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文檔簡(jiǎn)介
1、本試驗(yàn)以香蜂花(Melissa officinalis)帶芽莖段為材料,比較系統(tǒng)地進(jìn)行香蜂花莖段培養(yǎng)與快繁技術(shù)研究,摸索香蜂花試管苗工廠化生產(chǎn)模式的基本參數(shù),并系統(tǒng)地研究了香蜂花試管苗玻璃化的影響因素;同時(shí),以香蜂花種子、葉片和莖段為材料,進(jìn)行愈傷組織培養(yǎng)與植株再生研究。最后,利用GC-MS技術(shù)分析香蜂花試管苗和盆栽實(shí)生苗的揮發(fā)油成分差異,以期為香蜂花離體培養(yǎng)建立有效途徑,為香蜂花大規(guī)模工廠化試管育苗及種質(zhì)資源保護(hù)提供科學(xué)依據(jù)。主要研究
2、結(jié)果如下: 1.香蜂花帶芽莖段的培養(yǎng)。以香蜂花帶芽莖段為材料,研究了香蜂花帶芽莖段培養(yǎng)和離體繁殖。結(jié)果表明:3月取香蜂花帶芽莖段經(jīng)過75%乙醇30 s+0.1%HgCl2 5 min處理為最佳取材時(shí)期和消毒方式;帶芽莖段在MS+0.5 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA培養(yǎng)基中不定芽誘導(dǎo)率達(dá)到100.0%;不定芽適宜增殖的培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+0.1mg/L IBA,增殖倍數(shù)達(dá)
3、到4.6;最佳的生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.5 mg/L IBA,生根率達(dá)到100.0%;適宜的移栽基質(zhì)為1:1:1珍珠巖:蛭石:河沙,成活率為93.3%。 2.香蜂花試管苗工廠化生產(chǎn)模式的確定。香蜂花工廠化試管育苗主要技術(shù)參數(shù):繼代增殖系數(shù)4.5,每25 d繼代1次,一年可增殖繼代12代,生根率100.0%,移栽成活率93.3%。以此為參數(shù),離體培養(yǎng)時(shí)污染率控制在5%以下,玻璃化苗控制在5%以下,理論上香蜂花1個(gè)芽1年繼代12
4、次既可增殖403.8萬株,可以達(dá)到快繁的要求。 3.香蜂花試管苗玻璃化現(xiàn)象的研究。以香蜂花正常試管苗的帶芽莖段為材料,針對(duì)6-BA濃度、溫度、培養(yǎng)器皿、繼代時(shí)間、蔗糖濃度和瓊脂濃度等影響因素,研究了香蜂花帶芽莖段培養(yǎng)過程中控制玻璃化現(xiàn)象的措施。結(jié)果表明:香蜂花正常試管苗的適宜培養(yǎng)的6-BA濃度為0.5-2.0 mg/L,30 g/L蔗糖和7g/L瓊脂的培養(yǎng)基中玻璃化率為最低。試管苗培養(yǎng)于玻璃瓶+塑料膜的培養(yǎng)容器內(nèi),置于25℃培養(yǎng)
5、溫度,30 d繼代培養(yǎng)一次時(shí)可有效地控制玻璃化發(fā)生。 4.香蜂花愈傷組織的培養(yǎng)。以香蜂花種子、葉片、葉柄、莖段為材料,研究了香蜂花愈傷組織的培養(yǎng)。結(jié)果表明:香蜂花種子最佳的消毒方式為75%乙醇30 s+0.1%HgCl2 5 min,于MS培養(yǎng)基中萌發(fā)率達(dá)到85.5%;愈傷組織最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D,誘導(dǎo)率達(dá)97.1%:香蜂花不同取材部位(葉片,葉柄,莖段)的愈傷組織誘導(dǎo)率差
6、異不顯著,不同取材部位均可達(dá)到極高的愈傷誘導(dǎo)率;愈傷組織最佳增殖的培養(yǎng)基為MS+2mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.2 mg/L2,4-D,增殖率達(dá)到76.7%;在培養(yǎng)基MS+1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L2,4-D上部分愈傷組織可以分化芽苗。 5.香蜂花試管苗揮發(fā)油成分的氣相色譜.質(zhì)譜(GC-MS)分析。以香蜂花試管苗為材料,利用GC-MS技術(shù)共分離出19種物質(zhì),主要成分
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