標(biāo)準(zhǔn)圖庫

4、NIST05。
　　 (3)對四川、重慶、云南、貴州、甘肅地區(qū)青花椒和紅花椒樣品揮發(fā)油進(jìn)行了GC-MS分析，分別建立了青花椒揮發(fā)油指紋圖譜和紅花椒揮發(fā)油指紋圖譜。青花椒揮發(fā)油指紋圖譜有20個共有峰，紅花椒揮發(fā)油指紋圖譜有11個共有峰。青花椒揮發(fā)油主成分經(jīng)聚類分析后，16批樣品聚為4類，這4類青花椒產(chǎn)地分別是四川洪雅藤椒基地、云南昭通、重慶、四川金陽。紅花椒揮發(fā)油主成分經(jīng)聚類分析后，16批樣品也聚為4類，分別是甘肅天水市秦安縣郭家

5、鎮(zhèn)大油椒、甘肅天水市秦安縣和四川阿壩州金川縣、四川汶川縣、四川漢源和涼山州。
　　 (4)32批花椒樣品中，青花椒揮發(fā)油含量變化范圍為9.62g/100g～13.61g/100g，而紅花椒揮發(fā)油含量變化范圍為6.79g/100g～12.20g/100g，青花椒揮發(fā)油含量與紅花椒揮發(fā)油含量之間存在極顯著性差異(P≤0.01)。青花椒揮發(fā)油中，共有峰占總峰面積的百分比平均為88.39％，其中萜烯類平均峰面積百分比為41.95％，醇類

6、56.06％，酮類1.99％。紅花椒共有峰占總峰面積的百分比平均為75.90％，其中萜烯類平均峰面積百分比為52.59％，醇類34.50％，酯類12.91％。
　　 (5)采用GC法建立了檸檬烯和芳樟醇的含量測定方法，得到檸檬烯回歸方程Y=306213X-8925.9(r=0.9997，n=7)，線性范圍0.4765mg/mL～9.5300mg/mL，芳樟醇回歸方程Y=225875X+25659(r=0.9994，n=8)，線性

7、范圍1.0535 mg/mL～23.1300 mg/mL。對四川、重慶、云南、貴州、甘肅地區(qū)花椒樣品揮發(fā)油中的檸檬烯和芳樟醇含量進(jìn)行測定，結(jié)果表明，檸檬烯含量從2.9401 mg/g～29.1082 mg/g不等，青花椒揮發(fā)油中檸檬烯含量均值為12.8883mg/g，紅花椒揮發(fā)油中檸檬烯含量均值為14.0397 mg/g，二者間無顯著性差異；芳樟醇含量從1.5702 mg/g～114.2165 mg/g不等，青花椒揮發(fā)油中芳樟醇含量均值

8、為紅花椒的9.13倍，分別為72.5295 mg/g和7.9406 mg/g，且青花椒揮發(fā)油中芳樟醇含量與紅花椒之間存在極顯著性差異(P≤0.01)。32批花椒揮發(fā)油中，檸檬烯含量與芳樟醇含量間無顯著相關(guān)性。
　　 花椒揮發(fā)油指紋圖譜的研究，使花椒揮發(fā)油的研究從單一成分定性定量分析，轉(zhuǎn)向有效成分群體分析，更加科學(xué)、準(zhǔn)確地反映了花椒的內(nèi)在品質(zhì)。因此，花椒揮發(fā)油指紋圖譜的建立，可以作為花椒的鑒別和質(zhì)量控制模式，并為中藥標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的